山东省科技攻关计划(2009GG20002055)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：刘秀香罗瑶赵国英张海鸿郭金将更多>>
- 相关机构：滨州医学院附属医院北京军区总医院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高迁移率族蛋白B1和α平滑肌肌动蛋白在支气管肺发育不良中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的检测高迁移率族群蛋白B1(HMGB1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在中浓度高氧(60%O2)暴露新生小鼠肺组织损伤模型肺中的表达水平,探讨HMGB1在支气管肺发育不良(BPD)发病机制中的作用。方法新生足月C57BL/6小鼠随机分为氧处理组和空白对照组,制备中浓度高氧致新生鼠BPD模型,应用HE染色、放射性肺泡计数、免疫荧光和实时荧光定量-PCR技术观察生后第3、7、14天肺组织病理改变,HMGB1和α-SMA的蛋白及mRNA表达水平。结果氧处理组随时间推移,出现肺泡上皮肿胀,肺泡壁增厚,间质水肿,炎症细胞浸润,胶原样物质产生,较空白对照组明显发育迟滞。氧处理组HMGB1蛋白和mRNA在第7、14天时表达均强于相应空白对照组(P<0.05)。氧处理组α-SMA蛋白和mRNA在第3、7、14天表达均强于相应空白对照组(P<0.05)。HMGB1与α-SMA表达呈线性关系(P<0.05)。结论在600 ml/L氧暴露所致BPD中,HMGB1和α-SMA表达增加。BPD的病理过程可能与HMGB1表达增加及α-SMA活化有关。
- 赵国英冯洁罗瑶
- 关键词：支气管肺发育不良高氧症高迁移率族蛋白质类肌动蛋白类
- 肺泡Ⅱ型上皮细胞的生长状况及其转分化的鉴定被引量：5
- 2011年
- 目的观察肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)体外培养的生长状况及转分化过程。方法通过差速贴壁法对原代培养的AECⅡ进行分离、纯化,并将AECⅡ随机分为第0天、第2天、第4天、第6天、第8天8个时间点。利用倒置显微镜观察细胞生长情况,记录细胞数目,绘制生长曲线;锥虫蓝染色观察细胞活力;流式细胞仪观察细胞生长周期和细胞凋亡情况;电子显微镜观察细胞超微结构;采用免疫荧光技术,共聚焦显微镜观察肺表面活性蛋白(SP-C)、水通道蛋白5(AQP5)的阳性表达。结果倒置显微镜下第0天、第2天、第4天、第6天及第8天细胞数分别为(4.02±0.99)×108L-1、(10.41±0.24)×108L-1、(27.90±1.91)×108L-1、(27.12±0.85)×108L-1及(26.29±1.59)×108L-1,第2天与第0天、第4天与第2天细胞数比较差异均有统计学意义(Pa<0.05)。第2天、第4天、第6天及第8天的细胞活力分别为(97.00±0.71)%、(97.20±0.84)%、(95.00±0.71)%及(92.80±1.30)%,第6天与第4天、第8天与第6天比较差异有统计学意义(Pa<0.05)。细胞周期:空气组细胞G1期、S期细胞所占比率分别在第6天、第4天最高,但各时间点与前一时间点比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。细胞凋亡:空气组Annexin-V+/PI-亚群在第4天所占比例最高,与第2天及第6天比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);Annexin-V+/PI+亚群细胞所占比例在第8天时最高,但与第6天比较差异无统计学意义(P>0.05),而第6天与第4天比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞超微结构:第6天时可见介于AECⅡ和AECⅠ之间的中间状态细胞,此类细胞在细胞表面有微绒毛,但胞质内无板层小体或胞质内有板层小体但细胞表面无微绒毛。免疫荧光:第6天可见部分细胞胞质内有呈绿色荧光的SP-C阳性表达,荧光强度较第2天、第4天减弱,伴有胞膜点状分布的呈红色荧光的AQP5阳性表达,细胞表达强度不等,表达AQP5相对较弱的细胞表达SP-C的强度相对增强
- 刘秀香张海鸿万彬罗瑶封志纯
- 关键词：转分化
- 高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（type11alveolarepithelialcells，AECⅡ）的活力、生长情况、增殖和凋亡的影响。方法取孕19d的胎鼠肺组织，利用差速贴壁法进行AECⅡ的原代培养及纯化，将AECⅡ随机分为高氧组及空气组。空气组细胞置于5％CO2孵育箱中培养，高氧组细胞置于5％CO2＋95％O2的混合气体孵育箱中培养。在培养的2、4、6、8d分别观察细胞的生长情况，检测细胞活力、细胞周期、细胞凋亡情况。时间点与培养组间的交互作用采用析因设计的方差分析。2组资料比较采用独立样本t检验，多组资料比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Bonferroni方法。结果（1）细胞生长状况：高氧组培养2、4、6和8d时细胞数随培养时间延长逐渐减少，分别为（7．29±0．43）×10^5/ml、（2．68±0．37）×10^5／ml、（0．23±0．10）×10^5／ml和（0．00±0．00）×10^5／ml，低于相应时间点空气组[分别为（10．41±0．24）×10^5／ml、（27．90±1．91）×10^5／ml、（27．12±0．85）×10^5／ml和（26．29±1．59）×10^5／ml]，差异均有统计学意义（t分别为10．992、38．912、94．166和49．696，P均=0．000）。（2）细胞活力：高氧组在2、4、6d时细胞活力逐渐下降，活细胞率分别为（79．00±0．71）％、（52．80±1．14）％和（31．60±1．52）％，均低于相应时间点空气组，分别为（97．00±0．71）％、（97．20±0．84）％和（95．00±0．71）％，差异均有统计学意义（t分别为31．213、70．519和8乱722，P均-0．000）。（3）细胞周期变化：高氧组G1期和s期细胞百分率在4和6d时与2d时比较均有升高，且高于空气组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）细胞凋亡变化：高氧组Annexin—V＋／PI亚群在4d时所占比例最高，为（23．89±0．52）％，高于2d和6d时[（21．32±0．43）％和（1．47±0．61）％]；Annexin—V�
