国家重点基础研究发展计划(2012CB9333004)
- 作品数：14 被引量：73H指数：5
- 相关作者：任秀宝魏枫李慧张新伟于文文更多>>
- 相关机构：天津医科大学滨州医学院附属医院天津市肿瘤防治重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 调节性T细胞和CD8~＋T细胞在恶性黑色素瘤中的表达及其与预后的关系被引量：5
- 2015年
- 目的探讨调节性T细胞(Tregs)和CD8+T细胞在黏膜恶性黑色素瘤和肢端恶性黑色素瘤局部免疫微环境中表达情况的差异,及其与患者预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法对58例恶性黑色素瘤组织进行染色,检测Foxp3+Tregs和CD8+T细胞的浸润情况,分析两者与临床病理指标及预后的相关性。结果 Foxp3与CD8+T细胞阳性表达无相关关系。黏膜恶性黑色素瘤组织中Foxp3+Tregs数量明显高于肢端恶性黑色素瘤(t=2.648,P=0.011);肿瘤直径≥3 cm、有淋巴结转移、有远处转移的恶黑患者Foxp3highTregs相对较高(P<0.05)。存在溃疡的恶性黑色素瘤患者中,CD8high组所占比例明显高于无溃疡者(33.3%vs 5.9%,P<0.05)。Foxp3high组的中位无进展生存期(PFS)是12个月,明显低于Foxp3low组(31个月);CD8high组的中位PFS是25个月,明显高于CD8low组(中位PFS 12个月);亚组分析显示Foxp3highCD8low组患者中位PFS是7个月,明显低于Foxp3highCD8high组(25个月)、Foxp3lowCD8low组(18个月)以及Foxp3lowCD8high组(59个月)。不同肿瘤位置、Foxp3+Treg数量、CD8+T细胞数量、有无远处转移的恶性黑色素瘤患者中位PFS不同。结论 Tregs的数量与恶性黑色素瘤的进展密切相关,黏膜恶性黑色素瘤预后欠佳可能与Tregs浸润有关。
- 苏月颖安秀梅赵华魏枫张新伟
- 关键词：黑色素瘤CD8阳性T淋巴细胞肿瘤逃逸预后
- FDCs-miR-548m-CDK6轴在套细胞淋巴瘤集落形成中的研究被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨FDCs-miR-548m-CDK6轴在套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)集落形成中的作用。方法:分别采用RT-qPCR和Western blot检测MCL细胞与滤泡树突状细胞(FDCs)共培养后miR-548m和CDK6的变化。以生物信息学软件预测miR-548m的靶点,Western Blot检测MCL细胞系分别转染pre-miR-548m和anti-miR-548后细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)的变化。荧光素酶报告基因实验验证CDK6是否为miR-548m的直接作用靶点。MCL细胞系与/不与FDCs共培养,过表达miR-548m或者敲低CDK6后MCL的集落形成能力。结果:FDCs与MCL的粘附作用可以下调miR-548m并上调CDK6。生物信息学软件预测显示CDK6的3'UTR是miR-548m的潜在靶点,且过表达miR-548m能够减少CDK6的表达,抑制miR-548m表达能够增加CDK6。荧光素酶报告基因实验证实CDK6的3'UTR是miR-548m的一个直接作用靶点。集落形成实验显示过表达miR-548m或者敲低CDK6后,细胞的集落形成能力明显减弱。结论:FDCs通过抑制MCL中miR-548m表达上调CDK6,增强MCL的集落形成能力。
- 王芳张新伟张翼鷟魏枫任秀宝
- 关键词：套细胞淋巴瘤滤泡树突状细胞集落形成
