辽宁省博士科研启动基金(20101004)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：朱蓓薇吴海涛杜英孙进健程菁恒更多>>
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- 发文基金：辽宁省博士科研启动基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 海参肠碱性磷酸酶的提取及粗酶的特性研究被引量：4
- 2012年
- 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程。本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性。经含有0.2%Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70%硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32%。ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0～12.0稳定性较好;最适反应温度为45℃,在20～45℃具有很高的稳定性。金属离子Mg2+(1～30mmol/L)、Zn2+(<10mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用;Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+(10mmol/L)可明显抑制该酶活力。EDTA-Na2、DTT、Na2WO4及Na2HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2>DTT>Na2WO4>Na2HPO4。
- 程菁恒朱蓓薇吴海涛孙进健
- 关键词：海参肠
- 海参乙酰胆碱酯酶的酶学特性研究被引量：3
- 2011年
- 对海参乙酰胆碱酯酶（AChE）粗酶的酶学性质进行研究。采用含0.1%Triton X-100的PBS缓冲液（0.1 M,pH7.4）分别从海参肠和海参体壁中提取AChE,配合Ellman法测定AChE酶活力。结果表明,海参肠与体壁AChE具有相似的酶学性质,其最适反应pH值为8.0,pH在6~8时稳定;最适反应温度为35℃左右,在25~45℃内热稳定性较好。海参乙酰胆碱酯酶粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱（AcSChI）,但对碘化硫代丁酰胆碱（BuSChI）的作用较弱。当底物AcSChI浓度大于50 mM时产生明显的底物过量抑制效应。金属离子Sn2＋、Zn2＋、Hg2＋、Ag＋、Cr6＋、Cu2＋及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁乙酰胆碱酯酶有不同程度的抑制作用。
- 杜英朱蓓薇吴海涛柴晓倩
- 关键词：海参乙酰胆碱酯酶酶学性质
- 海参肠乙酰胆碱酯酶亲和层析洗脱条件的优化被引量：2
- 2012年
- 以3-羧基苯基-乙基二甲基铵为配基,与溴化氰活化琼脂糖凝胶交联制备亲和层析柱,分离海参肠中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE),对其洗脱条件进行优化。结果显示:其适宜平衡体系为含0.3mol/L NaCl的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液,适宜洗脱体系为含0.2mol/L四乙基碘化铵的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液。此条件下,海参肠AChE可得到较好的吸附和分离,初步纯化后的AChE经Native-PAGE电泳分离出3条具有酶活性的条带,说明AChE在海参肠内可能以多种形式存在,呈现多态性。
- 杜英朱蓓薇吴海涛
- 关键词：海参乙酰胆碱酯酶
