广东省科技攻关计划(2004B36001027)
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 相关作者：胡旭初徐劲余新炳陈守义谢红艳更多>>
- 相关机构：中山大学广州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划广东省自然科学基金广东省重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 华支睾吸虫CsSP16.4基因的克隆、序列分析和功能预测被引量：1
- 2006年
- 目的通过筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因;克隆并构建重组表达载体,为进一步研究其功能及其应用价值奠定基础。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过Blastn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan,NCBIConservedDomainSearch等程序对其进行结构域分析及进化树分析。结果筛选得到的序列长725bp,应用VecterNTI分析,理论分子量为16.4kDa,理论等电点(pI)为6.44,疏水氨基酸(AILFWV)占36%,带电荷氨基酸(RKHY-CDE)占29%,极性氨基酸(NCQSTY)占28.8%,酸性氨基酸(DE)占8.65%和碱性氨基酸(KR)占9.21%。应用NCBI站点的ORFFinding分析发现其含4个可能的ORF,其中最长的ORF,从第42到第494bp,起始密码为ATG、终止密码为TAG,完整阅读框含450bp,编码150aa。发现该基因有潜在的2个糖激化位点、3个N肉豆蔻酰化位点和1个蛋白激酶C磷酸化位点。结论确定该基因为华支睾吸虫分泌蛋白基因,为作为诊断候选抗原提供了依据。
- 陈守义李军涛徐劲魏泉德谢红艳胡旭初余新炳
- 关键词：华支睾吸虫分泌蛋白克隆
- 华支睾吸虫SPE16.9基因克隆和序列分析被引量：1
- 2005年
- 目的通过筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因,为进一步研究其功能及其应用奠定基础。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过Blastn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用软件程序对其进行分析。结果筛选到一个475bp的核酸序列,编码153aa,理论分子量为16.9kDa,理论等电点(pI)为6.19,疏水氨基酸(AILFW V)占36%,带电荷氨基酸(RKH YCDE)占30%,极性氨基酸(NCQSTY)占28%,酸性氨基酸(DE)和碱性氨基酸(KR)各占9%。经BLAST分析,该蛋白属于M L域(M D-2-related lipid-recognition)家族,是一个新的分泌蛋白基因。结论发现华支睾吸虫分泌蛋白基因,可能有作为诊断候选抗原的价值。
- 徐劲陈守义魏全德谢红艳胡旭初余新炳
- 关键词：华支睾吸虫分泌蛋白克隆
- 华支睾吸虫分泌蛋白基因(CsCrSP)的克隆和生物信息学分析被引量：7
- 2006年
- 目的筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因,克隆并构建重组表达载体。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过BLASTn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan,NCBIConservedDo-mainSearch等程序对其进行结构域及进化树分析。结果筛选出华支睾吸虫未知基因Pcs004f03序列,含689bp;应用VecterNTI分析,理论相对分子质量(Mr)为21000,完整的ORF含561bp,编码187aa。该基因有潜在的糖激化位点、3个N肉豆蔻酰化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、cAMP-andcGMP依赖蛋白激酶磷酸化位点。利用软件在线搜索发现在第1～50aa内有一明显的信号肽,初步推断CsCrSP为一种分泌蛋白。结论CsCrSP基因为华支睾吸虫富含半胱氨酸分泌蛋白基因。
- 陈守义李军涛徐劲魏权德谢红艳胡旭初余新炳
- 关键词：华支睾吸虫分泌蛋白克隆
- 华支睾吸虫CsSCCRO基因的表达和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的将目的基因CsSCCRO转染Hela细胞,检测转染效率和表达水平,为进一步在细胞学水平研究编码蛋白的功能提供依据。方法将目的基因CsSCCRO克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,通过脂质体方法转入Hela细胞,RT-PCR和荧光观察来鉴定转录和表达水平。结果真核重组质粒pEGFP-N1-CsSCCRO转入Hela细胞后稳定表达荧光蛋白;RT-PCR鉴定转染的Hela细胞,扩增产物约为780 bp,与预期值相符。结论CsSCCRO基因能够转染到Hela细胞中,并且能与GFP高效转录和翻译成融合蛋白。
- 赵玉利胡旭初马长玲徐劲胡凤玉余新炳
- 关键词：华支睾吸虫
