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机械张应力刺激对PLGA-胶原复合培养大鼠成肌细胞整合素偶联激酶表达的影响被引量：1: 2013年; 目的研究PLGA(poly lactide-co-glycolide)-胶原复合支架上大鼠成肌细胞体外张应力作用下整合素偶联激酶(ILK)的表达变化,探索其力学信号转导过程。方法体外培养大鼠成肌细胞,实验组接种于黏附有PLGA-胶原复合生物支架的加力板,对照组接种于空白加力板,然后使用"Forcel"四点弯曲循环应变加载装置加载。利用RT-PCR技术,检测不同时间点细胞ILK mRNA的表达,比较三维PLGA-胶原复合支架上和二维平面上培养的细胞在张应力作用下基因水平的表达差异。结果张应力刺激下,同一时间点三维支架上细胞ILK的表达明显高于二维平面上的细胞;在加载过程中,三维支架上细胞ILK的表达水平明显提高,而且更快达到峰值。结论培养环境的三维空间结构对细胞在力学刺激作用下的初期反应起重要作用。; 邹蕊牛林宋锦璘赵志河; 关键词：成肌细胞

张应力加载下PLGA-胶原类细胞外基质三维支架复合培养大鼠成肌细胞“整合素β_1”的表达: 2012年; 目的:利用PLGA(poly lactide-co-glycolide)-胶原类细胞外基质复合支架构建大鼠成肌细胞体外三维力学加载模型并研究周期性机械张应力对不同方式培养的大鼠成肌细胞"整合素β1"基因表达的影响。方法:静电纺丝法制备PLGA-胶原类细胞外基质复合生物支架并将其粘接于加力板上,与体外培养的大鼠成肌细胞进行复合培养;使用"Forcel"四点弯曲细胞应变加载装置分别对三维培养和二维培养的大鼠成肌细胞进行生理限度内的力学加载;利用RT-PCR技术检测不同时间点细胞整合素β1mRNA的表达;比较张应力作用下,三维PLGA-胶原复合支架上和二维平面培养细胞整合素β1基因表达水平的差异。结果:除加载15mi n外,相同强度张应力作用的各个时间点,三维支架上细胞整合素β1的表达均明显高于二维平层培养细胞;且三维支架上细胞整合素β1的表达水平更快达到峰值,而且峰值持续时间也显著增加。结论:周期性张应力刺激下,三维复合培养大鼠成肌细胞整合素β1mRNA表达水平明显高于二维培养细胞,这表明培养方式及细胞外基质的三维空间结构对加载早期细胞的力学信号转导有着十分重要的作用。; 邹蕊牛林赵志河宋锦璘; 关键词：整合素Β1 力学信号转导

机械张应力对PLGA-胶原复合支架上大鼠成肌细胞桩蛋白表达变化的影响被引量：1: 2011年; 目的:研究不同时间、不同强度的张应力对三维支架复合培养的大鼠成肌细胞桩蛋白paxillin表达的影响,探讨机械张应力刺激作用下复合培养成肌细胞早期力学信号转导机制。方法:首先,利用电纺法制备PLGA(polylactide-co-glycolide)-胶原复合生物支架,并与大鼠成肌细胞复合培养;然后,应用四点弯曲细胞力学加载装置对其进行力学加载,收集细胞,采用免疫印迹(Western Bloting)法,研究周期性单轴机械张应力刺激下PLGA-胶原复合支架上大鼠成肌细胞磷酸化桩蛋白p-paxillin(Tyr 118)/paxillin的表达变化。结果:无论1000μstrain或2000μstrain的张应力刺激,均可诱导paxillin的磷酸化过程,且随加载时间延长,磷酸化程度上调;2000μst rai n的张应力较1000μstrain激活paxillin磷酸化过程的效应更明显、迅速。结论:①周期性单轴牵张应变可以在加载早期通过Tyr118位点的磷酸化而激活桩蛋白paxillin;②周期性牵张应变对复合培养成肌细胞paxillin蛋白表达的影响,与应力刺激的力值有关。; 邹蕊宋锦璘赵志河; 关键词：成肌细胞桩蛋白

不同方法制备的PLGA-胶原复合支架对大鼠成肌细胞增殖活性的影响被引量：1: 2012年; 目的比较不同方法制备的PLGA-胶原支架对大鼠成肌细胞增殖活性的影响,评价PLGA-胶原复合支架的生物安全性。方法分别采用静电纺丝法和粒子洗出法制备PLGA-胶原复合支架与大鼠成肌细胞复合培养后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖情况。结果①两种方法制备的PLGA-胶原支架对大鼠成肌细胞的增殖活性均无不良影响。②MTT结果显示,电纺法制备的PLGA-胶原支架对复合培养细胞的增殖具有一定的促进作用。结论①PLGA-胶原复合支架材料具有良好的生物安全性。②相比于粒子洗出法,静电纺丝法制备的PLGA-胶原复合支架更能促进细胞的生长增殖。; 邹蕊宋锦璘牛林; 关键词：MTT法

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陕西省自然科学基金(2009JM4026)