国家教育部博士点基金(20020558077)
- 作品数：3 被引量：13H指数：3
- 相关作者：杨川程桦王川严励朱蕾更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院中山大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重构腺相关病毒转导PDX-1对C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用被引量：3
- 2006年
- 【目的】重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAVHelper-FreeSystem)表达系统中,转染HEK293细胞,培养72h,提取病毒悬液,转导PDX-1进入C2C12细胞中,检测细胞培养液中的胰岛素含量。【结果】①用X-gal染色系统检测,可见有蓝色的阳性细胞。②病毒的粗略的浓度经计算后大约为1012/mL,转导的病毒数约为1011。③PCR结果:用重构的腺相关病毒转导后C2C12有胰岛素及PDX-1的mRNA的表达。④用重构的腺相关病毒转导PDX-1进入C2C12后的培养液的胰岛素浓度为(5.5±1.1)μIU/mL,较其他方法也有较明显的增加(P<0.05)。【结论】通过应用含有PDX-1基因的重构腺相关病毒载体可以转导PDX-1在C2C12细胞中表达,且可以提高C2C12分化为胰岛素分泌细胞的分泌量。
- 杨川李莉王川陈黎红黎峰严励程桦
- 关键词：PDX-1成肌细胞胰岛素分泌细胞腺相关病毒
- 胰升糖素样肽1诱导成肌细胞株C_2C_(12)分化为分泌胰岛素样物质细胞被引量：8
- 2003年
- 成肌细胞株C2 C12 与不同浓度的胰升糖素样肽 1(GLP 1)共孵育 ,C2 C12 细胞通过GLP 1的作用可以产生胰岛素样物质。
- 杨川程桦刘丹朱蕾
- 关键词：胰升糖素样肽1C2C12细胞细胞分化
- PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用被引量：4
- 2005年
- 【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。
- 杨川程桦王川严励黎锋魏菁
- 关键词：胰岛素分泌细胞PDX-1胰腺十二指肠免疫法检测胰岛素含量胰岛素浓度