- STAT3磷酸化调控乳腺癌髓系来源抑制细胞介导T细胞免疫抑制的机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的:检测STAT3在乳腺癌MDSCs中的磷酸化状态及其对MDSCs免疫抑制活性的影响。方法:收集脐血单个核细胞,免疫磁珠的方法分选其中CD33+细胞,体外与乳腺癌细胞系MDA-MB-231共孵育诱导MDSC生成。Western blot方法分别检测IDO和STATs的表达与磷酸化情况。MDSCs与健康供者外周血T淋巴细胞共孵育,分别加入1-MT和JSI-124来抑制IDO功能和STAT3磷酸化,利用MTT实验和ELISA检测各组T细胞的增殖和细胞因子分泌。结果:Western blot检测发现体外诱导的MDSCs中IDO表达明显增加,同时伴STAT3磷酸化水平升高。加入JSI-124后pSTAT3和IDO表达明显降低。MTT实验中MDSCs明显抑制T细胞增殖,加用IDO特异性抑制剂1-MT或STAT3抑制剂JSI-124后T细胞增殖抑制明显改善(P<0.05),且1-MT组和JSI-124组之间差异无统计学意义。ELISA结果显示MDSCs显著抑制T细胞分泌IFN-γ,促进TGF-β、IL-10释放(P<0.05)。而加用1-MT或JSI-124后,IFN-γ分泌水平升高,而TGF-β、IL-10分泌水平降低(P<0.05),而1-MT组和JSI-124组之间差异无统计学意义。结论:MDSCs中磷酸化STAT3水平升高导致IDO过表达;STAT3的特异性抑制剂JSI-124可以逆转MDSCs对T细胞增殖和Th1类因子分泌的抑制作用。
- 王越任秀宝李慧曹水任宝柱于文文张澎齐静于津浦
- 关键词：髓系来源抑制细胞STAT3T细胞乳腺癌
- 成纤维细胞活化蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的:检测人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activationprotein,FAP)mRNA的表达,探讨FAP mRNA与NSCLC临床特征及预后之间的关系。方法:2004年6月至2006年12月选取天津医科大学附属肿瘤医院组织库中247例NSCLC患者瘤组织标本和对应的48例癌旁组织标本,患者随访至2011年12月1日。采用实时荧光PCR检测NSCLC组织和正常肺组织中FAP mRNA。临床病理参数与FAP mRNA相对表达量的相关性分析采用Mann-Whitney U检验,以Kaplan-Meier法绘制生存曲线,用log-Rank检验比较患者的生存差异,采用Cox回归模型评估独立的预后因素。结果:FAP mRNA在NSCLC组织中过表达。NSCLC组织中FAP mRNA表达水平与NSCLC患者KPS评分成正相关(P<0.05),而与肿瘤原发部位、肿块大小、淋巴结转移、临床分期、组织学类型等其他病理特征无明显关系(P>0.05)。高表达FAP mRNA的NSCLC患者与低表达者相比,中位总生存时间(overall survival,OS)无明显差异(43 vs 39个月,P>0.05)。进一步以组织学类型分层分析显示,肺腺癌患者FAP mRNA表达量与临床分期成负相关(P=0.031),与KPS评分成正相关(P=0.041)。高表达FAP mRNA的肺腺癌患者与低表达者相比,中位OS时间显著延长(42 vs 26个月,P<0.05),多因素分析进一步证实FAP mRNA表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。结论:FAP在NSCLC组织中高表达,FAP mRNA高表达与肺腺癌的临床分期呈负相关,并与肺腺癌患者的预后密切相关。
- 刘蕊刘亮李慧于津浦任秀宝
- 关键词：非小细胞肺癌预后
- GM-CSF基因修饰肿瘤细胞疫苗治疗前后黑素瘤患者CD8^+T细胞的变化及其对预后的影响
- 2015年
