国家自然科学基金(81272401)
- 作品数：14 被引量：31H指数：4
- 相关作者：黄修燕汤钊猷黄自丽周俭黄新余更多>>
- 相关机构：上海交通大学附属第六人民医院复旦大学上海市徐汇区中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局中医药科研基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中药复方“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡的实验研究被引量：3
- 2014年
- 目的:研究中药复方"松友饮"对人肝癌细胞凋亡的影响及可能的分子机制,为临床应用提供理论依据。方法:采用流式细胞术、Caspase-3活性实验及Real Time PCR技术,观察2、4、8、10、20、30及40 mg/mL"松友饮"(c1、c2、c3、c4、c5、c6及c7组)对体外培养的人肝癌细胞MHCC97H凋亡的影响,并探索可能的分子机制。结果:流式细胞仪检测结果显示,同对照组相比,干预组细胞凋亡率呈时间依赖性增加,"松友饮"(c4,10 mg/mL)干预72 h后MHCC97H细胞凋亡率增加超过3倍。干预48 h后Caspase-3显著激活,Caspase-3活化呈时间依赖性。"松友饮"浓度增加,转移抑制基因1(Metastasis suppressor 1,MTSS1)抑制效果越明显,"松友饮"(c4,10mg/mL)干预48 h,MTSS1基因表达抑制率为39.0%。结论:"松友饮"诱导肝癌细胞凋亡可能与MTSS1基因表达抑制、Caspase-3活化相关。
- 黄修燕黄自丽许永华王志刚黄新余郑起汤钊猷
- 关键词：肝细胞癌中药复方凋亡
- 直肠癌新辅助放化疗临床完全缓解后复发一例被引量：2
- 2013年
- 患者男，64岁，无烟酒嗜好，无特殊基础病史。因大便性状改变3个月，于2011年9月行肠镜检查：距肛缘约6cm处见一溃疡样新生物，环肠腔1／2，少量渗血（图1A）；
- 黄修燕黄自丽王志刚黄瑾
- 关键词：新辅助放化疗缓解后直肠癌复发烟酒嗜好大便性状
- 肝细胞癌转移相关分子诊断模型的构建被引量：4
- 2013年
- 目的构建肝细胞癌（肝癌）转移相关分子模型并筛选关键分子，用于评估肝癌转移潜能。方法以高转移人肝癌细胞MHCC97H建立裸鼠原位移植瘤模型，14d后将36只成模裸鼠随机分成姑息性肝切除组（获取肝癌标本A、B）、假手术组（获取肝癌标本C1）和对照组（获取肝癌标本C2）。姑息切除后14d每组随机处死6只裸鼠，采用肿瘤转移相关芯片（OHS-028 Oligo GEArray）检测肝癌基因表达，使用综合型GEArray分析配套软件分析芯片数据。差异基因统计学分析、分组关联度分析及支持向量机（SVM）用于筛选肿瘤转移相关标志基因；应用基于特征性致病基因的基因聚类和多维量表构建基因功能网络，关联向量机（RVM）用于处理回归及分类问题；实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）用于检测mRNA表达。结果由12个基因（BAI1、MTA2、MTA1、SMAD2、GNRH1、CDH8、ITGB3、CHD4、GZMA、ITGA7、CXCR4和TSHR）组成的分子诊断模型对肝癌高、低转移分组的阳性率分别为88．9％和93．5％；MTSS1、转化生长因子-β1（TGF-β1）、SMAD25白细胞介素（IL）-1β及基质金属蛋白酶（MMP）-7基因在高侵袭转移组基因网络中处于核心位置，通过FQ—PCR验证。结论成功构建的分子诊断模型和关键分子可用于评估肝癌转移潜能。
- 黄修燕黄自丽许永华周俭汤钊猷郑起
- 关键词：分子模型
- 转移消失蛋白B与微囊蛋白-1在肝细胞癌中的相互作用
- 2017年
- 目的探讨转移消失蛋白B（MIM—B）与微囊蛋白-1（caveolin-1）在肝细胞癌细胞中的相互作用。方法构建携带MIM—B与FLAG融合基因的pcDNA3．1载体，脂质体法转染Hep3B、SMMC7721细胞。通过细胞免疫荧光以及共聚焦显微镜检测MIM—B蛋白与caveolin-1蛋白共定位；应用内、外源免疫共沉淀确认相互作用；以Hep3B、SMMC7721以及MHCC97H细胞为研究模型，分成空载体组、MIM—B与FLAG融合基因组，进行免疫共沉淀实验。结果成功构建携带MIM—B与FLAG融合基因的pcDNA3．1载体，pcDNA3．1-MIM—B—FLAG转染效率为90．0％以上，显著表达MIM-B。共聚焦显微镜结果显示MIM—B能沉淀caveolin-1；MIM-B与caveolin-1共定位；内、外源免疫共沉淀结果显示MIM-B与caveolin-1相互作用。结论MIM-B与caveolin-1在肝癌细胞中共定位并相互作用。
