国家高技术研究发展计划(2007AA10Z167)
- 作品数：20 被引量：75H指数：5
- 相关作者：曹斌云宋宇轩朱广琴王建刚安小鹏更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学海南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 山羊LHβ基因多态性与产羔数的相关分析被引量：4
- 2009年
- 【目的】研究布尔山羊和西农萨能奶山羊LHβ基因多态性及其与产羔数的相关性。【方法】采集布尔山羊和西农萨能奶山羊的血样,针对LHβ基因5′调控区及3个外显子设计6对引物,利用PCR-SSCP技术检测LHβ基因在6个位点上的多态性,并用最小二乘法研究该基因多态性与产羔数的关系。【结果】引物P1与P5扩增片段具有多态性,引物P1扩增产物有PP、PQ和QQ 3种基因型,P5扩增产物有LL和LM 2种基因型,其余4对引物的扩增片段没有多态性。LHβ基因P1引物位点PP与QQ基因型相比,PP型在第153 bp处发生了C→A突变;引物P5位点LL与LM基因型相比,LL型在第64 bp处发生了T→C突变,2处突变均未导致氨基酸变化,为沉默突变。在引物P1位点,布尔山羊PP型个体第3,4胎产羔数均极显著高于PQ型个体(P<0.01),西农萨能奶山羊PP型个体第4,5胎产羔数均显著高于PQ型个体(P<0.05);在引物P5位点,布尔山羊LL型个体第4,5胎产羔数分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于LM型个体,西农萨能奶山羊LL型个体第5胎产羔数极显著高于LM型个体(P<0.01)。【结论】引物P1与P5扩增片段具有多态性,引物P1和P5位点可能对山羊的产羔数有影响。
- 孙瑞萍王利心王建刚朱广琴宋宇轩曹斌云
- 关键词：山羊PCR-SSCPLHΒ基因产羔数
- 人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定
- 2011年
- 为研究人白介素-2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达,构建人白介素-2基因的山羊β-酪蛋白位点打靶载体。以质粒pBC1为模板扩增山羊β-酪蛋白上游2.5 kb和下游3.5 kb的序列作为5′和3′同源臂,将克隆得到的人白介素-2基因和neo基因插入到2个同源臂之间,获得山羊β-酪蛋白基因打靶载体pBNI53。利用脂质体将重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞进行G418筛选,并采用PCR和实时定量PCR方法对人白介素-2基因在稳定株中的表达进行验证。检测结果表明,本试验构建的打靶载体pBNI53成功转染奶山羊胎儿成纤维细胞,将人白介素-2基因成功整合至奶山羊胎儿成纤维细胞基因组中,为通过体细胞核移植法制备人白介素-2基因乳腺生物反应器的研究奠定了基础。
- 王韵斐陈秋菊杨莎崔易虹杨明明曹斌云
- 关键词：Β-酪蛋白基因打靶乳腺生物反应器
- FMDV 2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达
- 2011年
- 构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达。克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV 2A)自剪切序列连接EGFP基因,构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ,并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞,然后用RT-PCR技术和Western blot检测hIL-2基因与EG-FP基因的表达。重组质粒pFIENβ经酶切鉴定后表明构建成功,转染质粒PFIENβ和pEGFP-C1的细胞均观察到绿色荧光;从转染pFIENβ的乳腺上皮细胞中扩增出hIL-2基因和EGFP基因,而转染pEGFP-C1的细胞中只扩增出EGFP基因;经Western blot检测,转染pFIENβ的细胞中均表达了hIL-2和EGFP蛋白。结果表明山羊β-酪蛋白启动子能同时启动hIL-2基因和EGFP基因在山羊乳腺上皮细胞中的表达,并且利用FMDV 2A元件实现了hIL-2基因和EGFP基因的非融合型表达。
- 陈秋菊王韵斐崔易虹朱广琴杨明明宋宇轩曹斌云
- 关键词：人白细胞介素2EGFP双顺反子
- 6个微卫星基因座与西农萨能奶山羊产羔数相关性的研究被引量：8
- 2008年
- 选择与羊高繁殖力嚓密关联的微卫星基因座OarAl7,101、BMl329、OarHH55、BMl43、BMS2508和LSCV043，分析其在西农萨能奶山羊群体中的遗传多态性及与西农萨能奶山羊产羔数的关系。结果表明：6个微卫星基因座在西农萨能奶山羊中的有效等位基因数在6．5713～8．9925，多态信息含量在0．8301～0．8781，属于高度多态基因座。6个微卫星基因座对西农萨能奶山羊产羔数的效应分析表明：OarAEl01基因座的109bp等位基因、OarHH55基因座的165和140bp等位基因、BMS2508基因座的140bp等位基因，BMl43基因座的124bp等位基因、BM]329基因座的219bp／185bp基因型以及LSCV043基因座的140bp／120bp基因型，均对西农萨能奶山羊产羔数具有正效应。以上6个微卫星基因座可作为西农萨能奶山羊产羔性状候选基因的遗传标记。