- 目的:探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因修饰的肿瘤细胞疫苗(GM-CSF modified tumor cell vaccine,GVAX)治疗前后黑素瘤患者外周血免疫指标的变化及其对预后的影响。方法:收集2007年10月至2012年12月期间于天津医科大学肿瘤医院接受GVAX治疗的56例黑素瘤患者,采用流式细胞技术检测患者治疗前后外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞(Treg)、自然杀伤细胞(NK)及树突状细胞(DC1和DC2)的比例,分析治疗前后外周血各免疫细胞比例的变化,并探讨其与患者预后的关系。结果:GVAX治疗后患者外周血CD8+T细胞比例较前升高[(37.56±12.76)%vs(34.71±12.30)%,P=0.006],CD4+T细胞比例降低[(53.44±13.36)%vs(56.27±13.15)%,P=0.017],CD4+/CD8+比值降低[1.61(1.37)vs 1.75(0.71),P=0.009]。治疗后CD3+T、NK、Treg、DC1、DC2与治疗前的差异无统计学意义(P>0.05)。晚期患者GVAX治疗前外周血CD8+T细胞比例大于均值组与小于均值组相比,中位生存时间显著延长(29.16 vs 13.34个月,P=0.012)。结论:GVAX治疗黑素瘤可增强CD8+T细胞为主的抗肿瘤免疫应答,晚期患者外周血CD8+T细胞比例可作为预测GVAX疗效的指标,为判断预后起到一定的提示作用。
- 马晓菲钱雅琴赵华于津浦魏枫安阳于文文李慧任秀宝
- 关键词：黑素瘤预后
- CDK6导致肿瘤的机制研究进展被引量：7
- 2015年
- 细胞周期的异常调控导致细胞过度增殖是人类肿瘤发生的重要原因之一,目前已发现CDK6和CDK4是细胞周期的重要调控因子,促进细胞周期正向进行,且在人类大多数肿瘤中过度激活,与肿瘤的发生密切相关。最近,研究证实以CDK4/6为靶点的肿瘤治疗有广泛前景。但是对于CDK6过度激活导致肿瘤发生的机制尚不完全清楚。因此有必要进一步了解CDK4/6在细胞周期调控通路、细胞分化中的作用及其在不同类型肿瘤中的异常表达,对深入了解肿瘤的发生机制及治疗有重大意义。本文拟对CDK6的结构、生物学功能、促进肿瘤的相关机制,以及其抑制剂的临床应用等方面的内容进行阐述。
- 董一楠张新伟魏枫
- 关键词：肿瘤细胞周期
- 非小细胞肺癌组织中低表达microRNA表达谱被引量：13
- 2014年
- 目的:检测非小细胞肺癌患者手术标本组织中低表达microRNA的表达谱,为进一步阐述肿瘤的发生发展机制和提供诊断或治疗的新策略提供基础,积累以国内患者为数据来源的microRNA资料。方法:利用芯片技术初步筛选在非小细胞肺癌组织中低表达microRNA,进而利用实时荧光定量PCR验证癌组织和正常肺组织表达水平的差异。结果:芯片结果发现有20种microRNA在非小细胞肺癌组织中发生明显下调。实时荧光定量PCR验证发现其中的13种microRNA表达量显著降低,分别是hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-519a、hsa-miR-223-5p、hsa-miR-1、hsa-miR-520c-3p、hsa-miR-489、hsa-miR-27a、hsa-miR-373、hsa-miR-125b、hsa-miR-27b、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-206。结论:在非小细胞肺癌组织中发现一些表达水平显著下调的mciroRNA,这些microRNA可能与肿瘤的发生发展或某些功能相关。
- 于筱舟魏枫闫帆于文文任秀宝李慧
- 关键词：MICRORNAQRT-PCR
- 非小细胞肺癌组织微卫星不稳定与T淋巴细胞浸润的关系被引量：7
- 2016年
- 目的:分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织错配修复蛋白MLH1、MSH2和MSH6的表达和T淋巴细胞浸润情况,探讨微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)与NSCLC组织T淋巴细胞浸润的关系。方法:收集天津医科大学肿瘤医院2004年至2010年NSCLC组织标本100例,应用免疫组化法检测癌组织中MLH1、MSH2和MSH6的表达,以其中1种及1种以上蛋白表达阴性者判定为MSI;同时检测T淋巴细胞浸润情况,并分析MSI与NSCLC临床病理特征的关系。