广州市科技攻关项目(2005Z3-E0051)
- 作品数：7 被引量：34H指数：3
- 相关作者：张为民叶倩君贾刚周娟梅家转更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院南方医科大学华南理工大学更多>>
- 发文基金：广州市科技攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 同种异体NK细胞对人多药耐药鼻咽癌细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用被引量：2
- 2007年
- 目的:研究同种异体自然杀伤(natural killer,NK)细胞对人多药耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨异体间的免疫治疗。方法:PCR-SSP法分析CNE2/DDP细胞人白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)基因型和健康人NK细胞表面的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因型,用磁珠分离法从3例健康人外周静脉血中分离NK细胞并进行体外培养扩增。12只BALB/c裸鼠,随机分为2组,每组6只。每只裸鼠皮下接种1×106个CNE2/DDP细胞,治疗组裸鼠同时每只经尾静脉注入3×107个NK细胞,观察两组裸鼠成瘤时间、成瘤率及肿瘤体积变化。成瘤后3周,眼眶取血,流式细胞术检测人NK细胞;处死裸鼠,取肿瘤块称重,计算抑瘤率,观察肿瘤病理特点。结果:3例健康者KIR与CNE2/DDP细胞表面的HLA-Ⅰ类分子之间存在错配。对照组和NK细胞治疗组成瘤率均为100%,肿瘤出现时间分别为(17.17±1.17)d、(24.83±1.47)d,两者差异有统计学意义(P<0.01);成瘤后3周,治疗组外周血可检测到人NK细胞;对照组和NK细胞治疗组裸鼠的瘤重分别为(1.60±0.22)g、(1.28±0.52)g(P<0·01),NK细胞治疗组的抑瘤率为20%;肿瘤病理学鉴定为低分化鳞状上皮细胞癌,NK细胞治疗组可见明显淋巴细胞浸润和肿瘤坏死。结论:同种异体NK细胞对CNE2/DDP细胞裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,有希望成为治疗鼻咽癌的免疫效应细胞。
- 梅家转郭坤元吴远彬周健魏红梅
- 关键词：鼻咽癌多药耐药自然杀伤细胞裸鼠移植瘤
- 内皮素-1对人肺腺癌SPC-A1细胞内游离钙离子的影响及机制被引量：3
- 2008年
- 背景与目的既往的研究发现内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)与肺腺癌细胞生长关系密切,其促肺腺癌细胞生长作用可能与细胞内游离钙离子增加有关。本研究探讨ET-1对人肺腺癌SPC-A1细胞内游离钙离子(Intracellular free calcium,[Ca2+]i)的影响及其机制。方法采用Fura-2/AM荧光技术测[Ca2+]i浓度,检测ET-1对SPC-A1细胞[Ca2+]i的影响。应用钙离子通道阻滞剂、内皮素受体(Endothelin Receptor,ETR)拮抗剂及其细胞内信号传导通路阻滞剂,研究ET-1对SPC-A1细胞[Ca2+]i影响的细胞学机制。结果ET-1(1×10-15-1×10-8)mol/L呈浓度依赖性地促进SPC-A1细胞[Ca2+]i升高,ETAR特异性拮抗剂BQ123(1×10-7mol/L)可完全抑制ET-1(1×10-10mol/L)的促[Ca2+]i升高作用(P<0.05),而ETBR特异性拮抗剂BQ788(1×10-7mol/L)无此作用(P>0.05);细胞外无钙离子或用Nifedipine(1×10-6mol/L)阻断钙离子内流后ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2+]i升高作用明显减弱(P<0.05);Ryanodine(50×10-6mol/L)抑制细胞内钙离子释放后ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2+]i升高作用减弱(P<0.05);磷脂酶C抑制剂U73122(1×10-5mol/L)可以抑制ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2+]i升高作用(P<0.05);U73122的无活性同分异构体U73433不能抑制ET-1促[Ca2+]i升高作用(P>0.05);蛋白激酶C抑制剂Staurosporine(2×10-9mol/L)对ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2+]i的作用无明显影响(P>0.05)。结论ET-1能够促进SPCA-1细胞[Ca2+]i升高,其途径主要是通过L-型钙离子通道开放使细胞外钙离子内流,内流钙离子促发细胞内钙离子释放。同时ET-1激活细胞内磷脂酶C诱发的钙离子释放也是ET-1促进[Ca2+]i升高的机制之一。
- 周娟张为民叶倩君贾刚
- 关键词：肺肿瘤内皮素-1内皮素受体
- 自然杀伤细胞与肿瘤细胞之间的免疫编辑被引量：19
- 2008年