- 朱广琴王利心孙瑞萍梁昭义董彬宋宇轩王建刚曹斌云
- 关键词：微卫星基因座西农萨能奶山羊产羔数分子育种
- 发酵型乳酸羊乳果味饮料加工工艺研究被引量：3
- 2008年
- 本试验选用草莓,胡萝卜,五味子,羊奶为主要原料,采用正交试验对发酵型乳酸菌羊乳饮料生产工艺进行了系统的研究,最终确定了该新型复合酸羊乳饮品的加工工艺、方法及最佳配方。结果表明:①乳酸羊乳果味饮料加工工艺为:鲜羊乳→过滤、消毒→加糖、果蔬汁、菌种发酵→冷藏→添加果汁与其它辅料调配→灌装→灭菌。②五味子的最佳提取工艺为:第一次加入5倍的水,保持温度在70～80℃之间30min,第二次加入3倍的水,温度与时间同第一次,第三次同第二次。③乳酸菌羊乳饮料的最佳配方为羊乳酸乳为40%、草莓2.5%、五味子6%、稳定剂0.5%。
- 宋社果张洪亮曹斌云
- 关键词：胡萝卜五味子
- 橘枣山羊奶饮料加工工艺研究被引量：1
- 2008年
- 采用正交试验的方法研究山羊奶饮料的加工配方和稳定性,筛选了橘枣山羊奶的加工工艺配方。结果表明:①橘枣山羊奶的加工工艺:橘皮、大枣→清洗→浸泡→水煮→保温浸提→过滤→留汁→添加过滤灭菌的有羊奶调配→均质→罐装→灭菌→成品;②橘皮,大枣的固水比均为:1:3;③橘枣山羊奶最佳配方为:枣汁8%,橘皮汁8%,鲜羊奶40%,纯净水40%,白砂糖4%;④复合稳定剂的添加量是:羧甲基纤维素钠(CMC):0.04%,蔗糖酯0.12%,黄原胶0.08%;⑤复合酸味剂添加量0.5%。
- 袁忠慧吴佳潞曹斌云刘蝉铭
- 关键词：枣汁
- 枸杞锁阳山羊奶饮料加工工艺的研究被引量：2
- 2008年
- 采用山羊奶、枸杞、锁阳为主要原料,应用对比和正交试验方法,研制功能性山羊奶饮料。结果表明:①工艺流程为:枸杞、锁阳原料→浸提→过滤→添加羊奶调配→均质→灌装→灭菌→成品;②最佳配方为:50%纯净水、30%羊奶、6%白砂糖、7%枸杞汁、5%锁阳,1%酸味剂;③复合稳定剂的添加量为:0.12%蔗糖脂,0.08%CMC,0.08%黄原胶。加工的饮料稳定性佳,口感细腻,酸甜适宜,具有羊奶的芳香和特殊口味。
- 刘树民汪琦翀刘蝉铭曹斌云
- 关键词：山羊奶锁阳
- 玫瑰芦荟复合酸羊奶饮品加工工艺研究被引量：2
- 2008年
- 本研究选用玫瑰、芦荟和羊奶为原料,采用正交试验法研究了新型复合酸羊奶饮品及各原料的加工工艺、饮品最佳配方比例及稳定性,最终确定了该饮品的加工工艺和配方。结果表明:①玫瑰芦荟复合酸羊奶饮品的加工工艺为:鲜羊奶→过滤、消毒→加糖、菌种发酵→冷藏→添加玫瑰汁、芦荟汁、纯净水等→添加稳定剂,搅拌→灌装→灭菌→成品。②玫瑰汁的最佳提取工艺为用15倍的水在70℃提取1h。芦荟汁与水的最佳配比为1:4。③玫瑰芦荟复合酸羊奶饮品的最佳配方为:酸羊奶35%,玫瑰汁15%,芦荟汁10%,纯净水40%,白砂糖6%,稳定剂CMC-Na0.5%。
- 宋社果赖新生曹斌云
- 关键词：芦荟汁酸羊奶
- 不同温度与存放时间对山羊奶酸度影响的研究被引量：1
- 2008年
- 本研究测定了山羊奶在不同恒温条件下保存10h的酸度变化规律。结果表明:在4℃～20℃的低温条件下山羊奶酸度仅有轻微的上升趋势,在24℃～36℃的温度范围内,山羊奶存放的前5h酸度基本无变化,5h以后酸度呈明显上升趋势并且温度越高,酸度上升速度越快,最高达70°T。在40℃的保存条件下,山羊奶在存放4h以后,酸度急剧上升,最高达70°T。研究表明,在温度为20℃以下时,山羊奶可存放10h,其酸度不超过22°T,仍可加工成合格山羊奶粉等产品;在温度为24℃～36℃时,山羊奶保存5h后,酸度超过22°T;当温度在36℃以上时,山羊奶保存4h后酸度超过22°T,不能加工成合格奶产品。
- 刘树民段春燕曹斌云
- 关键词：山羊奶温度酸度
- 组织块再移法分离培养奶山羊乳腺上皮细胞被引量：3
- 2012年
- 通过比较组织块贴壁培养法、组织块再移法、胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ消化法和胶原酶消化配合组织块贴壁法分离、培养、纯化山羊乳腺上皮细胞,绘制细胞生长曲线并计算细胞群体倍增时间,研究乳腺上皮细胞培养效果。结果显示,利用胶原酶消化配合组织块贴壁法不能获得正常生长的乳腺上皮细胞;利用组织块贴壁培养法、组织块再移法和胶原酶Ⅱ消化法获得大量的乳腺上皮细胞,所得到的上皮细胞生长曲线呈典型的"S"型,符合细胞生长的一般规律。组织块再移法不仅可快速获得大量纯化的乳腺上皮细胞,而且所得到的细胞经传代后,细胞群体倍增时间最短、增殖能力最强,表明,该法是获得山羊乳腺上皮细胞最适宜的方法。
- 陈秋菊王韵斐崔易虹朱广琴宋宇轩曹斌云
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞
