广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金
- 作品数：13 被引量：42H指数：3
- 相关作者：孙敏华胡奇林李春玲臧莹安宋帅更多>>
- 相关机构：广东省农业科学院仲恺农业工程学院佛山科学技术学院更多>>
- 发文基金：广东省农业科技重大专项资助项目国家重点实验室开放基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 中山市强化犬狂犬病免疫与非疫区建设成效被引量：1
- 2011年
- 人兽共患传染病狂犬病的防控主要是动物狂犬病的预防和控制。免疫预防动物狂犬病的目标是控制和消灭人的狂犬病,这也是WHO倡导的狂犬病预防和控制战略。2006年前,中山市曾经是狂犬病的老疫区,有过零散的发病死亡案例。自2006年后,在农业等各级领导重视下,强化狂犬病免疫防控工作,提高免疫率和有效保护水平,无狂犬病发病病例,显现出狂犬病非疫区建设成效。
- 顾万军陈发明吕宗吉黎石云邹禄生
- 关键词：狂犬病免疫非疫区
- 动物狂犬病免疫防控研究进展被引量：3
- 2011年
- 狂犬病是一种以连锁性传播途径为主的古老的疾病,是人类尚未能有效控制的疫病之一。人和动物的狂犬病发病病例中98%是由患病动物咬伤所引起。因此,人兽共患的狂犬病的防控主要是动物狂犬病的预防和控制。就狂犬病的发病、流行概况,传染源及其控制,动物狂犬病疫苗与免疫,以及建立动物狂犬病免疫防控体系等方面的内容予以概述,以期为动物狂犬病免疫防控提供参考。
- 顾万军陈发明吕宗吉黎石云邹禄生
- 关键词：狂犬病
- 重叠PCR法构建副猪嗜血杆菌外源打靶基因被引量：3
- 2011年
- 利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到Hup-kan-Hdown的量最多。将此外源打靶基因的两端引入PstI和SacI酶切位点,克隆至具有迁移作用的自杀质粒pDS132,构建了可在大肠杆菌E.coliSM10-λpir中稳定遗传的打靶载体,为下一步建立副猪嗜血杆菌的高效基因打靶系统奠定基础。
- 张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新
- 关键词：副猪嗜血杆菌重叠PCR
- 梅迪-维斯纳病毒研究进展被引量：1
- 2011年
- 梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免疫逃避机理及引起宿主的免疫反应,并对未来的防控研究工作进行展望。
- 张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新
- 关键词：病原学致病机理免疫学
- 鸭新城疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立被引量：1
- 2012年
- 为了对目前流行的鸭新城疫进行快速诊断,应用蔗糖密度梯度离心纯化后的鸭新城疫病毒免疫6周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次亚克隆后获得一株能稳定分泌鸭新城疫病毒特异性单克隆抗体的细胞株2C1。以PEG纯化后的2C1腹水为捕获抗体,辛酸-硫酸铵纯化的兔抗鸭新城疫病毒多克隆抗体为第二抗体,HRP标记的羊抗兔抗体作为酶标抗体,建立了检测鸭新城疫病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,当2C1包被量为4μg/孔,鸭新城疫病毒1∶10稀释,兔抗鸭新城疫病毒多抗作用量为0.1μg/孔,HRP标记的羊抗兔二抗1∶10 000倍稀释,每次作用时间为1h时,P/N比值最高,且阳性OD值最接近1.0。试验表明,该方法特异性好,不与IBV、ARV、GPV、DPV、DHV尿囊液及H5、H9标准阳性抗原发生反应;可以检测出0.2μg纯化病毒,比传统的HA试验的敏感性至少高64倍;批间和批内变异系数均小于10%。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法为鸭新城疫病毒的快速诊断奠定了基础。
- 孙敏华董嘉文吕殿红周秀蓉李林林胡奇林
- 关键词：单克隆抗体夹心ELISA
- 副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化被引量：2
- 2012年
