国家科技基础条件平台建设计划(20051KA21502)
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 相关作者：张宏卞晓翠顾蓓刘玉琴王春景更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠子宫颈癌U14细胞系的建立及生物学特性研究被引量：5
- 2008年
- 目的:建立小鼠宫颈癌肿瘤细胞系,观察其生物学特性。方法:采用肿瘤原代培养法对小鼠U14肿瘤进行体外传代培养,定期对培养细胞进行形态学观察,进行免疫组织化学鉴定、细胞周期检查、染色体检测、细胞生长测定,进行615、C57BL/6j小鼠移植观察体内成瘤情况,并用pEGFP-N1质粒转染U14细胞。结果:细胞呈贴壁和悬浮混合生长,CK阳性特征。体外连续培养10个月,传代50代,细胞倍增时间为21.83h,细胞周期测定G1期为34%,G2期为26.4%,S期为39.6%。培养U14细胞3～4天处于对数生长期,染色体为亚四倍体核型,众数为64～84条。615小鼠、C57BL/6j小鼠移植成瘤率均为100%,无支原体污染。建立了GFP(+)的U14-GFP单克隆细胞株。结论:成功建立了小鼠U14子宫颈癌细胞系及GFP标记的U14-GFP细胞株,体内移植可建立常规及带荧光标记的肿瘤模型,可用于体内体外相结合的肿瘤研究。
- 顾蓓冯海凉刘玉琴董继红张宏卞晓翠
- 关键词：小鼠宫颈癌细胞系生物学特性
- 应用聚合酶链式反应鉴定实验细胞的来源种属被引量：12
- 2009年
- 目的应用聚合酶链式反应(PCR)鉴定常见细胞的种属来源,以判断培养细胞是否存在种间的交叉污染。方法根据文献报道和NCBI数据库我们得到了32对种属特异性引物,并分别针对10种常见的细胞种属,对这些引物进行特异性和敏感性的筛选;以待检测细胞的基因组DNA为模板进行PCR及后续的琼脂糖凝胶电泳;以不同种属来源细胞的DNA混合物作为阳性对照模板,以水作为阴性对照模板。结果针对上述10种常见细胞来源的种属分别得到了1对特异性和敏感性均较好的引物,经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳后可以准确鉴定待检测细胞的种属来源,并判断该细胞是否存在种间污染。结论应用聚合酶链式反应可以简便、快速地鉴定实验细胞的种属,并判断该细胞是否存在种间的交叉污染。
- 卞晓翠刘玉琴王春景苏小玲赵晓梅顾蓓张宏
- 关键词：聚合酶链式反应细胞培养种属鉴定
