中国综合性艾滋病研究项目(U19AI051915)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：刘强杨贵波魏强秦川李悦更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心中国医学科学院北京协和医学院南开大学更多>>
- 发文基金：中国综合性艾滋病研究项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SHIV-XJ02170在中国恒河猴体内传代过程中env基因变异研究
- 2010年
- 目的 研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴体内传代过程中env基因序列变异的特点.方法 应用聚合酶链反应（PCR）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别对各代动物SHIV-XJ02170病毒载量峰值时间点全血前病毒DNA gp160基因和血浆病毒RNA gp120基因进行扩增.GP160基因PCR产物直接进行测序分析,gp120 RNA扩增产物连接T载体后每份样品挑选18个克隆测序,分析传代过程中病毒的基因距离（divergence,diversity）的变化规律及病毒基因进化的特点.结果 SHIV-XJ02170在传代过程中基因连续进化并且进化的方向和病毒传代的顺序完全一致,基因距离总体上表现为逐步扩大的趋势,病毒传代早期存在明显的＂瓶颈效应＂.氨基酸序列分析发现V3环顶端四肽和辅助受体在传代过程中未发生改变.结论 SHIV-XJ02170经过中国恒河猴体内传代后基因距离出现明显扩大过程,且按照传代的顺序发生连续的基因进化.这从分子水平上部分解释了 SHIV-XJ02170经猴体传代出现毒力增强的原因.
- 刘强李悦杨贵波魏强秦川邵一鸣
- 关键词：SHIV传代ENV
- SHIV及其在AIDS疫苗和药物研究中的应用被引量：1
- 2006年
- 刘强杨贵波邵一鸣
- 既往有偿供血感染艾滋病者合并弓形虫感染状况研究被引量：8
- 2008年
- 目的了解安徽省既往有偿供血艾滋病病毒(HIV)感染者合并弓形虫感染状况,及其对艾滋病疾病进展的影响。方法以招募的安徽省既往有偿供血员HIV阳性感染者为研究对象,采集外周血,分离血浆,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测弓形虫抗体。同时检测CD4T细胞和血浆病毒载量的水平。结果在招募的367例中,合并弓形虫感染者11例,感染率为3.0%,主要存在于CD4+T细胞数量低于200/mm3的感染者中。合并弓形虫感染者的CD4+T细胞数低于HIV单一感染者,而病毒载量则呈相反趋势。结论对晚期HIV感染者的管理,在监测CD4+T细胞的同时,应加强监测弓形虫的混合感染,以把握预防用药的合理时机,降低混合感染造成的死亡。
- 马燕徐臣邬超陈家旭周晓农汪宁丁心平苏斌王建军徐建青阮玉华张晓燕邵一鸣
- 关键词：艾滋病弓形虫
- C亚型SHIV-XJ02170在中国恒河猴体内传代研究
- 2010年
- 目的 了解SHIV-XJ02170病毒在中国恒河猴体内传代过程中病毒学和免疫学变化特点,构建适用于我国艾滋病疫苗评价的C亚型SHIV/中国恒河猴模型.方法 将SHIV-XJ02170感染性全长质粒转染293T细胞制备病毒,后肢静脉途径在中国恒河猴体内传3～4代.传代过程中采用流式细胞术检测外周血CD4/CD8比值,分析病毒致病能力的变化.实时荧光定量RT-PCR方法 检测SHIV病毒载量,了解病毒学变化特点.同时,利用ELISA和ELISPOT方法 分析病毒传代过程中体液和细胞免疫学变化特点.结果 SHIV-XJ02170病毒传代过程中,CD4/CD8比值未表现出剧烈的下降特点.线路3传代中急性期血浆病毒载量峰值和Setpoint值表现出连续上升的趋势.病毒感染恒河猴后可诱导较强的体液和细胞免疫应答.同时,病毒载量和交叉抗体滴度之间表现出显著的正相关关系.结论 SHIV-XJ02170病毒在中国恒河猴传代后未出现致病性突变株,但是表现出毒力上升的趋势.SHIV-XJ02170/中国恒河猴模型将在我国艾滋病疫苗有效性评价中发挥重要作用.
- 刘强李悦杨贵波魏强秦川邵一鸣
- 关键词：SHIV传代恒河猴
- 运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析被引量：2
- 2006年
- 目的 建立一种实时、灵敏、特异的针对人／猴免疫缺陷病毒（SHIV）的RNA载量检测方法，通过与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行比较，成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法。方法 体外转录制备RNA标准品，利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）试剂盒的反应体系和针对SHIVgag保守区91个碱基的Taq—Man探针与引物，建立一步法实时荧光定量RT—PCR。三种SHIV感染性分子克隆体外转染293T细胞，在不同的时间点采样，通过实时荧光定量RT—PCR和ELISA两种方法监测SHIV病毒复制过程。结果两种方法监测的病毒复制过程基本一致，转染后2～48小时病毒复制出现明显的对数生长期，之后进入平台期，p24浓度大约100pg／ml，而RNA载量大约在100拷贝／ml。两者具有很好的相关性（r^2=0．834；P〈0．001）。实时荧光定量RT＋PCR灵敏度更高，检测范围更广，费用更低。结论 所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光定量RT—PCR方法，可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法。
- 刘强杨贵波褚亚芬段丹丽彭虹邢辉邵一鸣
