江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ11407)
- 作品数：8 被引量：35H指数：3
- 相关作者：徐波刘志文周通李昆太江湖更多>>
- 相关机构：江西农业大学中国农业科学院生物技术研究所北京市立新学校更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金江西省科技厅科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14亚硝酸盐还原酶的食品级高效诱导表达及其酶学性质研究被引量：10
- 2015年
- 【目的】研究亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)WU14亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,Nir S)的作用机制,为发酵食品中应用乳酸菌纯种培养技术降解亚硝酸盐奠定基础。【方法】在37℃培养条件下,测定含0.02%—0.16%Na NO2的MRS培养液中L.plantarum WU14 24 h的生长密度、p H及Na NO2降解量。通过PCR扩增和TA克隆得到Nir S,并克隆到乳酸乳球菌食品级细胞内高效诱导表达载体p RNA48中,获得重组菌L.lactis NZ9000/p RNA48-Nir S。重组菌经30 ng·m L-1 nisin诱导后,经SDS-PAGE和盐酸萘乙二胺法分析目的蛋白的表达情况及Nir S酶活。通过生物信息学软件预测分析Nir S编码的蛋白质二三级结构、跨膜结构及疏水性。【结果】L.plantarum WU14能够在Na NO2浓度小于0.12%的MRS培养基中生长并降解一部分Na NO2,在0.10%Na NO2培养液中发酵24 h后降解量达到最大,为56.34μg·m L-1,Nir S酶活达2 347.5 U·m L-1。Nir S编码的蛋白质是一种以α-螺旋和无规则卷曲为主,不存在信号肽和跨膜结构的亲水蛋白。Nir S可在L.lactis NZ9000中高效表达,该重组菌能够在Na NO2浓度低于0.10%的GM17培养基中生长并降解一部分Na NO2,在含0.04%Na NO2的培养液中亚硝酸盐降解量达到最大,为22.21 mg·m L-1,Nir S酶活为925.41 U·m L-1。【结论】L.plantarum WU14的Nir S能够降解高浓度的亚硝酸盐,并且经食品级异源表达的Nir S具有较高的酶活力。本研究为探索研究亚硝酸盐降解的机理,建立发酵食品中亚硝酸盐降解的可控发酵体系提供了参考。
- 应碧昌晓宇刘志文周通陈瑶钟平安徐波
- 乳酸菌亚硝酸还原酶代谢调控研究进展被引量：1
- 2014年
- 利用亚硝酸盐还原酶(Nir)降解发酵食品中产生的亚硝酸盐,是应对亚硝酸盐污染的根本对策。研究乳酸菌亚硝酸盐还原酶的分子调控机制,为进一步揭示乳酸菌nir操纵子调控系统的功能及模式元件的组合、新的调控模型和信号传导的分子调控机制奠定基础,对加快寻找安全有效的亚硝酸盐生物降解法,进而保障国家的食品安全具有重要意义。
- 周通徐波
- 关键词：乳酸菌代谢调控
- 短乳杆菌BS6 GlnR介导的氮代谢调控研究
- 2012年
- 短乳杆菌是乳酸杆菌属的重要菌种,被广泛应用于食品和医药行业。全局性转录因子GlnR普遍存在于各种细菌中,可以调控多个基因的表达。本研究从短乳杆菌(Lactobacillus brevis)BS6基因组扩增得到GlnR全长编码基因及包含GlnR盒的glnRA,amtB-glnK,glnPQ启动子序列,并运用细菌单杂交的方法证明GlnR在细菌体内可与上述3个操纵子的启动子结合,从而初步验证全局性转录因子GlnR在短乳杆菌氮代谢调控中的重要作用。
- 江湖刘志文李昆太郑小梅伍宁丰徐波
- 关键词：短乳杆菌
- GlnR介导的代谢调控研究进展被引量：2
- 2014年
- 氮代谢全局性转录调控蛋白GlnR广泛存在于革兰氏阳性细菌中。目前发现的GlnR既有MerR家族也有OmpR家族。针对可利用氮源的变化,GlnR可以抑制或激活氮代谢相关基因的表达。GlnR也参与到细菌磷酸代谢、抗生素合成和细菌毒性的调控。本文详细介绍了GlnR在不同细菌中的氮代谢调控模式,以及与其他代谢途径的联系。GlnR介导的代谢调控研究有助于人们深入了解细菌中心氮代谢,对研究氮代谢调控中的信号传导等具有重要的意义。
- 江湖田健应碧伍宁丰徐波
- 产胞外多糖干酪乳杆菌的筛选鉴定及galU基因克隆与分析被引量：1
- 2014年
- 乳酸菌胞外多糖具有良好的功能特性。从泡菜中分离乳酸菌,初筛到11株产胞外多糖的乳酸菌。经黏度及EPS产量测定,复筛出1株高产EPS的乳酸菌,其产量为771.97μg/m L。采用CTAB法提取该菌株基因组,测定其16S r RNA序列,在NCBI上进行同源序列比对,建立系统发育树。结果初步确定该菌株为干酪乳杆菌ZJ-4(Lactobacillus casei ZJ-4)。以该菌株基因组为模板,参照干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列设计引物。采用Touch-down PCR扩增得到大约900 bp的gal U序列,经TA克隆、测序,与干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列同源率为98%,表明克隆正确。
- 周涛李烨青周通应碧周洁徐波
- 关键词：干酪乳杆菌胞外多糖降落PCR
- 我国乳酸菌饮料产业化现状及发展策略被引量：7
- 2011年
- 本文首先阐述了乳酸菌饮料概念、分类和保健功能,分析了乳酸菌饮料制作工艺,并结合国内外乳酸菌饮料市场分析、发展情况以及国内乳酸菌饮料市场存在的问题和弊端,提出了我国乳酸菌饮料发展战略。
- 单尹佩徐波
- 关键词：乳酸菌饮料
- 我国微生态制剂产业化现状及发展策略被引量：1
- 2012年
- 本文首先阐述了微生态制剂的概念、分类、应用和科学使用方法,分析了微生态制剂发酵工艺,并结合国内外微生态制剂市场现状及分析以及国内微生态制剂市场存在的问题和弊端,提出了我国微生态制剂发展策略。
- 邹雪维熊维娜徐波
- 关键词：微生态制剂
- 三江镇腌菜中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选和初步鉴定被引量：13
- 2012年
- 为筛选具有较强降解亚硝酸盐能力的乳酸菌,本实验经过初筛和复筛从三江镇雪里蕻腌菜中筛选出降解亚硝酸盐能力相对较强的乳酸菌菌株。筛选结果显示菌株对亚硝酸盐最强降解能力达到68h平均降解量32.66μg/mL。采用十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB)法提取降解亚硝酸盐能力最强的乳酸菌11号菌株的基因组,测序后进行Blast同源性比较,其与Lactobacillus fermentum strain PL9005的同源性达到98%,并选取同源性较高的菌株构建系统发育进化树,初步鉴定该菌株为Lactobacillus fermentum。
- 刘志文袁伟静张三燕罗静陈忠良李昆太郭晓燕徐波
- 关键词：乳酸菌
