河南省科技攻关计划(2009B320008)
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 相关作者：夏永华张彩凤韩宇周慧聪李贞娟更多>>
- 相关机构：新乡医学院第一附属医院新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省卫生厅医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- KIAA0101在胃癌细胞中的表达及其对胃癌MKN-45细胞增殖和侵袭力的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究胃癌细胞中KIAA0101蛋白的表达，并探讨其表达下调对胃癌MKN-45细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响。方法利用Western blot检测3株胃癌细胞系（MKN-28、SGC-7901和MKN-45）中KIAA0101蛋白的表达。将KIAA0101小干扰RNA（siRNA）和对照siRNA分别转染胃癌MKN-45细胞，利用Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）检测细胞增殖的变化，利用流式细胞术检测细胞周期分布的改变，最后采用Boyden小室检测细胞侵袭力的变化。结果胃癌MKN-45细胞中KIAA0101蛋白的相对表达水平显著高于MKN-28和SGC-7901细胞，3组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。CCK-8结果显示，与未处理组和对照siRNA组相比，KIAA0101 siRNA组中胃癌MKN-45细胞的增殖受到明显抑制（P〈0．05）。细胞周期分析结果显示，KIAA0101 siRNA组[（61．47±0．89）％]在G0／G1期的细胞数比率显著高于未处理组[（47．43±0．85）％]和对照siRNA组[（48．43±0．73）％；F=271．653，P=0．000]。进一步Boyden小室体外侵袭实验结果显示，KIAA0101 siRNA组（61．51±4．76）中MKN-45细胞穿过Matrigel的细胞数显著低于未处理组（138．74±10．16）和对照siRNA组（132．93±11．25；F=65．949，P=0．000）。结论KIAA0101表达下调能明显抑制胃癌细胞的增殖、诱导细胞周期静止和降低细胞的侵袭能力，因而有望成为胃癌治疗的新靶点。
- 张彩凤夏永华郑庆芬李贞娟郭晓鹤周慧聪张利利董良鹏韩宇
- 关键词：RNA干扰细胞周期细胞系
- USP9X基因表达下调对胃癌AGS细胞株增殖和细胞周期的影响
- 2022年
- 目的探讨X染色体连锁的泛素特异性肽酶9(USP9X)在胃癌中的表达,分析其表达下调对胃癌细胞增殖和周期的影响。方法利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测胃癌组织和胃癌AGS细胞及正常胃黏膜组织和细胞中USP9X mRNA和蛋白的表达。将USP9X siRNA转染胃癌AGS细胞株,分析转染前后胃癌AGS细胞株中USP9X蛋白的差异表达。进而采用流式细胞术和CCK-8检测转染前后AGS细胞的细胞周期和细胞增殖的变化。结果胃癌组织和细胞中的USP9X mRNA和蛋白表达显著高于正常对照。USP9X siRNA能够显著下调胃癌AGS细胞中的USP9X蛋白表达。USP9X基因的表达下调使AGS细胞周期静止在G0/G1期,并显著抑制胃癌AGS细胞的增殖能力(均P<0.05)。结论USP9X可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用,并可能成为胃癌细胞增殖和周期的关键调控因子。
- 张彩凤张超群杜学芳夏永华张利利
- 关键词：细胞周期
- DEK表达下调通过抑制胃癌SGC-7901细胞中NF-κB信号途径诱导细胞凋亡被引量：5
- 2015年
- 目的:研究DEK表达下调对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响,并分析其与NF-κB信号途径及凋亡相关蛋白表达的关系。方法:将DEK siRNA和对照siRNA转染胃癌SGC-7901细胞,并将SGC-7901细胞分为未处理组、对照siRNA组及DEK siRNA组。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测3组胃癌SGC-7901细胞中DEK mRNA和蛋白的表达;流式细胞术检测3组SGC-7901细胞凋亡的变化;Caspase-Glo-3/9试剂盒检测3组SGC-7901细胞中caspase-3和caspase-9的活性;Western blot技术检测3组SGC-7901细胞中NF-κB信号途径关键调控蛋白p65及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:与未处理组和对照siRNA组相比,DEK siRNA组SGC-7901细胞中DEK的mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。DEK siRNA组SGC-7901细胞的早期凋亡率和总凋亡率均显著高于未处理组和对照siRNA组(P<0.05)。最为显著的是,DEK siRNA转染细胞后,p65和Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,并伴随caspase-3和caspase-9活性上升。结论:DEK表达下调介导的SGC-7901细胞凋亡可能与NF-κB信号途径密切相关。
- 张彩凤董良鹏夏永华郭晓鹤张利利周慧聪张兰芳李贞娟韩宇
- 关键词：胃癌DEK细胞凋亡
