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HPLC法同时测定甜叶菊中3种绿原酸类化合物被引量：9: 2014年; 建立了同时测定甜叶菊中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸3种化合物的HPLC分析方法,并测定了3种化合物在根、茎、叶中的含量。色谱柱为Waters C18（4.6 mm×250mm,5μm）,流动相为0.2%醋酸（A）和甲醇（B）,流速：1 mL/min,检测波长：327 nm,柱温：40℃,洗脱条件为0~10 min 70%A;10~15 min 70%A-45%A;15~25 min 45%A,25~26 min 45%A-70%A;26~30 min 70%A。在此条件下,绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸的线性范围分别为9.50~285.00、9.25~277.50、9.75~292。50μg/mL且在此范围内线性关系良好（R2〉0.999）,加标回收率介于96.42%~101.18%。从乙醇体积分数、料液比和超声提取时间3因素优化绿原酸提取条件,最佳条件为70%乙醇在料液比1：25的条件下超声提取60 min。对甜叶菊根、茎、叶中上述3种化合物含量进行分析,结果显示,甜叶菊根、茎、叶中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸的含量范围分别为0.59~7.56、2.43~23.92、1.12~21.21 mg/g。该方法准确度高,重复性好,可用于甜叶菊中3种绿原酸类化合物的同时测定。; 付晓尹忠平上官新晨陈继光郭春梅彭大勇; 关键词：高效液相色谱法甜叶菊绿原酸

青钱柳悬浮培养细胞三萜酸的分离及结构鉴定被引量：3: 2013年; 通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLCTOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定。; 尹忠平上官新晨陈继光吴少福黎冬明; 关键词：植物细胞培养青钱柳三萜酸

甜叶菊毛状根培养系统的建立及绿原酸类成分的诱导被引量：1: 2017年; 本文利用发根农杆菌A4诱导甜叶菊毛状根再生,建立毛状根生产绿原酸类物质的培养体系,并研究茉莉酸甲酯和水杨酸对毛状根中绿原酸类物质积累的影响。结果表明,经发根农杆菌A4侵染的甜叶菊叶片外植体在共培养14 d后诱导出了毛状根;PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒中rol B和rol C基因均已整合到毛状根中;毛状根在MS液体培养基中,培养到第14 d时分别加入不同浓度(50、100、200μmol/L)的水杨酸和茉莉酸甲酯进行诱导,处理第1、3、6 d后均抑制了毛状根的生长,但茉莉酸甲酯促进了毛状根中绿原酸类物质的积累,而水杨酸却抑制了毛状根中绿原酸类物质的积累。由此说明,发根农杆菌A4侵染甜叶菊可诱导出毛状根,该毛状根可用于绿原酸类物质的生产,茉莉酸甲酯可提高绿原酸类物质的含量。; 邹凯刘泽波许小向上官新晨尹忠平陈继光蒋艳; 关键词：发根农杆菌毛状根茉莉酸甲酯水杨酸

青钱柳叶三萜化合物分离与鉴定被引量：10: 2013年; 采用大孔树脂、硅胶、半制备高效液相等柱色谱技术以及重结晶等方法对青钱柳叶三萜化合物进行了分离纯化,获得了8个三萜单体,经高液相色谱(HPLC)、高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLC-TOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等检测分析,分别确定为β-香树脂醇(1)、熊果酸(2)、齐墩果酸(3)、白桦脂酸(4)、β-乳香酸(5)、科罗索酸(6)、马斯里酸(7)、阿江榄仁酸(8)。; 李田上官新晨尹忠平陈继光蒋艳; 关键词：青钱柳三萜化合物

响应面法优化甜叶菊毛状根3,5-二咖啡酰奎宁酸提取工艺: 2015年; 以甜叶菊毛状根为材料,以3,5-二咖啡酰奎宁酸得率为考察指标,选取乙醇体积分数、液料比和超声提取时间3个因素,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计3因素3水平的响应面试验方法,优化了超声辅助提取的主要工艺参数。结果表明,优化后的甜叶菊毛状根3,5-二咖啡酰奎宁酸提取参数为乙醇体积分数68%,液料比22∶1(m L/g),提取时间90 min;在优化条件下,该物质的得率为2.97%,与优化模型的预测得率3.01%基吻合,优化后的工艺参数可用于3,5-二咖啡酰奎宁酸的提取。; 付晓吴少福尹忠平上官新晨陈继光彭大勇; 关键词：甜叶菊毛状根超声辅助提取

甜叶菊毛状根的诱导培养及茉莉酸甲酯对其绿原酸类物质积累的影响被引量：5: 2017年; 以发根农杆菌ACCC10060诱导甜叶菊毛状根,建立毛状根培养生产绿原酸类物质体系,研究茉莉酸甲酯对绿原酸类化合物积累的影响。经发根农杆菌ACCC10060侵染的甜叶菊叶片外植体,共培养14 d后产生毛状根。聚合酶链式反应检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rol B和rol C基因已成功整合到甜叶菊毛状根基因组中。MS液体培养基较B5、WPM更利于甜叶菊毛状根生长及绿原酸类物质的积累,培养35 d后,干质量增加约30倍,绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸最高含量分别为3.47、11.47、3.04 mg/g。毛状根在MS液体培养基中培养至第3周时分别添加15、45、100μmol/L的茉莉酸甲酯进行诱导,处理后第1、2、4、8天收获,毛状根的生长量和绿原酸类物质含量均有提高,其中以45μmol/L茉莉酸甲酯的促进作用最为显著,3种绿原酸类物质的总产量是对照组的2.68倍(P<0.01)。以上结果表明,甜叶菊毛状根培养可用于绿原酸类物质的生产,经茉莉酸甲酯处理可显著提高绿原酸类物质的产量。; 邹凯刘泽波陈继光尹忠平上官新晨许小向; 关键词：甜叶菊发根农杆菌毛状根茉莉酸甲酯

硝普钠对青钱柳悬浮细胞三萜合成的影响被引量：2: 2014年; 本文采用植物细胞工程技术建立青钱柳细胞悬浮培养体系，以硝普钠为外源诱导物对其三萜的合成进行诱导，从硝普钠的浓度、添加时间和持续作用时间三个方面系统地研究了硝普钠对青钹柳悬浮细胞生长、总三萜酸积累及代表性三萜酸合成的影响，以期为植物细胞培养生产三萜酸类化合物提供参考。10~50μmol／L的硝普钠对悬浮细胞的生长影响不大，但对三萜合成的诱导作用也不明显；150μmol／L的硝普钠有效地促进了三萜的合成且对细胞生长影响较小；200μmol／L以上的浓度则对细胞生长有较强的抑制作用；接种后的第8d添加150μmol／L硝普钠、持续作用4d后收获效果最佳，总三萜酸产量可达1228．74mg／L，为对照组的2．14倍，五种代表性三萜酸中以熊果酸（UA）和齐墩果酸（OA）的变化最为明显，分别比对照组提高了2．28倍和2．48倍。研究结果表明，外源添加硝普钠能有效地促进青钱柳悬浮细胞三萜酸的合成。; 郭春梅尹忠平上官新晨陈继光付晓; 关键词：细胞工程植物细胞培养青钱柳三萜酸硝普钠

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