云南省教育厅科学研究基金(09Y0153)
- 作品数：9 被引量：21H指数：4
- 相关作者：邓兴力杨智勇刘如恩冯忠堂王应莉更多>>
- 相关机构：昆明医学院第一附属医院中日友好医院云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 帕金森病大鼠模型的建立被引量：4
- 2012年
- 目的应用6-羟多巴胺建立帕金森病大鼠模型并对其进行行为学评估。方法采用立体定向技术,将6-羟多巴胺注入大鼠前脑内侧束和腹侧被盖区,观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转行为的变化。结果 50只大鼠中有39只(78%)经阿朴吗啡诱导后恒定向健侧旋转(旋转速度>7 r/min),帕金森大鼠模型复制成功。结论成功建立帕金森病大鼠模型,为进一步开展细胞移植治疗帕金森病的实验研究奠定基础。
- 邓兴力雷德强刘如恩杨智勇冯忠堂
- 关键词：帕金森病动物模型6-羟多巴胺
- 超顺磁氧化铁和EGFP双标NGF基因修饰中脑神经干细胞的建立被引量：1
- 2010年
- 目的:建立超顺磁氧化铁(SPIO)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双标神经生长因子(NGF)基因修饰中脑神经干细胞。方法:以质粒pcDNA3-hNGF、pEGFPN1共转染第三代大鼠胚胎中脑神经干细胞并用SPIO标记。荧光显微镜检测EGFP的表达;免疫细胞化学、Western Blot鉴定NGF的表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记。结果:EGFP在基因转染12h后开始表达;免疫细胞化学、Western Blot表明细胞能正确表达NGF;普鲁士蓝染色显示细胞标记率达100%,透射电镜显示SPIO颗粒位于吞饮小泡和胞浆内。结论:建立了SPIO、EG-FP双标记NGF基因修饰中脑神经干细胞,为进一步开展细胞移植治疗帕金森病的研究奠定基础。
- 邓兴力龙江蔡山任仲坤刘如恩杨智勇
- 关键词：超顺磁氧化铁增强型绿色荧光蛋白神经生长因子中脑神经干细胞
- EGFP基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞的建立被引量：1
- 2010年
- 目的建立增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以质粒pEGFPN1转染培养第三代的大鼠胚胎中脑神经干细胞(mNSCs),经G418筛选后,分别进行nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定。结果 EGFP在基因转染12 h后开始表达,24 h后明显增加,48 h达到高峰,经G418筛选1月后有阳性克隆形成,EGFP基因修饰不影响大鼠胚胎mNSCs的增殖与分化。结论成功建立EGFP基因修饰大鼠胚胎mNSCs,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。
- 邓兴力杨智勇宋晓斌蔡山李智高王永刚刘如恩冯忠堂
- 关键词：中脑神经干细胞基因转染
- 胚胎多巴胺神经元移植治疗帕金森病的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的探讨胚胎多巴胺神经元移植对帕金森病大鼠的治疗作用。方法立体定向注射6-羟多巴胺建立帕金森病大鼠模型,随机分为对照组(n=12)和细胞移植组(n=12)。细胞移植组将荧光染料CM-DiI标记的大鼠胚胎多巴胺神经元立体定向注入帕金森病大鼠纹状体区,对照组于相同部位注入生理盐水。用阿扑吗啡诱导帕金森病大鼠旋转行为评估细胞移植的治疗作用。细胞移植8周后取大脑标本行冷冻切片,荧光显微镜下观察移植细胞在脑内存活情况。结果与对照组比较,移植多巴胺神经元能显著改善阿扑吗啡诱导帕金森病大鼠的异常旋转行为(P<0.01)。移植8周后,仅少量多巴胺神经元存活。结论多巴胺神经元移植可短期内改善帕金森病大鼠的运动障碍,但长期疗效不佳,可能与移植多巴胺神经元长期存活率较低有关。
- 邓兴力杨智勇王进昆王应莉雷德强王永刚刘如恩冯忠堂
- 关键词：帕金森病多巴胺神经元细胞移植胚胎
- SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞的研究被引量：1
- 2010年
