黑龙江省自然科学基金(D-200526)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张一娜滕宗艳武小薇丛莹莹李静更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 硫氧还蛋白对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护的抗氧化机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨硫氧还蛋白保护病毒性心肌炎的抗氧化作用及其调节转录因子的作用。方法选用Balb/C小鼠24只,随机分为3组:对照组、硫氧还蛋白(TRX)保护组、病毒感染组。病毒感染组、TRX保护组给予腹腔注射1000TCID50柯萨奇B3病毒(CVB3)0.1 ml,TRX保护组同时给予尾静脉注射rhTRX(2 mg/kg),而病毒感染组同时给予生理盐水作对照。14 d后处死动物,光镜下观察心肌病理形态学变化;用免疫组化法检测心肌组织NF-κB的含量,同时检测血清过氧化脂质(LPO)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果光镜下可见病毒感染组小鼠出现局灶性心肌坏死和炎细胞浸润,对照组和TRX保护组心肌细胞未见异常。病毒组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量与对照组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),保护组与病毒组相比MDA含量明显下降(P<0.01);血清GSH-Px活性与对照组比较明显下降(P<0.01),而TRX保护组与病毒组比较则明显升高(P<0.01)。病毒组心肌组织中NF-κB的表达与对照组相比明显增高,而保护组心肌组织中NF-κB的表达与病毒组相比明显下降(P<0.01)。结论重组人硫氧还蛋白能够减轻心肌细胞的损伤,其机制与清除自由基、提高谷胱甘肽过氧化物酶活性以及调节转录因子的表达密切相关。
- 李英俊滕宗艳张一娜朱秀英
- 关键词：病毒性心肌炎硫氧还蛋白
- 重组人硫氧还蛋白抗柯萨奇B3m病毒损伤的研究被引量：1
- 2010年
- 目的 观察重组人硫氧还蛋白（TRX）对柯萨奇B3m病毒（CVB3m）致HeLa细胞损伤的保护作用,并检测TRX对病毒复制的抑制作用.方法 采用IOTCID50的CVB3m病毒感染HeLa细胞,给予不同剂量的TRX（2、5、10mg/L）加以保护,实验设TRX保护组、病毒感染组、TRX对照组和对照组,每组设6个复孔.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）和相差显微镜观察细胞生长情况.结果 相差显微镜下对照组HeLa细胞排列紧密、呈多角形 病毒感染组HeLa细胞排列不紧密,细胞明显变网、脱落 TRX保护组（2、5、10 mg/L）随TRX剂量增加HeLa细胞形态明显改善.MTT结果显示,TRX对照组（2、5、10 mg/L）生长抑制率（1.2%、2.9%、6.3%）与对照组（0）比较,差异无统计学意义（P均〉0.05） TRX保护组（2、5、10 mg/L）生长抑制率（32.0%、28.0%、27.0%）与病毒感染组（51.7%）比较,均有降低（P均〈0.05）.病毒复制抑制作用结果显示,TRX保护组（2、5、10 mg/L）生长抑制率（26.0%、27.0%、10.9%）与病毒感染组（60.0%）比较,均有降低（P均〈0.05） TRX各保护组之间比较,低剂量组（2、5 mg/L）与高剂量组（10 mg/L）间差异有统计学意义（P均〈0.05）.结论 重组人TRX（2、5、10mg/L）可以减轻CVB3m病毒导致的HeLa细胞损伤,对细胞无明显毒性作用,并具有抑制病毒复制的作用.
- 滕宗艳张一娜范鹰武小薇周令望王铜
- 关键词：硫氧还蛋白肠道病毒属病毒复制细胞保护
- 重组人硫氧还蛋白对小鼠病毒性心肌炎的保护作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察重组人硫氧还蛋白（TRX）对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用。方法给予Balb／c小鼠腹腔注射O．1ml 100TCID50（50％细胞感染率）的柯萨奇B3m病毒（CVB3m），建立病毒性心肌炎模型，同时给予尾静脉注射2mg／kg的重组人TRX加以保护，对照组给予等量的生理盐水，7d后处死动物，检测血清乳酸脱氢酶（LDH）活性，采用光镜观察心肌组织损伤情况。结果病毒感染组小鼠血清LDH活性[（3130．50±390．57）U／L）]明显高于对照组[（1617．86±155．42）U／L]和TRX保护组[（1959、43±540．75）U／L]，两两比较差异有统计学意义（P〈0．05）；TRX保护组与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。光镜结果显示，病毒感染组8只小鼠有5只检出心肌病变，小鼠心脏病理切片可见局灶性心肌坏死和炎细胞浸润；而TRX保护组小鼠未出现心肌损伤。结论重组人TRX可以减轻CVB3m病毒感染导致的心肌损伤，起到心肌保护作用。
- 滕宗艳武小薇张一娜李静丛莹莹
- 关键词：柯萨奇病毒感染心肌炎硫氧还蛋白细胞保护
- 重组人硫氧还蛋白及其活性检测被引量：2
- 2010年
- 目的:采用基因克隆技术及原核表达技术重组人硫氧还蛋白(TRX),并证实重组TRX具有二硫键还原酶活性。方法:从人睾丸互补DNA(cDNA)文库克隆出人的TRXcDNA,采用限制性酶切方法构建pQE-32/TRX原核表达质粒,并在大肠杆菌M15中进行稳定表达,应用TALON金属螯合树脂纯化重组人TRX蛋白。用West-ern印迹方法鉴定重组人TRX,并检测TRX的二硫键还原酶活性。结果:(1)克隆的人TRXcDNA序列与基因库(GeneBank)(X54539)序列比较,可译框架完全相同;(2)原核表达载体中含有TRXcDNA的全长序列;(3)经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,含质粒pQE-32/TRX的大肠杆菌成功表达出人的TRX;(4)活性检测证实重组TRX具有二硫键还原酶活性。结论:成功构建原核表达载体pQE-32/TRX,并重组出有活性的人TRX蛋白,可以用于保护性研究。
- 滕宗艳张一娜武小薇邹宁
- 关键词：基因硫氧还蛋白
- Tet-Off诱导的硫氧还蛋白基因重组腺病毒载体的构建被引量：1
- 2009年
- 目的克隆人硫氧还蛋白(hTRX)基因,并构建含有该目的基因的重组腺病毒载体。方法用内切酶从重组质粒pGEM-TEasy/TRX上切下全长TRX cDNA片段,与穿梭质粒pshuttle2连接,形成pshuttle2-TRX重组质粒,再双酶切pshuttle2-TRX,将带有CMV启动子的目的片段,插入Tet-Off诱导的Adeno-X病毒DNA中,用PCR、双酶切方法进行鉴定。结果对pGEM-T Easy/TRX重组质粒进行序列测定,测定结果与Gene-Bank序列J04026基本一致,其中包括TRX cDNA全长。该实验构建出含TRX的穿梭质粒pshuttle2-TRX,并成功获得Tet-Off诱导的重组腺病毒载体pAdCMV-TRX。结论TRX基因的克隆及其重组腺病毒载体pAdCMV-TRX的成功构建,为进一步研究TRX生物活性及发病与氧化损伤关系密切的疾病治疗提供新的手段,如病毒性心肌炎、动脉硬化、心肌病、糖尿病、Alzheimer's病等。
- 李艳丽滕宗艳张一娜于卫刚
- 关键词：硫氧还蛋白腺病毒基因重组