结果:NSCLC组织中MSI检出率24%,少于微卫星稳定(microsatellite stability,MSS)。MSI NSCLC组织中T淋巴细胞浸润明显高于MSS者。免疫组化结果显示:MSI NSCLC组织CD3^+、CD4^+、CD8^+ T淋巴细胞浸润数目明显多于MSS NSCLC组织,两者差异有统计学意义(P<0.05)。MSI与患者的年龄有关(P<0.05),而与患者的性别、肿瘤组织类型、肿瘤大小、淋巴结有无转移和肿瘤有无远处转移均无关(P>0.05)。结论:MSI影响NSCLC肿瘤免疫微环境,MSI的检测可为NSCLC免疫治疗效应提供预测指标。
- 桑友洲梅静思于文文张喜英魏枫于津浦任秀宝
- 关键词：非小细胞肺癌微卫星不稳定
- 胃癌患者外周血干扰素水平的变化及其临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的:检测胃癌患者外周血各类干扰素(Interferon,IFN)水平,探讨其与临床病理特征的关系。方法:收集天津医科大学附属肿瘤医院胃部肿瘤科2012年3月至2012年5月收治的47例初治胃腺癌患者外周血,以同期收集的25例健康人外周血为对照,ELISA法检测血清中IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1以及IFN-λ2/3含量,分析各类IFN含量与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、原发部位及各项生化指标间的相关性。结果:与健康对照相比,IFN-β在Ⅰ、Ⅱ期胃癌中表达升高(P=0.009),IFN-λ1在Ⅲ、Ⅳ期胃癌中表达下降(P<0.001),而IFN-γ和λ2/3在Ⅲ、Ⅳ期胃癌中表达升高(P=0.029;P=0.004)。IFN-α、β含量与肿瘤发生部位有密切关系(P=0.003;P=0.004);IFN-γ与LDH水平密切相关(P=0.013)。结论:胃癌患者外周血中不同IFN亚型呈现不同的表达变化,其变化与胃癌发生部位、分期及LDH水平相关,提示IFN家族成员可能对肿瘤的发生发展发挥各自的作用。
- 郑雅文赵华魏枫于津浦李慧张新伟任秀宝
- 关键词：干扰素外周血胃癌乳酸脱氢酶
- MCP-1／CCR2轴促进脐带间充质干细胞向肺癌组织归巢被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoatractant protein-1,MCP-1)/趋化因子(C-C模体)受体2[chemokine(C-C motif)receptor 2,CCR2)轴在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)向肺癌归巢中的作用。方法:采用组织块培养法从健康新生儿脐带组织中分离HUMSCs并鉴定,构建BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型。体外应用Transwell趋化实验、体内应用IVIS Xenogen动物活体成像系统检测HUMSCs是否向肺癌归巢,ELISA法检测肺癌细胞A549培养上清中MCP-1分泌水平,转染shRNA敲低肺癌细胞内MCP-1的表达和用抑制剂RS504393抑制HUMSCs细胞表面的MCP-1受体CCR2后,体内外检测HUMSCs向肺癌归巢能力的改变。结果:成功分离得到HUMSCs并完成鉴定,成功建立BALB/c裸鼠皮下肺癌移植瘤模型。HUMSCs在体内外均能向肺癌归巢(P<0.01),肺癌细胞高表达MCP-1。成功构建稳定低表达MCP-1的肺癌A549细胞系,与对照组相比,shRNA1和shRNA2敲低组趋化HUMSCs的数目明显减少[(80.0±33.0)、(94.0±16.0)vs(167.0±41.0)个,均P<0.05],抑制HUMSCs细胞表面MCP-1受体CCR2后,体内外均显著抑制HUMSCs向肺癌的趋化能力(P<0.05)。结论:MCP-1/CCR2轴促进HUMSCs向肺癌归巢。
- 宋新苗颜次慧吕梦果于文文张新伟任秀宝
- 关键词：间充质干细胞单核细胞趋化蛋白-1肺癌归巢