- 目的建立超顺磁氧化铁(SPIO)、绿色荧光蛋白(GFP)双标脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰中脑神经干细胞。方法以质粒pcDNA3-BDNF、pEGFPN1共转染第3代大鼠胚胎中脑神经干细胞,并用SPIO标记。荧光显微镜检测GFP的表达;免疫细胞化学、Westernblot鉴定BDNF的表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记。结果 GFP在基因转染12h后开始表达,24h明显增加,48h达顶峰。免疫细胞化学、Westernblot表明:细胞成功表达BDNF。普鲁士蓝染色显示:SPIO标记的中脑神经干细胞内有大量蓝染铁颗粒,细胞标记率达100%。透射电镜显示:SPIO颗粒位于吞饮小泡和细胞质内。结论成功建立SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。
- 杨智勇宋晓斌邓兴力王进昆李智高刘如恩冯忠堂
- 关键词：神经干细胞超顺磁性氧化铁绿色荧光蛋白
- 帕金森病基因治疗研究进展被引量：1
- 2013年
- 帕金森病（PD）是中老年人常见的神经退行性疾病，目前临床主要治疗手段仍为口服左旋多巴（L—Dopa）。L—Dopa通过提高纹状体局部多巴胺水平而改善PD的症状，然而L—Dopa不能逆转PD的病理进程，对晚期PD疗效不明显，长期服用还可导致各种不良反应。实验研究表明，移植胚胎脑组织可显著改善PD动物模型症状，但其面临的伦理学问题使得该方法不能应用于临床。
- 王应莉邓兴力
- 关键词：帕金森病基因疗法
- 大鼠胚胎中脑多巴胺神经元的分离培养与鉴定
- 2011年
- 背景:神经细胞移植治疗是最有希望治愈帕金森病的方法之一。目的:探讨大鼠胚胎中脑多巴胺神经元分离、培养与鉴定的方法。方法:解剖分离E14dSD大鼠胚胎中脑组织,制备单细胞悬液,以神经细胞培养液培养,观察其生长情况并进行RT-PCR和免疫组织化学鉴定。结果与结论:在神经细胞培养液中,细胞生长良好。RT-PCR和免疫组织化学结果显示大多数细胞表达多巴胺神经元特异性分子标志。证实实验成功建立了大鼠胚胎中脑多巴胺神经元分离培养与鉴定的方法。
- 魏小兵邓兴力王应莉杨智勇李智高刘如恩李玉
- 关键词：多巴胺神经元中脑细胞培养
- SPIO、EGFP双标GDNF基因修饰中脑神经干细胞移植治疗帕金森病被引量：8
- 2010年
- 目的探讨超顺磁氧化铁(SPIO)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双标胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰中脑神经干细胞(mNSCs)移植对帕金森病(PD)大鼠的治疗作用。方法将PD大鼠随机分为对照组、GFP基因修饰mNSCs移植组和GDNF基因修饰mNSCs移植组,将相应细胞移植到PD大鼠纹状体。阿朴吗啡(APO)诱导PD大鼠旋转行为评估细胞移植的治疗作用。磁共振成像、免疫荧光组织化学研究移植细胞的存活、迁移和分化。结果GDNF基因修饰mNSCs移植能显著改善APO诱导PD大鼠的异常旋转行为;大多数移植细胞停留于移植原位,移植8w后,GDNF基因修饰mNSCs移植组有更多的细胞存活并分化为多巴胺神经元。结论MR I成像可对体内移植的SPIO标记细胞进行活体示踪。GDNF基因修饰胚胎mNSCs移植可显著改善PD大鼠的运动障碍,其分子机制有待进一步研究。
- 邓兴力王应莉杨智勇李向新龙江雷德强刘如恩冯忠堂
- 关键词：超顺磁氧化铁增强型绿色荧光蛋白胶质细胞源性神经营养因子中脑神经干细胞帕金森病
- 超顺磁氧化铁、增强型绿色荧光蛋白双标中脑神经干细胞移植治疗帕金森病被引量：4
- 2010年
- 目的 观察超顺磁氧化铁（SPIO）、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）双标中脑神经干细胞（mNSCs）移植对帕金森病（PD）大鼠的治疗作用.方法 6-羟多巴胺立体定向注射建立PD大鼠模型,随机分为对照组（n=12）和细胞移植组（n=12）.将SPIO、EGFP双标mNSCs移植到PD大鼠纹状体区.阿朴吗啡（APO）诱导PD大鼠旋转行为评估细胞移植的治疗作用.磁共振成像动态观察移植细胞的存活和迁移,免疫荧光组织化学研究移植细胞的存活、迁移和分化.结果 与对照组比较,SPIO、EGFP双标mNSCs移植能显著改善APO诱导PD大鼠的异常旋转行为（P＜0.01）;大多数移植细胞停留于移植原位,仅少数细胞向周围脑组织迁移;移植8周后,大多数mNSCs保持其未分化状态（37±6）%或分化为神经胶质细胞（36±4）%,仅少数细胞分化为DA神经元（6±2）%.结论 通过MRI成像可对体内移植的SPIO标记细胞进行活体示踪.SPIO、EGFP双标mNSCs移植可显著改善PD大鼠的运动障碍.
- 邓兴力王应莉杨智勇宋晓斌雷德强任仲坤刘如恩冯忠堂
- 关键词：超顺磁氧化铁中脑神经干细胞帕金森病
