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结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化被引量：1: 2007年; 目的构建结核分枝杆菌（M．tb）rv3873基因原核表达载体并进行表达。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增MTBrv3873基因，并克隆入pGEM～TEasy质粒。测序正确后，再亚克隆入pET30a（＋）质粒，构建pET30a（＋）：rv3873重组体。结果以重组体分别转化DH5a和BL21（DE3）菌后，经0．4mmol／L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导，pET30a（＋）：rv3873表达出相对分子质量为47000左右的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示，IPTG诱导4h重组蛋白的表达量最高。表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中，表达量占全菌蛋白质的50％，Westernblot证实其具有良好的抗原性。经Ni-NTA柱纯化，获得纯度为90％的重组蛋白。结论成功地构建原核表达载体pET30a（＋）：rv3873，并获得重组Rv3873蛋白，为辅助诊断结核菌的感染奠定了基础。; 陈曦张宗德古淑香贾红彦刘忠泉邢爱英李自慧杜博平黄海荣马玛; 关键词：结核分枝杆菌

冰片对丙戊酸钠透过血脑屏障的影响被引量：32: 2007年; 目的探讨冰片对丙戊酸钠在家兔体内透过血脑屏障的影响。方法12只家兔随机分为对照组和冰片组,每组6只。两组动物均静脉滴注丙戊酸钠达稳态,之后冰片组予冰片灌胃给药。采用荧光偏振免疫分析法检测家兔血浆和脑脊液丙戊酸钠的浓度,计算药代动力学参数。结果与对照组相比,冰片组家兔脑脊液平均药物浓度升高,曲线下面积增加(P<0.05),稳态脑脊液药物浓度出现峰值时间为6h,脑血浓度比亦升高(P<0.05),但血药浓度并未升高。结论冰片可提高血脑屏障对丙戊酸钠的通透性,但对血药浓度影响较小。; 陈瑞玲赵志刚张星虎刘凤琴李东梅; 关键词：冰片丙戊酸钠血脑屏障

结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化: 2007年; 目的构建结核分枝杆菌（M.tb）rv3873基因原核表达载体并进行表达。方法用PCR扩增MTB rv3873基因，并克隆入pGEM-T Easy质粒。测序正确后，再亚克隆入pET30a（＋）质粒，构建pET30a（＋）：rv3873重组体。结果以重组体分别转化DH5α和BL21（DE3）菌后，经0．4mM异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导，pET30a（＋）：rv3873表达出分子量为47000左右的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示，IPTG诱导4h重组蛋白的表达量最高。表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中，表达量占全菌蛋白质的50％，Western blot证实其具有良好的抗原性。经Ni—NTA柱纯化，获得纯度为90％的重组蛋白。结论成功地构建原核表达载体pET30a（＋）：rv3873，并获得PPE68重组蛋白，为辅助诊断结核菌的感染奠定了基础。; 陈曦张宗德古淑香贾红彦刘忠泉邢爱英李自慧杜博平黄海荣马玙

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北京市优秀人才培养资助(2005)