- 利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免疫的健康猪血清的检测,证实了建立的间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强、反应快速准确等特点。
- 臧莹安黄彩梅李婉雁李淼宋帅李春玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌酶联免疫吸附试验
- 基因VIb亚型半番鸭源新城疫病毒基因组测序及分析
- 2012年
- 根据GenBank上发布的新城疫病毒基因组序列,设计了9对引物,对从福建福州地区发病半番鸭场分离的新城疫病毒FJ-SMD-03株进行了基因组cDNA扩增测序和分析.结果表明:FJ-SMD-03的基因组序列由15 192 nt组成,在NP基因非编码区比Lasota株多了6个核苷酸ACACTC;基因组由6个ORF组成,即3'-NP-P-M-F-HN-L-5'序列.BLAST结果显示:FJ-SMD-03基因组核苷酸与1.3、carrier-pigeon/Guangdong/2008、pigeon/Italy/1166/00、AV324/96和dove/Italy/2736/00相似性最高,达94.9%～98.5%;与疫苗株Lasota、Mukteswar和B1的相似性最低,为80.7%～83.3%;与我国标准强毒株F48E8及2002年从福建番鸭中分离到的基因VIId亚型强毒株Muscovy duck/China(Fujian)/FP1/02相似性较低,分别为82.5%和87.1%.F蛋白裂解位点的氨基酸序列为112 R-R-Q-K-R-F117,具有强毒株序列特征,进化树分析发现,FJ-SMD-03属于ClassⅡ类基因VIb亚型,证明鸭群中有VIb亚型NDV强毒株;FJ-SMD-03株NDV与1.3、carrier-pigeon/Guangdong/2008和pigeon/Italy/1166/00亲缘关系较近,与carrier-pi-geon/Guangdong/2008形成一个小的进化分支,推测FJ-SMD-03株与carrier-pigeon/Guangdong/2008和pigeon/Italy/1166/00株来源于共同的祖代毒株,可能与鸽携带的病毒有关.
- 黄秋芳孙敏华陈少莺吕殿红董嘉文尚毅吴玄光胡奇林
- 关键词：新城疫病毒基因组
- 鹅细小病毒VP3基因的克隆及表达被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank中的鹅细小病毒(GPV)全基因序列,设计并合成了1对特异性引物,利用PCR对GPV-Fos han-2009株的VP3基因进行了扩增。经酶切、连接、转化后,获得了pET32a-VP3重组表达载体。经BL21(DE3)原核表达显示,VP3蛋白为包涵体形式,37℃下该蛋白最佳I PTG诱导浓度为1.2 mM,最佳诱导时间为5 h。SDS-PAGE分析显示所表达的VP3融合蛋白的相对分子质量约80 kD。West ern Bl ot证实该蛋白能与番鸭抗GPV阳性血清反应,这为GPV血清学诊断方法的建立提供了物质基础。
- 孙敏华董嘉文李林林袁建丰邝瑞欢胡奇林
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因克隆
- 新城疫病毒分子流行病学研究进展被引量：15
- 2010年
- 新城疫在世界范围内已经引起了4次大流行,每次大流行都是由一种新基因型引起的。尽管新城疫病毒只有1个血清型,但其基因型众多。论文主要综述了新城疫病毒基因型的划分方法以及国内外不同时期新城疫的流行状况及其特点,分析了国内外流行毒株及流行趋势,目前在国内外三大家禽中主要流行基因Ⅶd亚型毒株,鸽群中主要流行基因Ⅵb亚型毒株,为我国新城疫的防控提供理论基础。此外,弱毒株在新城疫的传播中所起的作用也值得关注。
- 孙敏华胡奇林
- 关键词：新城疫病毒基因型分子流行病学
- 金黄色葡萄球菌肠毒素流式液相芯片检测方法的建立
- 将金黄色葡萄球菌肠毒素（SE）A、B、C、D、E型单克隆抗体包被在CBA功能微球上,加入待测样本及荧光检测抗体孵育,洗涤重悬后利用流式细胞仪检测荧光信号,建立了金黄色葡萄球菌肠毒素流式液相芯片检测方法。结果表明该方法优于...
- 刘文森许娜徐静许琴袁杰温肖会吴大成
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素流式细胞术
- 文献传递
