国家自然科学基金(30271289)
- 作品数：20 被引量：73H指数：6
- 相关作者：刘迎龙谢宁宋来凤于存涛崔彬更多>>
- 相关机构：中国医学科学院阜外心血管医院解放军第307医院北京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 液氮保存的同种主动脉瓣叶内皮细胞活性的变化被引量：5
- 2004年
- 目的 :研究液氮不同保存时间对人类同种主动脉瓣叶内皮细胞活性的影响 ,探讨同种瓣的有效使用期限。方法 :取健康成年男性、脑死亡6h以内同种带瓣主动脉管道 ,灭菌、程控降温至 -60℃后液氮保存。将主动脉瓣叶随机分为10组存储不同时间。应用流式细胞仪检测上述标本的内皮细胞活性 ,比较各组之间的差异。结果 :新鲜冷冻组和液氮保存2年以内的瓣叶内皮细胞存活率与新鲜组无明显差异 ,而液氮保存3～8年的同种主动脉瓣叶内皮细胞死亡率明显增加 ,差别有统计学意义 (P<0.05)。结论 :液氮保存3年以上的同种带瓣主动脉内皮细胞能否应用于临床值得商榷。
- 陈庆良刘迎龙谢宁
- 关键词：主动脉心脏心脏瓣膜
- 去细胞组织工程同种心脏瓣膜的构建被引量：11
- 2004年
- 目的 全面评价去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学、生物力学及免疫学特性。方法采用低渗液-去污剂[0.5％去氧胆酸(DOA),1％DOA,1％Triton]-核酸酶去细胞法,测定了,47例去细胞同种心脏瓣膜去细胞前后组织学、免疫学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA含量、胶原蛋白含量、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比变化。结果组织学检查1％DOA 24 h组完整地去除了同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中所有的细胞成分,保留了完整的细胞外基质;免疫组织化学证实白细胞DR(HLA-DR)抗原表达明显下降;组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降91.14％,管壁下降91.53％);与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量(去细胞前75.4±1.8,去细胞后82.0±0.7,P<0.05)明显增加,组织厚度、瓣叶组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比差异无显著意义。结论低渗液-去污剂(1％DOA)-核酸酶去细胞法方便有效,去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学及生物力学特性稳定,免疫性显著下降,符合机体的要求,为受体细胞化组织工程心脏瓣膜的研制提供了可靠的天然的纤维支架材料。
- 崔彬刘迎龙谢宁于存涛宋来凤李建荣吴松
- 关键词：去细胞组织工程心脏瓣膜生物力学免疫学
- 两种细胞洗涤剂制备脱细胞同种生物带瓣管道支架的研究被引量：5
- 2005年
- 目的 比较去氧胆酸钠(deoxycholic acid,DOA)和十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulphate,SDS)两种细胞洗涤剂制备脱细胞的同种生物带瓣管道(homograft bioprosthetic tube valved,HBTV)支架的效果,为体外构建组织工程瓣(tissue- engineering heart valve,TEHV)提供同种生物瓣支架材料。 方法 对同种带瓣主动脉管道和带瓣肺动脉管道,分别用含0 .5 % DOA或0 .0 3% SDS的Tris低渗缓冲液共同孵育4 8h,脱去经液氮保存、具有活性的HBTV表面的内皮细胞,固定剂固定后分别进行HE、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜观察,以及扫描电镜观察,摄片。 结果 两种洗涤剂均完全地脱去了HBTV表面的内皮细胞,中心部位的成纤维细胞有部分存留;细胞外基质,如胶原纤维和弹力纤维等均较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变。 结论 0 .0 3%～0 .1% SDS或0 .5 % DOA的低渗缓冲液对制备HBTV脱内皮细胞支架效果均较佳,有利于HBTV再内皮化时种植细胞的黏附和扩增,可进一步应用于体外构建TEHV的研究。对于脱主动脉壁的细胞,SDS浓度应增至0 .1%为佳。
- 冯滨刘迎龙谢宁徐新林阮英卯宋来凤
- 关键词：带瓣管道脱细胞弹力纤维染色体外构建去氧胆酸钠组织工程瓣
- 经液氮保存具有活性的同种生物瓣脱细胞支架的制备被引量：7
- 2004年
