为了研究联蛋白基因(Zyxin)功能,对Zyxin基因进行了真核表达载体的构建,并对其进行鉴定。用全基因合成的方法得到Zyxin目的基因,将目的基因与pEX-6载体分别进行酶切,然后进行连接,连接产物转化到感受态大肠杆菌。挑取克隆,经质粒DNA抽提和酶切,琼脂糖凝胶电泳和测序,对克隆片段进行鉴定。将重组质粒pEX-6-Zyxin瞬时转染293T细胞。结果显示:电泳、双酶切和测序结果与预期结果相符。转染48 h后观察到红色荧光,用实时荧光定量PCR检测转染后48 h和72 h Zyxin基因mRNA水平有较高表达。表明成功构建了鸡Zyxin真核表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础。