- 刘秀香张海鸿王克煊田春梅封志纯
- 关键词：高氧症肺泡上皮细胞细胞凋亡
- 谷酰胺对高体积分数氧肺损伤新生大鼠的保护作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨谷酰胺对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的保护作用。方法将足月2日龄新生SD大鼠24只随机均分为空气组、谷酰胺组和高氧组,每组8只。空气组新生大鼠不做处理,谷酰胺组新生大鼠实验前腹腔注射0.75 g·kg-1·d-1谷酰胺溶液,高氧组新生大鼠腹腔注射等容量9 g·L-1盐水,连续3 d;高氧组与谷酰胺组新生大鼠置于氧体积分数大于900 mL·L-1模型箱内,空气组新生大鼠置于同一室内常压空气中。分别于实验开始3 d、6 d比较各组新生大鼠体质量,于实验开始6 d无菌条件下处死新生大鼠,取肺组织,24 h后制成石蜡标本,观察病理改变及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果 1.高氧组6 d存活率明显低于空气组(P<0.05);谷酰胺组6 d存活率与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高氧下暴露3 d,3组体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);高氧暴露6 d,高氧组体质量明显低于空气组(P<0.01),谷酰胺组体质量与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.高氧组肺水肿程度最严重,其肺湿质量/干质量值明显高于空气组(P<0.05);谷酰胺组肺湿质量/干质量值与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.高氧暴露6 d,高氧组肺泡内有出血和大量渗出的炎性细胞、大量粉染的蛋白性液体,肺泡壁严重充血水肿;谷酰胺组肺泡内极少量红细胞渗出,肺泡腔内见粉染的水肿液,肺泡壁增厚。4.高氧暴露6 d,高氧组、谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量均较空气组显著增加(Pa<0.01),谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量较高氧组显著增加(P<0.01)。结论预防性使用谷酰胺可明显改善高氧肺损伤新生大鼠的生存率,有利于新生大鼠的生长发育;预防性使用谷酰胺能增加高氧肺损伤新生大鼠肺组织HSP70的表达,表明谷酰胺对高氧肺损伤的保护作用与HSP70表达相关。
- 张海鸿刘秀香赵国英王宝宏郭金将罗瑶
- 关键词：热休克蛋白70
- 谷酰胺对新生大鼠急性高氧肺损伤的保护机制被引量：3
- 2012年
- 目的探讨谷酰胺对新生大鼠急性高氧肺损伤的保护机制。方法将新生SD大鼠随机分成对照组、谷酰胺组和高氧组,比较三组大鼠存活率和体质量、肺湿质量/干质量、病理改变、热休克蛋白-70(HSP-70)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况。结果高氧暴露6 d后:①高氧组体质量明显低于对照组(P<0.05),谷酰胺组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。②高氧组肺湿质量/干质量明显低于对照组(P<0.05),谷酰胺组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。③三组中高氧组肺泡炎性病理改变最为严重。④高氧组肺组织HSP-70表达量较对照组明显增加(P<0.05),谷酰胺组较对照组、高氧组均显著增加(P均<0.01);高氧组肺组织TNF-α表达量较对照组与谷酰胺组均明显增加(P均<0.01),谷酰胺组较高氧组明显减少(P<0.05)。结论谷酰胺可能通过调节炎症反应与抗炎反应之间的平衡对高氧肺损伤起到保护作用。
- 张海鸿刘秀香赵国英王宝宏罗瑶
- 关键词：高氧肺损伤谷氨酰胺热休克蛋白质70肿瘤坏死因子
- 谷氨酰胺对高氧肺损伤的干预效果观察被引量：6
- 2011年
- 目的观察谷氨酰胺对高氧肺损伤的干预效果,探讨防治高氧肺损伤的有效措施。方法建立大鼠肺损伤模型,比较高氧组与空气组及不同剂量谷氨酰胺组大鼠肺组织病理形态学的变化以及血浆8-异前列腺素F2 a水平。结果高氧组肺泡细胞形态破坏明显,细胞内结构肿胀,大剂量谷氨酰胺组细胞形态破坏程度较高氧组明显减轻。高氧组各时间点血浆8-异前列腺素F2 a水平均显著高于空气组(P均<0.05);高氧组血浆8-异前列腺素F2 a水平在3、7、14 d均高于大剂量谷氨酰胺组(P均<0.05),与小剂量谷氨酰胺组相近(P>0.05)。结论氧化应激与高氧肺损伤密切相关,大剂量谷氨酰胺对高氧肺损伤的氧化应激作用具有明显的干预作用。
- 刘秀香郭金将赵国英罗瑶
- 关键词：谷氨酰胺高氧肺损伤氧化应激8-异前列腺素F2A