- Stathmin siRNA抑制人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长并诱导细胞凋亡被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨微管解聚蛋白stathmin对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长和细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:将0.1 mL SGC-7901细胞悬液(5×1010/L)接种于裸鼠背部一侧皮下,建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤模型,将其分为3组:PBS组(PBS治疗)、对照siRNA组(接种对照siRNA,终浓度为100 nmol/L)和stathmin siRNA组(接种stathmin siRNA,终浓度为100 nmol/L),治疗方式均为腹腔注射。连续2周观察荷瘤裸鼠的生长情况,免疫组织化学方法检测增殖抗原Ki-67的表达,采用TUNEL研究肿瘤组织中细胞的凋亡,Western blotting检测裸鼠肿瘤组织中stathmin、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:Stathmin siRNA能明显抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长(P<0.05),stathmin siRNA组中裸鼠移植瘤的重量明显低于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。免疫组化结果表明,stathmin siRNA组中Ki-67的增殖指数明显低于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。TUNEL结果显示,stathmin siRNA组的凋亡细胞数显著高于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。Western blotting结果表明,与PBS组和对照siRNA组相比,stathmin siRNA组中stathmin和Bcl-2蛋白的表达显著下调,而Bax蛋白表达明显上升(均P<0.05)。结论:Stathmin在胃癌细胞增殖和细胞凋亡的调控中发挥重要作用,本研究有望为胃癌分子靶向治疗提供理论依据。
- 张彩凤夏永华李贞娟周慧聪韩宇孙矗
- 关键词：STATHMIN裸小鼠异种移植物
- CADM1过表达对人胃癌MKN-45细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制被引量：10
- 2012年
- 目的:研究细胞黏附分子1(cell adhesion molecule 1,CADM1)过表达对人胃癌MKN-45细胞增殖和侵袭的影响并探讨其可能的分子机制。方法:采用Western blotting检测3株胃癌细胞系中CADM1蛋白的表达。构建pcDNA-CADM1真核表达载体,并将其转染MKN-45细胞,采用G418筛选稳定表达CADM1的细胞株,利用Western blotting鉴定所筛选的稳定细胞株。采用CCK-8试剂和Boyden小室分析过表达CADM1对MKN-45细胞增殖和侵袭的影响。利用Western blotting检测细胞增殖和侵袭相关蛋白表达。结果:MKN-45细胞中CADM1蛋白的相对表达水平显著低于MKN-28和SGC-7901细胞(P<0.05)。此外,成功构建pcDNA-CADM1真核表达载体,并获得稳定过表达CADM1的MKN-45细胞株。CCK-8结果显示,与未处理组和pcDNA3.1组相比,pcDNA-CADM1组中MKN-45细胞的增殖明显受到抑制(P<0.05)。Boyden小室体外侵袭实验结果显示,与未处理组(101.53±6.89)和pcDNA3.1组(98.77±7.03)相比,pcDNA-CADM1组中MKN-45细胞穿膜的细胞数(52.35±3.89)显著减少(P<0.05)。Western blotting结果显示,与未处理组和pcDNA3.1组相比,pcDNA-CADM1组中p21蛋白表达显著上调,而MMP-2和MMP-9表达显著下调(P<0.05)。结论:CADM1过表达能明显抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力,因而CADM1有望成为胃癌治疗的新靶点。
- 郭晓鹤张彩凤夏永华李贞娟周慧聪韩宇
- 关键词：胃肿瘤细胞黏附分子1细胞增殖细胞侵袭
- 下调USP9X表达对胃癌AGS细胞凋亡和侵袭能力的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨下调X染色体连锁的泛素特异性肽酶9(USP9X)表达对胃癌细胞凋亡和侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:将USP9X小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA转染胃癌AGS细胞,将细胞分为3组:未处理的AGS组、对照siRNA组和USP9X siRNA组。采用real-time PCR和Western blot检测不同处理组的胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术和Boyden小室分别检测不同处理组胃癌AGS细胞的凋亡和侵袭能力;Western blot检测凋亡和侵袭相关蛋白的表达水平。结果:USP9X siRNA显著下调胃癌AGS细胞中USP9X的mRNA和蛋白表达水平。USP9X表达下调显著诱导胃癌细胞凋亡,并降低胃癌细胞的侵袭能力。USP9X表达下调显著降低Mcl-1和MMP-2的表达,但明显上调Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论:USP9X可能是胃癌细胞凋亡和侵袭的关键调控因子。
- 张彩凤韩宇夏永华杜学芳肖怀葱赵润根张利利杨双梅
- 关键词：胃癌细胞侵袭
