国家自然科学基金(30571509)
- 作品数：8 被引量：36H指数：5
- 相关作者：王玉成刘桂丰杨传平班巧英张大伟更多>>
- 相关机构：东北林业大学中国人民解放军防化指挥工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 二色补血草海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及分析被引量：2
- 2008年
- 以二色补血草叶片组织为材料构建了cDNA文库,文库的初始滴度为2.0×106pfu,重组率为95%,平均插入片段为0.8 kb,扩增后文库的滴度为4.0×109pfu.mL-1。通过随机测序从文库中获得的海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)基因的全长cDNA序列,该序列长1 986 bp,其中5’非翻译区163 bp,3’非翻译区680 bp,开放读码框长1 143 bp,编码380个氨基酸,蛋白分子质量为42KD,理论等电点为6.68。海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶在海藻糖合成过程中起关键作用,该基因的克隆为研究海藻糖在二色补血草中的合成奠定了基础。
- 马辉刘桂丰徐晨曦王玉成杨传平
- 关键词：二色补血草CDNA文库
- cDNA微阵列技术研究干旱胁迫下星星草基因的表达被引量：5
- 2007年
- 运用cDNA微阵列技术研究干旱胁迫下星星草基因的表达。制备了载有660条星星草单一基因的cDNA微阵列。分别对干旱胁迫和对照星星草的mRNA进行荧光标记,并与载有星星草基因的cDNA微阵列进行杂交,通过芯片的杂交信号强度分析,共获得22个下调表达和17个上调表达的基因。BLASTX分析表明这些基因按功能可以分为脱水保护、信号转导与调控、活性氧清除、代谢、核糖体蛋白等几大类。发现了一些与干旱胁迫相关的功能未知基因和新基因。
- 梁也男王玉成刘桂丰褚延广
- 关键词：DNA微阵列星星草干旱胁迫基因表达
- 二色补血草凝集素(Lectin)序列分析及表达被引量：2
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出一个凝集素(Lectin)基因全长cDNA序列。该基因全长977bp。其中:5′非翻译区(UTR)103bp,3′非翻译区(UTR)208bp,开放阅读框(ORF)全长663bp,编码由221个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白的相对分子质量为25kD,理论等电点为8.82。利用实时定量RT-PCT方法进一步研究了二色补血草在植物病原菌(尖孢镰刀菌)侵染条件下不同时间点该基因的表达情况。结果表明,在尖孢镰刀菌胁迫处理的条件下,能诱导Lectin基因在二色补血草的根、叶中表达,说明该基因与植物抗病相关。
- 齐晓天王玉成杨传平曾丽萍
- 关键词：二色补血草凝集素RT-PCR
- 二色补血草OEE2基因的克隆和表达被引量：2
- 2009年
- 从二色补血草中分离出一条含有完整开放读码框(ORF)序列的OEE2基因。该基因全长994bp,其中5'非翻译区27bp,3'非翻译区160bp,ORF全长807bp,共编码264个氨基酸,编码蛋白的分子量为28.2kDa,理论上的等电点为7.66。BlastP分析表明,二色补血草OEE2与马铃薯OEE2序列同源性最高,与喇叭水仙OEE2序列同源性最低,从9个物种的氨基酸多序列比对中可以看出,OEE2的氨基酸序列保守性较高。实时定量RT-PCR方法检测该基因对低温、NaCl和聚乙二醇(PEG)胁迫的基因表达模式的结果表明,PEG和低温能诱导OEE2基因在二色补血草叶中表达,这两种处理的OEE2基因表达量于胁迫48h后都达到高峰,而在NaCl胁迫下OEE2在二色补血草根和叶中表达都受抑制。
- 张大伟王玉成杨传平
- 关键词：二色补血草基因表达
- 二色补血草硫氧还蛋白(Trx)的克隆和表达分析被引量：6
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出1个硫氧还蛋白基因全长cDNA序列。基因全长1138 bp,其中,5′非翻译(UTR)区128 bp,3′非翻译区212 bp,开放阅读框(ORF)全长798 bp,编码265个氨基酸,编码蛋白的分子量为28.58 kDa,理论等电点(pI)为9.68。BlastP分析表明二色补血草Trx与拟南芥Trx序列同源性为52%,与葡萄Trx序列同源性为76%,从11个物种的氨基酸多序列比对可以看出Trx氨基酸序列保守性较高。实时定量RT-PCR方法检测低温、NaCl和PEG胁迫不同时间后的基因在二色补血草中表达模式的结果表明,NaCl能诱导Trx基因在二色补血草叶中表达,胁迫24 h后达到高峰,而聚乙二醇和低温处理则抑制Trx在二色补血草根和叶的表达.
- 张大伟杨传平王玉成班巧英马辉
- 关键词：二色补血草硫氧还蛋白基因克隆实时荧光定量PCR
- 紫杆柽柳MnSOD基因在非生物胁迫中的作用被引量：8
- 2008年
- 构建了酵母表达载体pYES2-MnSOD,并将其转入酿酒酵母INVSc1,以转空载体pYES2的酵母INVSc1为对照,检测其抗NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3和紫外线胁迫能力。结果表明,转MnSOD基因酵母在以上逆境因素胁迫下的存活率有明显提高,说明MnSOD基因具有较强的抗NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3和紫外线胁迫能力。
- 班巧英刘桂丰姜静常万霞王玉成
- 关键词：酿酒酵母非生物胁迫
- 一个新的二色补血草金属硫蛋白基因LbMT2的克隆及其表达分析被引量：8
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出一个新的金属硫蛋白基因LbMT2全长cDNA序列。该基因全长518bp,其中5′非翻译区(UTR)64bp,3′非翻译区205bp,开放阅读框(ORF)249bp,编码由82个氨基酸组成的蛋白质,编码蛋白的分子量为8.1kDa,理论等电点(pI)为4.72。利用实时定量PCR方法研究了二色补血草在CuSO4、CdCl2、NaCl、低温和PEG胁迫下不同时间该基因的表达模式。结果表明,CuSO4、CdCl2、NaCl和低温处理均能诱导LbMT2基因在二色补血草的根和叶中的表达,而PEG处理则抑制了LbMT2在根和叶中的表达。构建LbMT2基因的原核表达载体pGEX-LbMT2,通过IPTG诱导在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中融合表达,SDS-PAGE电泳获得35kDa的蛋白条带,大小与预期相符。
- 班巧英刘桂丰王玉成张大伟蒋丽丽
- 关键词：金属硫蛋白实时定量PCR原核表达
- 重组大肠杆菌BL21(pET28a-eIF5A)的抗逆性分析被引量：6
- 2006年
- 目的:分析重组大肠杆菌BL21(pET28a-eIF5A)的抗逆性。方法:将来源于柽柳的eIF5A基因构建到原核表达载体pET28a中,在原核表达的基础上,利用分光光度计检测重组大肠杆菌BL21(pET28a-eIF5A)的抗逆性。结果:BL21(pET28a-eIF5A)的抗盐碱性明显高于对照菌株BL21(pET28a),其中重组大肠杆菌BL21(pET28a-eIF5A)的抗NaCl的临界浓度为0.8mol/L,抗NaHCO3的临界浓度为0.52mol/L,不具有抗AgNO3和抗旱性。结论:重组大肠杆菌BL21(pET28a-eIF5A)具有良好的抗NaCl和NaHCO3特性,该抗性的证明为eIF5A基因在植物抗逆基因工程中的应用提供了资料。
- 李晓泽姜静李德斌田梗王玉成
- 关键词：大肠杆菌抗逆性