- 目的为体外构建组织工程瓣提供脱细胞的同种生物瓣支架材料,并建立相应的技术方法。方法选取经液氮保存、具有活性的同种生物带瓣管道作为实验材料,用含十二烷基硫酸钠(SDS)的Tris低渗缓冲液脱去同种带瓣管道存在的细胞;固定剂固定后,分别行HE染色、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜和扫描电镜观察、摄片。结果用质量浓度为0.03%SDS的Tris低渗缓冲液与同种瓣膜共同孵育48h,完全脱去了表面的内皮细胞(ECs),又较完整地保留了胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质主要成分,其形态学结构在脱细胞前后无明显改变;瓣叶中心部位有部分成纤维细胞存留。而对于脱主动脉壁细胞,质量浓度为0.1%SDS更合适。结论质量浓度为0.03%～0.1%SDS的低渗缓冲液对制备脱细胞的同种生物瓣支架效果较佳,有利于同种瓣再内皮化时种植细胞的粘附和扩增,可进一步应用于组织工程瓣体外构建的研究。
- 冯滨刘迎龙谢宁阮英卯徐新林宋来凤
- 关键词：组织工程瓣脱细胞
- 人骨髓间质干细胞体外扩增和向内皮细胞定向诱导分化的研究被引量：6
- 2005年
- 目的:体外分离、扩增成人骨髓间质干细胞(MSCs)和向内皮细胞(ECs)定向诱导分化,开辟心血管组织工程种子细胞的新来源。方法:采用Percoll(1073g/L)从正常成人骨髓中分离出MSCs,纯化和扩增后流式细胞仪鉴定其纯度;用血管内皮生长因子(VEGF)诱导MSCs向ECs分化,Ⅷ因子(vWF)免疫组化和透射电镜(TEM)鉴定细胞性质。结果:5·0×105个MSCs在体外扩增15代后,获得8·0×1012个MSCs,扩增了约1·6×107倍;MSCs在加入VEGF诱导培养大约14-21d,80%-90%的诱导细胞对Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应;TEM可观察到胞浆内有Weible-palade小体,证实为ECs。结论:成人骨髓MSCs在体外具有定向诱导分化为ECs的潜能,这为心脏组织工程瓣体外构建,尤其是在小儿先天性心脏病组织工程研究中种子细胞的来源提供了可能性。
- 冯滨刘迎龙冯凯龚茹陈虎
- 关键词：骨髓间质干细胞内皮细胞
- 同种心脏瓣膜的组织工程学研究被引量：1
- 2005年
- 崔彬刘迎龙
- 关键词：同种心脏瓣膜组织工程学研究复杂先天性心脏病辅助性T淋巴细胞瓣膜置换手术远期随访
- 去细胞组织工程同种心脏瓣膜的生物学特征被引量：18
- 2004年
- 目的 构建去细胞组织工程同种心脏瓣膜 ,对比研究同种心脏瓣膜去细胞前后的生物学特征。方法 取液氮保存的人同种主动脉带瓣管道 ,采用低渗液 -去污剂 ( 1%DOA) -核酸酶去细胞法 ,测定去细胞前后组织学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA含量、胶原蛋白含量。结果 同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中去除所有细胞成分 ,保留了完整的细胞外基质。与去细胞前相比 ,管壁组织的含水量 [( 75 4 4± 1 84 ) %对 ( 82 0 5± 0 71) % ,P <0 0 5 ]明显增加 ,组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降 91 14 %、管壁下降 91 5 3% ) ;瓣叶组织含水量、组织厚度、热皱缩温度及组织胶原蛋白含量差别无显著性。结论 低渗液 -去污剂 ( 1%DOA) -核酸酶去细胞法方便有效 ,去细胞的同种组织工程心脏瓣膜生物学特性稳定 ,符合机体要求 ;
- 崔彬刘迎龙谢宁于存涛宋来凤
- 关键词：去细胞同种心脏瓣膜生物学特征生物假体人工心脏瓣膜
- Tie-2单克隆抗体鉴定人骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化的内皮细胞
- 目的:体外扩增和定向诱导成人骨髓间充质干细胞(MSCs)向内皮细胞分化,并探讨其可行性和条件。方法:利用Percoll(1073g/L)从正常成人骨髓中分离MSCs,用含10%FBS的LG-DMEM培养基进行纯化和扩增培...
- 冯滨刘迎龙冯凯龚茹陈虎
- 关键词：骨髓间充质干细胞内皮细胞TIE-2
- 文献传递
- 心脏组织工程瓣脉动流培养系统的设计与构建被引量：1
- 2007年
- 自行设计和制造平面和三维立体培养室及贮液室等构件,用医用硅胶管连接;转子泵作为动力源,贮液室通气口供给5%CO2+95%空气,恒温水浴箱保持构件37℃恒温,这样组成了种植细胞与生物瓣支架复合体的脉动培养系统,并进行生物力学和生物相容性测试,为心脏组织工程瓣的体外构建提供研究器材。结果显示,该装置密闭性能好,内环境能保持37±1℃、CO2浓度5%±1%、pH值6.8～7.5;流量在0.125～6.0L/min的范围内任意调节;同种瓣膜上的内皮细胞经2周培养后扩增约10倍;瓣膜支架的细菌和霉菌培养均为阴性,说明我们构建的脉动流培养系统能有效地模拟体内脉动流场实现种植细胞在体外的增殖、重塑,为心脏组织工程瓣的体外构建提供了一种新的实验方法。
- 冯滨刘迎龙晏明全何国钊于存涛谢宁
- 关键词：心脏瓣膜组件
- 同种组织瓣在小儿先天性心脏病外科的应用现状
- 2003年
- 同种组织瓣作为目前理想的生物移植材料广泛地应用于复杂先天性心脏病的外科治疗 ,取得了良好疗效 ,但远期随访发现其易钙化、毁损 ,再次移植率明显提高。
- 崔彬刘迎龙
- 关键词：心脏缺损先天性
