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湖北省卫生厅科研基金(JX6835)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：李荣春周伶丁得方更多>>
相关机构：华中科技大学同济医学院附属普爱医院更多>>
发文基金：湖北省卫生厅科研基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇质粒
  • 1篇重组慢病毒
  • 1篇重组质粒
  • 1篇下调
  • 1篇慢病毒
  • 1篇RNA干扰

机构

  • 1篇华中科技大学...

作者

  • 1篇丁得方
  • 1篇周伶
  • 1篇李荣春

传媒

  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
下调脂肪酰胺水解酶重组慢病毒载体的构建和鉴定
2014年
目的构建携带脂肪酰胺水解酶（FAAH）基因的小分子干扰RNA表达载体。方法设计合成短发卡RNA（shRNA）FAAH对应的两条互补的寡核苷酸链，mU6-MCS-Ubi-EGFP质粒经HpaI和XhoI进行双酶切与退火后的寡核苷酸连接，目的质粒转化感受态细胞，对克隆的菌落行聚合酶链反应鉴定，再对聚合酶链反应（PCR）鉴定阳性的克隆进行测序，测序正确的重组质粒转染293细胞，同源重组产生Lentivirus-FAAH-shRNA并测定病毒滴度。结果经测序证实mU6-FAAshRNA-Ubi-EGFP表达载体构建正确，并且病毒滴度为7．0×10^8TU/ml。结论实验成果构建mU6-FAAH-shRNA-Ubi-EGFP表达载体。
丁得方李荣春周伶
关键词：重组质粒RNA干扰
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