中央高校基本科研业务费专项资金(10FX114)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张丽军马芳姚亚敏刘晓茜贾小芳更多>>
- 相关机构：上海市公共卫生临床中心南昌大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金王宝恩肝纤维化研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转乙型肝炎病毒表面抗原基因小鼠肝细胞质膜蛋白质组学研究
- 2012年
- 目的分析转HBsAg基因小鼠与正常小鼠肝细胞质膜的差异蛋白质组，为了解乙型肝炎发病机制，寻找药物作用靶标提供指导。方法构建6月龄转HBsAg基因C57小鼠模型，检测转基因组小鼠和正常对照C57小鼠肝脏病理变化。以转基因组和正常对照C57小鼠肝脏为材料，蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法纯化肝细胞质膜，Western印迹验证纯化的质膜组分纯度，二维凝胶电泳结合ImageMaster软件图像分析质膜蛋白质，获得的差异蛋白质点经胰酶酶切后，进行差异蛋白质的液相色谱串联质谱分析鉴定。结果转HBsAg基因小鼠肝脏呈现肝炎表现，而正常对照C57小鼠肝脏未见异常。蔗糖密度梯度离心结合磁珠纯化法可以有效富集小鼠肝质膜组分，并减少线粒体的污染。小鼠肝脏质膜组分中，共获得30个≥2倍的差异蛋白质点，成功鉴定到11个可能与HBV感染相关的差异蛋白质，其中9个蛋白质在转基因鼠肝质膜中表达上调，2个蛋白质表达下调。这些差异蛋白质包括细胞支架蛋白、心脏钙离子释放通道蛋白、细胞色素B5和ATP合成酶a亚基等。结论本研究鉴定了一批与HBsAg基因表达相关的小鼠肝脏质膜蛋白质，它们可能是乙型肝炎的药物作用靶标，本研究将为进一步探讨HBV感染的机制提供指导。
- 贾小芳李春洪彭霞尹林冯艳玲马芳张丽军
- 关键词：病毒包膜蛋白质类蛋白质组学
- 分血时间对外周血单个核细胞蛋白质表达谱的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:分析不同分血时间对外周血单个核细胞(PBMC)蛋白质表达谱的影响,探讨临床和研究中合适可行的PBMC分血时间。方法:在采血后0、2、4、6、8、12 h采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离血液中的PBMC,显微镜观察细胞形态;选取分血时间为0、2、4、6、8 h的PBMC提取蛋白质进行蛋白质凝胶电泳,选取差异表达蛋白质条带,通过液相色谱串联离子井质谱鉴定差异表达的蛋白质;结合GO数据库信息对差异表达蛋白质的功能和定位进行分析。结果:分血时间为12 h已观察不到完整的PBMC细胞形态;质谱鉴定表明随着分血时间的延长,差异蛋白质逐渐增多;在2、4、6 h鉴定出的功能和定位明确的差异蛋白质中,大部分蛋白质功能为转运和信号转导,定位在细胞核和细胞膜上;而8 h鉴定出的差异蛋白质的功能的定位发生了显著的变化。结论:蛋白质组学技术能有效地观察不同分血时间导致的PBMC蛋白质表达的动态变化,推荐合适且临床可行的PBMC分血时间为6 h以内。
- 马芳尹林熊华伟姚亚敏刘晓茜贾小芳张丽军
- 关键词：外周血单个核细胞蛋白质组学
- LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的利福布丁被引量：2
- 2012年
- 目的用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中利福布丁的浓度。方法以替米沙坦为内标,加入0.2 mL血浆,用1 mL乙酸乙酯萃取,高速离心后上清液氮气吹干并用流动相复溶,取20μL进样检测。结果利福布丁的最低检测限为0.5 ng.mL-1,在0.3～9.6μg.mL-1内线性良好,低、中、高浓度的提取回收率均大于85%,批内、批间RSD低于10%,成功检测了大鼠血浆中利福布丁的血药浓度。结论所用方法灵敏度好、准确度高、分析时间短、样品处理更简便,适用于测定利福布丁的血药浓度。
- 刘晓茜姚亚敏马芳张丽军
- 关键词：利福布丁液液萃取血药浓度
