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HCV感染人LDLR转基因小鼠肝癌细胞的初步研究: 2004年; 吕丽萍贾帅争王海平詹林盛王全立; 关键词：HCV感染鼠肝肝癌细胞转基因小鼠低密度脂蛋白受体

应用水动力转染技术使人低密度脂蛋白受体、CD81和浸入诱导蛋白L同时在小鼠体内表达: 2005年; 为建立人低密度脂蛋白受体(LDLR)、CD81和浸入诱导蛋白L(Sip-L)等多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,首先分别构建了白蛋白启动子调控的人LDLR、CD81和Sip-L基因的小鼠肝脏组织特异性表达载体,将3种质粒同时采用水动力转染技术导入小鼠体内,RT-PCR和免疫组化技术检测转入体内基因的表达及持续时间。结果表明,转染8h后即可检测到3种基因在体内转录,人LDLR和CD81在转染1～4d后可在50%～90%的肝细胞中高效表达,7d后检测不到目的基因表达。为了进一步延长转染基因在小鼠体内的表达时间,又分别构建了人LDLR、CD81和Sip-L的染色体整合型表达载体,将它们与噬菌体ФC31的整合酶表达载体同时水动力转染小鼠,3种基因在体内表达时间可持续到转染后25d。以上结果表明建立了多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,为确定这些分子能否使小鼠感染HCV奠定了基础。; 贾帅争胡锦辉郑晓玲吕丽萍刘敏霞詹林盛王全立; 关键词：丙型肝炎病毒低密度脂蛋白受体 CD81

人LDLR基因的克隆及在Hepa1-6细胞中的表达: 2004年; 目的 :从能感染HCV的人肝癌细胞HepG2中克隆出人LDLR基因 ,构建其真核表达质粒 ,并在小鼠肝癌细胞Hepa1 6中进行表达。方法 :从HepG2中提取总RNA ,采取逆转录PCR(RT PCR)方法得到人LDLR的cDNA。将获得的人LDLR基因克隆到真核表达载体pcDNA3中 ,进行酶切和序列鉴定。将重组质粒pcDNA3 hLDLR和空载体转入Hepa1 6 ,G4 18筛选 ,并用RT PCR和FACS检测人LDLR基因转录和蛋白的表达。结果 :人LDLR的cDNA已插入载体pcDNA3构建成真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,双酶切和测序表明 ,克隆的人LDLR与已登录GenBank的序列存在核苷酸多态性 ,但编码的氨基酸序列完全一致 ,该序列的GenBank登录号为gi|2 16 2 96 4 7|gb|AY114 15 5 .1,并且真核表达质粒的构建正确。用脂质体介导的方法转入Hepa1 6后 ,用RT PCR和FACS检测表明 ,细胞可表达人LDLR。结论 :成功地构建了真核表达质粒pcDNA3 hLDLR ,为进一步研究HCV和人LDLR的相互作用 ,以及建立可能的HCV细胞感染模型奠定了基础。; 吕丽萍贾帅争王海平詹林盛王全立; 关键词：克隆基因表达质粒

HCV慢性感染的分子免疫学机制研究进展被引量：2: 2006年; 丙型肝炎因其所具有的较高的慢性化程度而成为威胁人类健康的重要疾病。近年来报道了很多丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus,HCV)的转基因动物模型及细胞模型,这些研究为探讨HCV慢性化机制提供了一定的基础。该文主要讨论HCV慢性感染的分子免疫学机制,包括由于基因突变导致的免疫逃避及HCV蛋白影响机体免疫功能的机制。; 付秋霞王全立（审校）贾帅争（审校）; 关键词：免疫逃避信号传导

水动力转染基因在小鼠体内的长期高效表达被引量：8: 2005年; 水动力转染技术是近年新出现的一种体内基因转染方法,可以实现目的基因在小鼠体内的高效表达,有可能作为受精卵显微注射的一种简单替代技术。但该技术的缺点是转染基因多瞬时表达,外源基因在体内高效表达的时间通常不超过1周,而且局限于肝、肾等器官,从而限制了该技术广泛应用。为了延长水动力转染基因在小鼠体内长期高效表达的时间,从而能对目的基因的体内功能进行长期研究,国外研究者进行了广泛的探索,本文综述了相关研究的最新进展。; 贾帅争王全立; 关键词：水动力小鼠目的基因显微注射外源基因受精卵

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国家自然科学基金(30300184)