- 黄修燕黄自丽许永华郑起周俭汤钊猷
- 新型标记笔在下肢静脉曲张患者术前应用中的效果评价被引量：2
- 2013年
- 目的探讨新型标记笔术前标记下肢曲张静脉的应用价值。方法应用一种新型静脉曲张标记笔,与传统棉签标记法比较,评估其成本、实用性及标记差异对手术效果的影响。结果 2组耗材成本的对比结果显示,标记笔与棉签每次标记成本分别为0.18元和0.36元,标记笔成本低廉。组间医患满意率评分结果、术中穿刺成功率及标记精确性存在显著差异(P<0.05),标记笔在易用性、精确性、满意度等方面较棉签具有明显优势,差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访复发、遗漏资料显示,术后1周2组差异无统计学意义(P>0.05),术后6个月和1年,棉签标记组复发率、遗漏率均较新型标记笔标记组高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论新型静脉曲张标记笔成本低、应用方便、标记精确性高,与传统方法比较,降低了术中遗漏和术后复发率,具有较好的临床应用价值。
- 张琦黄修燕赵珺梅家才董波
- 关键词：静脉曲张激光治疗复发
- 中药复方“松友饮”体内药效物质基础研究被引量：1
- 2013年
- 目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础。方法:以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,12只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/d灌胃给药。在第7次灌胃结束后2 h,脱颈处死裸鼠收集血样。应用ABI 4000 Q-TRAP仪器和TIC总离子扫描方式进一步研究、分析含药血清的药效物质基础。结果:成功构建裸鼠原位移植瘤模型,获取有效的含药血清。发现体内有两个主要的吸收入血峰,分别为RT=29.61,m/z为213.3;RT=53.69,m/z为523.8。通过比对发现"松友饮"吸收入血峰来自组方药材成分。结论:给药7 d的含药血清药效物质基础主要为吸收入血的丹参酮IIA和黄芪甲苷,其分子基础尚需进一步研究。
- 黄修燕黄自丽郑媛婷郑起黄新余
- 关键词：中药复方药效物质基础
- 肝癌外泌体环状RNA-100338对血管内皮细胞成管能力的影响被引量：4
- 2020年
- 目的观察人肝癌(HCC)细胞外泌体环状RNA(circRNA)-100338对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管形成能力的影响。方法提取、纯化和鉴定上海复旦大学肝癌研究所建立MHCC97H细胞来源外泌体,并共孵育中国科学院上海细胞所HUVEC细胞(37℃、5%CO2),外泌体示踪实验追踪外泌体能否被HUVEC细胞内化。采用Lipofectamine™2000转染试剂转染MHCC97H细胞,提取干扰circRNA-100338后的HCC细胞上清液外泌体(1 g/L);增殖实验用于检测HUVEC细胞增殖能力变化(测量波长450 nm);血管形成能力实验用于评估HUVEC细胞成管(×10^0)。统计分析采用独立样本t检验。结果透射电子显微镜观察到MHCC97H细胞来源的外泌体多数呈圆形或椭圆形,粒径分布峰值在120 nm,符合外泌体粒径特征,蛋白质印迹法(Western blot)检测到外泌体标志蛋白。MHCC97H细胞来源的外泌体被HUVEC细胞内化。肝癌circRNA-100338干扰组和对照组的外泌体分别共培养HUVEC细胞48、72、96 h后HUVEC细胞增殖[吸光度(A)值]分别为0.358±0.005和0.436±0.011,差异有统计学意义(t=-16.227,P<0.01)、0.661±0.052和0.888±0.031,差异有统计学意义(t=-9.146,P<0.01)及1.191±0.084和1.542±0.038,差异有统计学意义(t=-9.296,P<0.01),干扰组血管内皮细胞增殖能力和对照组比较显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组HUVEC成管能力下降,成管结节细小。结论肝癌外泌体circRNA-100338增强HUVEC细胞增殖能力,进而促进内皮细胞血管新生。
- 黄修燕黄自丽许永华黄新余周俭汤钊猷
- 关键词：外泌体血管新生
- 优化中药复方“松友饮”的基础研究
