深圳市科技计划项目(200703174)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- β-淀粉样肽诱导小胶质细胞培养上清致海马神经元损伤模型的建立
- 2009年
- 目的:建立β淀粉样肽(Aβ1-40)诱导激活小胶质细胞的上清致海马神经元损伤的细胞模型,并初步研究神经元损伤的机制。方法:用不同浓度的可溶性Aβ1-40诱导激活小胶质细胞,光镜下观察不同时间点的细胞形态,ELISA检测其分泌的肿瘤坏死因子α;用激活后的小胶质细胞条件培养基刺激海马神经元,光镜下观察细胞形态,Westernblot检测刺激后海马神经元内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(NT)的表达水平,ELISA检测海马神经元内胱冬蛋白酶-3(caspase-3)活性来评价神经元的损伤程度。结果:终浓度为10μmol/L的Aβ1-40与小胶质细胞孵育24h后,取上清液加到培养的海马神经元,孵育24～72h,海马神经元较对照组形态有明显变化;经Westernblot检测,神经元内iNOS、NT表达明显增加;ELISA检测神经元内caspase-3活性明显增高。结论:小胶质细胞被Aβ1-40激活后,其释放物有明显的致神经元损伤效应,表明建立了神经元损伤模型。
- 谢春英胡冬邓春艳孙顺昌刘香萍孙世惠
- 关键词：Β淀粉样肽小胶质细胞海马神经元
- β-淀粉样肽激活小胶质细胞分泌TNFα的研究
- 2010年
- 目的研究β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞分泌TNFα的合适方案。方法分离纯化小胶质细胞,再以不同浓度可溶性β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞,应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞生存率,光学显微镜下观察不同时间点的细胞形态,同时以酶联免疫吸附法检测不同时间点小胶质细胞分泌TNFα的含量。结果细胞生存率试验结果显示β-淀粉样肽对小胶质细胞无明显的毒性作用。在浓度分别为0.1、1.0、10、50、100μmol/L时,β-淀粉样肽均可诱导激活小胶质细胞分泌TNFα,TNFα分泌量随β-淀粉样肽的浓度增加而升高,但在β-淀粉样肽浓度高于10μmol/L后TNFα分泌量的增加并不显著。β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞2h后开始分泌TNFα,24h达到高峰,此后逐渐下降。结论β-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞具有浓度及时间依赖性,以10μmol/Lβ-淀粉样肽诱导激活小胶质细胞24h是合适的激活方案。
- 谢春英胡冬朱美玲孙顺昌刘香萍
- 关键词：Β淀粉样肽TNFΑ
