云南省自然科学基金(2010ZC268)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 7种植物花瓣ACO基因的克隆与分析被引量：1
- 2013年
- 为获得通用的适用于植物花瓣ACO基因克隆与检测的引物,根据Genbank中收录的双子叶木本植物的ACO基因序列,设计1对简并引物,并用其对随机选择的7种植物(紫罗兰、多头菊、冬樱、迎春、云南杜鹃、垂丝海棠、山茶)的花瓣的RNA进行PCR扩增。结果发现:从7种植物花瓣中都能扩增出约800 bp的特异片段,登录Genbank发现均未被注册,将序列提交Genbank数据库,获得7种植物花瓣ACO基因的登录号(JX503067、JX503068、JX503069、JX503070、KC112390、KC112392、KC112393);在NCBI上进行blast比对,发现所克隆的7个ACO基因均与其他植物的ACO基因有一定的序列相似性,其中冬樱ACO基因与千叶桃花ACO基因同源性最高,为98%,迎春ACO基因与中华猕猴桃ACO6基因的同源性最低,为88%,将7个ACO基因的片段进行多序列比较分析,发现两两之间序列平均相似性为77%。
- 吴田蓝增全
- 关键词：植物花瓣基因克隆
- 茶梅花瓣总RNA提取方法的比较和分析被引量：14
- 2013年
- 总RNA的纯度和完整性对植物分子生物学实验至关重要,为了探索更适合茶梅花瓣总RNA的提取方法,本研究分别利用CTAB多级沉淀法、改良的异硫氰酸胍法、改良的热硼酸法、Trizol法和EASY spin植物RNA提取试剂盒法等5种方法提取茶梅花瓣总RNA,并进行了对比分析。结果发现EASY spin植物RNA提取试剂盒法是最为简单、快速、高效的方法,该方法得到的RNA条带在琼脂糖凝胶上有清晰的28S、18S和5S 3条带,且超微量分光光度计测量的A_(260/280)、A_(260/230)均在允许范围内,表明该方法得到的RNA完整、质量高。CTAB多级沉淀法得到的RNA质量次之。本研究为今后有效开展茶梅分子生物学研究提供技术便利,并为其他花卉植物RNA的提取提供必要的参考。
- 吴田蓝增全
- 关键词：茶梅花瓣多糖
- 紫果西番莲种子萌发及根部诱导愈伤组织研究被引量：10
- 2013年
- 以西番莲种子为试验材料,在不同的赤霉素浸种时间及不同种子处理方式条件下,进行西番莲种子萌发试验,并利用发芽种子的根进行愈伤组织诱导。结果表明,将西番莲种子剥壳后置于MS培养基中萌发,是西番莲种子萌发的最适方式。根部愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D,诱导出的愈伤组织多为浅绿色,颗粒状,质地疏松。
- 张婷婷吴田张瑞丽蓝增全
- 关键词：西番莲种子萌发愈伤组织
- 5种植物花瓣ACS基因的克隆与分析
- 2014年
- 分析已发表的植物1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合成酶(ACS)基因序列,设计一对简并引物,在随机选择的非洲菊、月季、桂花、茶梅和山茶等5种植物花瓣cDNA中进行PCR扩增.结果表明,在5种植物花瓣中都能扩增出约800 bp的特异片段,登录GenBank发现均未被注册,因此将序列提交到GenBank并获得了序列号.在NCBI上进行Blast比对,发现所克隆的5个ACS基因均与其他植物花瓣的ACS基因有一定的序列相似性,最高达94%,最低为80%.将5个ACS基因的片段进行多序列比较分析,发现茶梅ACS基因与山茶ACS基因的序列差异最小,序列相似性达99%.本试验设计的ACS基因简并引物在植物中有一定的通用性,后续可以适当调整引物的简并度,以得到高通用性的简并引物.
- 吴田蓝增全
- 关键词：基因克隆
