“十一五”国家科技支撑计划(2006BAK02A14)
- 作品数：5 被引量：47H指数：4
- 相关作者：史贤明唐俊妮周锐龙飞潘峰更多>>
- 相关机构：上海交通大学华中农业大学四川大学更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法的比较研究被引量：22
- 2008年
- 目的:对金黄色葡萄球菌DNA不同提取方法进行评价。方法:采用4种不同金黄色葡萄球菌DNA提取方法,比较提取得率和质量,对提取的DNA进行PCR扩增并评价效果。结果:在DNA提取之前加入70%乙醇可有效处理细菌细胞,增加细胞对裂解液的敏感性,再用溶菌酶处理能很好地被消化,获得了一种快速、简洁和有效的提取方法。结论:这是一种适用于金黄色葡萄球菌和其它病原细菌的有效提取方法(方法4),可用于金黄色葡萄球菌和其它病原细菌的分子生物学操作和快速诊断技术。
- 唐俊妮龙飞史贤明周锐
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因组DNA
- 金黄色葡萄球菌分子检测技术的常用靶基因被引量：11
- 2008年
- 金黄色葡萄球菌是一种常见的致病菌,可以产生多种毒素并具有广泛的耐药性。从特异性基因位点、抗药性基因和毒素基因3个方面列举了检测金黄色葡萄球菌的靶基因以及利用这些靶基因的PCR检测方法。详细说明了这些基因的发现、功能和实际应用情况。将金黄色葡萄球菌分子检测的思路和方法进行汇总、比较,并对未来的相关研究趋势和研究领域进行了展望。
- 范一灵潘峰史贤明
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性毒素分子检测靶基因
- 单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选被引量：3
- 2009年
- 通过对功能和调控基因的研究,探讨单核细胞增生李斯特菌菌膜的形成机制,建立防治该细菌污染食品的方法。使用电转化的方法,将携带转座子Tn917的质粒pTV1-OK转化到单核细胞增生李斯特菌中,诱导转座,获得1 880个突变株,加上前期构建的突变株,使突变库增加到2 200株。使用96孔细胞培养板对随机挑选的1 000余株突变株进行菌膜培养,结晶紫染色后测OD595值。以此值作为菌膜形成量的筛选依据,最终挑选出菌膜形成能力变小的突变株8株,目标突变获得率约8‰。对筛选的菌膜形成量变小的突变株进行荧光显微观察,证实该8株突变株菌膜形成能力弱于野生菌株。通过PCR验证,这8株突变株的基因组中插入了Tn917,这可能是它们的表型发生变化的原因。
- 马瑜丹朱欣娜龙飞史贤明
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌TN917
- 金黄色葡萄球菌核酸酶基因缺失突变株RN4220 Δnuc1的构建被引量：6
- 2008年
- 金黄色葡萄球菌存在两个核酸酶编码基因,一个是葡萄球菌核酸酶(Staphylococcal nuclease,SNase),命名为nuc1,另一个是耐热核酸酶(Thermonuclease,TNase),命名为nuc2,nuc2是一个新的候选基因,以往认为金黄色葡萄球菌中的核酸酶只源于一个编码基因nuc1,为了进一步研究nuc2基因的功能,首先要将金黄色葡萄球菌nuc1基因缺失。研究目的就是通过构建同源重组质粒pBT2Δnuc1,将其电转入金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,获得nuc1基因缺失突变株。经过了7轮培养和筛选,同源重组几率为2%(7/345),筛选出的nuc1突变株用PCR方法和RT-PCR进行了验证,从而获得了nuc1基因缺失突变株RN4220Δnuc1。
- 唐俊妮周锐史贤明康名松陈焕春
- 关键词：金黄色葡萄球菌同源重组
- 金黄色葡萄球菌毒力调控系统TCRSs和SarA被引量：5
- 2009年
- 金黄色葡萄球菌是人和动物重要的病原菌之一,为了适应寄主环境,金黄色葡萄球菌可及时调节毒力基因的表达以提高它的生存能力。金黄色葡萄球菌中主要有两类毒力基因表达的调控系统,它们分别是TCRSs(双组分调控系统)和SarA蛋白家族。TCRS在原核细菌中包含一个膜传感器和一个反应调控因子,目前已经识别出了16个这样的TCRSs;SarA蛋白家族可分为3个亚类:(1)单结构域类(SarA、SarR、SarT、SarV和SarX);(2)双结构域类(SarS、SarU和SarY);(3)MgrR同系物。这2类毒力调控系统可以同时激活多种毒力基因的表达。本文对这2类调控系统的结构和功能等方面进行综述,并对以后要解决的问题进行了展望。
- 唐俊妮史贤明曾志光王红宁胡瑜
- 关键词：金黄色葡萄球菌SARA毒力因子