- 自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)是机体天然免疫的主要承担者,NK细胞表面表达的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)和活化性受体NKG2D是调节NK细胞杀伤活性的主要受体。NK细胞通过其细胞表面的活化性受体和肿瘤细胞表面的相应配体结合,激活NK细胞的杀伤活性。NK细胞在杀伤肿瘤细胞的同时和肿瘤细胞之间发生了相互免疫编辑作用,结果导致肿瘤细胞表面NKG2D配体表达的降低或者肿瘤细胞表面NKG2D配体以可溶性的形式释放到外周血中与NK细胞结合;NK细胞受肿瘤细胞的编辑作用导致其细胞表面NKG2D受体表达的下降,抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体表达增强,使得NK细胞的抗肿瘤效应减弱。在认识NK细胞和肿瘤细胞相互编辑过程和相关的分子机制基础上,采取措施阻断NK细胞的抑制性信号通路或增强活化性信号通路是提高NK细胞抗肿瘤效应的主要手段。
- 梅家转周健郭坤元
- 关键词：自然杀伤细胞肿瘤免疫编辑
- 细胞内钙在内皮素-1促肺腺癌细胞SPC-A1生长中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的：探讨细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）在内皮素-1（endothelin-1,ET-1）促肺腺癌细胞SPC-A1生长中的作用及其机制。方法：采用RT-PCR法检测肺腺癌细胞SPC-A1中ET-1及内皮素受体（endothelinreceptor,ETR）的mRNA表达,蛋白印迹法检测SPC-A1细胞中ET-1及ETR的蛋白表达,MTT法检测细胞生长,Fura-2/AM荧光技术检测[Ca^2＋]i。结果：肺腺癌细胞SPC-A1上有ET-1及内皮素受体A（ETAR）及受体B（ETBR）的mRNA及蛋白表达;ET-1（10^-15～10^-8mol/L）具有促进SPC-A1细胞增殖作用,也促进其[Ca^2＋]i浓度升高,作用均呈浓度依赖性;ET-1（10^-10mol/L）促SPC-A1细胞增殖及[Ca^2＋]i浓度升高作用均可被ETAR拮抗剂BQ123（10^-7mol/L）阻断（P〈0.05）,但不受ETBR拮抗剂BQ788（10^-7mol/L）影响（P〉0.05）;去除细胞外Ca^2＋及电压依赖型Ca^2＋通道阻滞剂硝苯地平（1μmol/L）在阻断ET-1升高[Ca^2＋]i浓度作用的同时也抑制ET-1诱导的肺腺癌细胞增殖。结论：ET-1通过ETAR促SPC-A1细胞生长及增加[Ca^2＋]i,细胞外Ca^2＋通过电压依赖型钙离子通道开放内流是ET-1增加[Ca^2＋]i及促肺腺癌细胞SPC-A1增殖的主要机制。
- 周娟叶倩君贾刚张为民
- 关键词：肺肿瘤内皮缩血管肽1细胞增殖
- 内皮素-1促肿瘤血管新生机制被引量：9
- 2009年
- 内皮素(ET)是一种由21个氨基酸组成的生物活性肽,有3种异构体(ET-1,ET-2,ET-3),目前研究最多也最清楚的是ET-1,在正常组织中它通过与其受体(ETR)发挥强大的缩血管及促有丝分裂作用。近年的研究证实,ET-1及ETR在多种肿瘤组织中分泌和表达,并起到促进肿瘤组织血管新生的作用。
- 贾刚张为民
- 关键词：内皮素血管内皮生长因子血管新生肿瘤
- 内皮素-1对人肺腺癌细胞SPC-A1生长的影响被引量：2
- 2007年
- 背景与目的内皮素-1（endothelin-1,ET-1）是强大的细胞促有丝分裂素,在一些肿瘤细胞生长和肿瘤血管新生中起重要作用。本研究的目的是探讨ET-1对人肺腺癌细胞SPC-A1生长的影响。方法采用细胞体外培养技术,四甲基偶氮唑盐[3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT]显色分光光度法测细胞增殖,流式细胞仪测细胞周期。结果ET-1（1×10^-15-1×10^-9mol/L）具有促进SPC-A1细胞增殖作用,作用呈浓度依赖性,在1×10-11mol/L时作用呈饱和状态;ET-1（1×10^-10mol/L）促SPC-A1细胞增殖作用可被内皮素受体A（endothelin receptor A,ETA）拮抗剂BQ123（1×10^-7mol/L）阻断,但不受内皮素受体B（endothelin receptor B,ETB）拮抗剂BQ788（1×10^-7mol/L）影响;用乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA）（0.4mmol/L）去除细胞外钙离子及电压依赖型Ca2＋通道阻滞剂硝苯地平（nifedipine,1μmol/L）能抑制ET-1诱导的肺腺癌细胞增殖。ET-1（1×10^-10mol/L）对SPC-A1细胞周期没有显著影响。结论ET-1为促SPC-A1细胞生长因子,ET-1促肺腺癌细胞生长的作用主要通过SPC-A1细胞表面ETA受体实现,细胞外钙离子通过电压依赖型Ca^2＋通道内流在ET-1促肺腺癌细胞生长中起重要作用。
- 叶倩君周娟张为民
- 关键词：内皮素-1肺腺癌细胞细胞增殖
- 内皮素及其受体对肿瘤细胞生长的作用
- 2006年
- 叶倩君郭勇张为民
- 关键词：肿瘤细胞生长内皮素受体G蛋白偶联受体气道平滑肌细胞ET-1血管收缩作用
