国家自然科学基金(30300398)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- 模拟失重对流体剪切应力诱导MG-63细胞ERK2激活的影响
- 2007年
- 目的研究成骨细胞力学信号转导功能中酪氨酸磷酸结合结构域适应蛋白(Shc)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK2)的关系,并观察模拟失重条件下流体剪切应力(FSS)诱导ERK2活性的变化,以期从信号转导水平探讨模拟失重对成骨细胞力学信号转导功能的影响。方法将负性缺失突变体质粒Shc-SH2和活性ERK质粒Myc-ERK2共同转染入MG-63细胞中,同时将真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2也共同转染入MG-63细胞中作为转染平行对照组,对转染细胞进行1.5Pa流体剪切应力处理15min。利用回转器模拟失重60h,对转染细胞进行1.5PaFSS处理15min。结果在转染平行对照组中,FSS组中的Myc-ERK2的活性显著升高;在Shc-SH2转染组中,Myc-ERK2的活性与转染平行对照组相比显著降低(P<0.05),在FSS组中未见Myc-ERK2活性的变化。转染了真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2的细胞在模拟失重条件培养及FSS作用15min后,Myc-ERK2的活性升高,但与未进行模拟失重的对照组相比,Myc-ERK2的活性显著降低(P<0.05)。结论在力学信号转导通路中,Shc可以介导力学信号以激活ERK2。模拟失重对细胞的力学信号转导功能具有不良影响。
- 吴燕红王冰曹新生杨志张舒
- 关键词：失重模拟流体剪切应力ERK2SHC
- 流体剪切应力对模拟失重条件下MG-63成骨样细胞Cbfα1表达的影响
- 2007年
- 目的观察模拟失重条件下培养的人骨肉瘤MG-153成骨样细胞受流体剪切应力（FSS）作用后核心结合因子α1（Cbfα1）表达的改变，初步探讨失重情况下骨质减少的可能机制。方法MG-153成骨样细胞传代于25ml培养瓶中，培养24h后细胞被随机分为模拟失重组和1G组（每组又下设立FSS作用组和无FSS作用组）。48h后，将细胞置于流室系统中进行刺激实验。FSS强度设为0．5Pa，作用时间分别为15、30和60min。其后提取细胞总RNA，进行反转录PCR，检测细胞内Cbfα1 mRNA的表达，并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。同时提取细胞总蛋白，Western Blotting检测Cbfα1蛋白的表达。结果和无FSS作用组相比，FSS作用组的Cbfel的表达在30min和60min均显著增强，且在一定的时间范围内（15～60min）Cbfα1的表达水平随着作用时间的延长而增加。和1G组相比。模拟失重组的Cbfα1表达水平降低，在30min、60min时有显著的统计学意义。结论FSS可以促进MG-63成骨样细胞内Cbfα1的表达，模拟失重可显著抑制FSS对MG-63成骨样细胞内Cbfα1表达的诱导作用。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：流体剪切应力核心结合因子Α1
- 流体剪切应力对骨肉瘤成骨样细胞核结合因子α1基因的表达作用(英文)
- 2006年
- 背景:机械应力在成骨细胞功能调控中的作用是近年骨组织生物力学研究的一个重点。流体剪切应力是否可以诱导成骨细胞内核结合因子α1的表达,其规律如何?目前少见报道。目的:观察流体剪切应力对骨肉瘤成骨样细胞(MG-63)核结合因子α1基因表达的作用。设计:对比观察实验。单位:解放军第四军医大学航空航天医学系航空航天生物动力学教研室完成。材料:MG-63人源骨肉瘤成骨样细胞。方法:实验于2004-11/2005-04在解放军第四军医大学航空航天医学系航空航天生物动力学教研室完成。①对MG-63细胞进行培养,传代60h后,将细胞置于流室系统中进行刺激实验。流体剪切应力分别为0.5Pa(0.5Pa应力刺激组)和1.5Pa(1.5Pa应力刺激组),作用时间分别为15,30和60min。同时取盖玻片置于含培养基的培养皿中,作为流体剪切应力刺激组的即时对照(对照组)。②提取细胞总RNA,进行反转录聚合酶链反应,检测细胞内核结合因子α1mRNA的表达,并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。主要观察指标:不同流体剪切应力及不同作用时间核结合因子α1mRNA的表达值。结果:①与对照组相比,流体剪切应力刺激组的核结合因子α1mRNA的表达在作用30min和60min均显著增强,且在一定的时间范围内(15～60min),核结合因子α1mRNA的表达水平随着作用时间的延长、应力水平的增加而增强。②1.5Pa应力刺激组在作用30min和60min核结合因子α1mRNA的表达比0.5Pa应力刺激组均显著增强(P<0.01)。结论:流体剪切应力可以促进成骨细胞内核结合因子α1的表达。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：剪切强度骨肉瘤基因
- 流体剪切应力对人骨肉瘤成骨样MG-63细胞Cbfα1基因表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察流体剪切应力（FSS）对人骨肉瘤成骨样细胞（MG-63）Cbfα1基因表达的影响。方法对MG-63骨肉瘤细胞进行培养，传代60h后，将细胞置于流室系统中进行应力刺激实验。FSS分为0．5Pa和1．5Pa两个水平，每个水平下作用时间分别为15min、30min和60min。提取细胞总RNA，进行反转录PCR，检测细胞内Cbfα1mRNA的表达，并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。结果与对照组相比，FSS作用组的Cbfα1 mRNA的表达在30min和60min均显著增强，且在一定的时间范围内（15—60min），Cbfα1 mRNA的表达水平随着作用时间的延长、应力水平的增加而增强，在30min和60min的变化具有显著性意义（P〈0．01）。结论FSS可以促进成骨细胞内Cbfα1的表达。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：流体剪切应力骨肉瘤细胞核心结合因子