- 2015年
- 目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础并重新配伍设计,为其组方优化提供理论基础。方法:应用高转移人肝细胞癌细胞株MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,24只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤1 d开始1次/d灌胃给药("松友饮"3.6 g/kg,对照组予以等量蒸馏水)。灌胃5周,脱颈处死裸鼠收集血样,用于进一步分析"松友饮"体内药效物质基础,采用均匀设计的实验方法重新设计、配伍、优化"松友饮"。结果:裸鼠模型构建过程顺利,灌胃过程中实验组死亡1只裸鼠,有效获取含药血清。结合参考文献及通过比对发现连续给药5周,"松友饮"吸收入血的主峰来自组方药材成分:黄芪甲苷、槲皮素及隐丹参酮、丹参酮IIA(新组复方主要含4种单体,简称HHYD复方),重新配伍为3种新组方。结论:基于5周给药的含药血清药效物质基础新组方的组分更加明确,更易定量和质量控制。
- 黄自丽黄修燕许永华郑媛婷
- 关键词：肝细胞癌中药复方
- 高转移MHCC97H细胞裸鼠原位移植瘤姑息性肝癌切除模型的建立被引量：1
- 2013年
- 目的模拟临床肝癌切除病例构建姑息性肝切除裸鼠模型，用于研究手术对残癌的影响并探索干预策略。方法采用肝左叶单瘤源接种技术，构建高转移潜能MHCC97H细胞裸鼠原位移植瘤模型，成功建模后14d行姑息性肝切除。姑息术后14d，分析肿瘤相关基因差异表达；观察35d，检测肝内、肺脏及腹腔转移；剩余裸鼠用于观察生存期。计量资料比较用f检验，生存分析用Kaplan-Meier法（LogRank检验），尸〈0．05为差异有统计学意义。结果原位移植瘤模型成功率100％，成功构建裸鼠姑息性肝切除模型，无手术相关死亡裸鼠。姑息组裸鼠肝内转移结节多于假手术组[（11．7±4．7）个对比（6．3±2．8）个，t=-2．412，P〈0．051，腹腔转移结节多于假手术组[（9．8±3．4）个对比（5．2±2．6）个，t=-2．641，P〈0．051，肺转移结节也多于假手术组[（14．3±4．7）个对比（8．7±4．7）个，t=-2．348，P〈0．051。应用生物信息学技术进一步分析发现，肿瘤转移抑制蛋白1、肿瘤坏死因子D1、Smad2、白细胞介素1D及基质金属蛋白酶7基因在姑息组残癌基因功能网络中处于核心位置。姑息组裸鼠生存期为（60．8±2．7）d，假手术组裸鼠生存期为（51．3土1．4）d，差异有统计学意义（x2=12．850，P〈0．01）。结论单瘤源姑息性肝切除模型能有效模拟临床肝切除病例，为术后残癌生物学特性的研究及干预提供一个新的平台。
- 黄修燕黄自丽许永华黄新余周俭叶胜龙樊嘉汤钊猷郑起
- 关键词：姑息疗法
- 高转移潜能细胞外泌体共培养促进肝癌侵袭能力的研究被引量：4
- 2019年
- 目的观察高转移潜能肝癌(HCC)细胞外泌体与低转移潜能HCC细胞共培养对低转移潜能HCC细胞侵袭能力的影响并探讨其机制。方法收集4种不同转移潜能肝癌MHCC97H、MHCC97L、SMMC7721、Hep3B细胞上清液和46例HCC患者血浆,提取、纯化和鉴定外泌体,与低侵袭潜能Hep3B细胞共培养,应用侵袭实验检测Hep3B细胞侵袭能力变化、聚合酶链反应检测环状RNA(circRNA)_100338变化及明胶酶谱实验检测基质金属蛋白酶(MMP)活性变化。结果成功提取、纯化和鉴定相应外泌体。肺转移患者的HCC外泌体中circRNA_100338水平(0.064±0.006)高于无肺转移患者的HCC外泌体中circRNA_100338水平(0.039±0.005),高转移潜能MHCC97H细胞外泌体circRNA_100338水平(0.083±0.005)高于低转移潜能Hep3B细胞外泌体circRNA_100338水平(0.021±0.003),MHCC97H细胞外泌体共培养Hep3B细胞,可见Hep3B细胞侵袭性能力增强,穿膜数增加(15.3±2.5比8.7±2.1),共培养组细胞circRNA_100338水平升高(0.019±0.002比0.007±0.001);MMP-9活性逐渐增强(0.062±0.001、0.147±0.002、0.315±0.003),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高转移潜能细胞外泌体促进HCC侵袭能力与外泌体circRNA_100338水平提高及MMP-9活性增强有关。
- 黄修燕黄自丽黄瑾黄新余周俭汤钊猷
- 关键词：外泌体
