国家自然科学基金(30300365)
- 作品数：11 被引量：16H指数：2
- 相关作者：浦佩玉王广秀贾志凡康春生张志勇更多>>
- 相关机构：天津医科大学总医院天津市神经病学研究所河北联合大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Wnt2信号通路重要成员在胶质瘤中的表达及其意义被引量：6
- 2009年
- 近来发现Wnt信号通路对个体发育和肿瘤生成具有重要作用。为进一步探讨Wnt通路在胶质瘤中是否存在表达异常及其在胶质瘤生成中的作用，我们采用RT—PCR、组织芯片免疫组织化学染色以及蛋白印迹法，对人脑胶质瘤Wnt2通路相关因子的表达变化及其意义进行了分析。
- 王广秀张志勇浦佩玉康春生于士柱贾志凡许鹏周旋
- 关键词：人脑胶质瘤免疫组织化学染色WNT通路蛋白印迹法肿瘤生成个体发育
- Wnt5a在肿瘤研究中的进展
- 2009年
- 近年来研究发现Wnt5a与肿瘤发生、发展关系密切。根据细胞类型不同，Wnt5a既可以起到促癌作用，又可以起到抑癌作用，其信号级联反应复杂，受多种因子调节。
- 王广秀浦佩玉
- 关键词：WNT5A信号传导肿瘤
- siRNA靶向Notch1对U251人脑胶质瘤细胞系生长抑制作用的体内研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究siRNA靶向敲低Notch1活性对裸鼠皮下U251胶质母细胞瘤的生长抑制作用。方法建立U251胶质瘤细胞裸鼠皮下模型，分为：对照组、无义组siRNA转染组、Notch1siRNA转染组，每4d给予siRNA、Notch1siRNA与oligofectamin混合物瘤内治疗，直至观察期结束。处死后取出肿瘤标本。应用免疫组化检查Notchl、PCNA、MMP9、GFAP和cyclinD1的表达水平；TUNEL法分析细胞凋亡。结果转染靶向Notch1siRNA组肿瘤生长受抑，肿瘤细胞Notchl、MMP9、cyclinD1、PCNA及表达明显下调，GFAP表达上调，细胞增殖、侵袭能力受到抑制。并诱发细胞凋亡。结论Notch1可作为基因治疗胶质瘤优选靶之一，RNA干涉Notch1治疗恶性胶质瘤具有潜在的临床应用前景。
- 裘明哲浦佩玉康春生张志勇王广秀贾志凡江荣才
- 关键词：胶质瘤RNA干涉基因治疗
- 转染Notch2基因对人脑胶质瘤细胞系A172生长的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人脑胶质瘤细胞系A172转染Atoc/i2基因后抑制细胞增殖情况及其机 制。方法将A172细胞分为空白对照组、转染空载质粒组（pcDNA3）、转染Notch2质粒组 （Notch2-pcDNA3）三组，后两组分别转染空载体和Notch2。采用MTT法检测其对细胞增殖的影响，流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的影响，Transwell方法检测其对细胞侵袭的作用，Western blotting检测转染Notch2质粒后A172细胞中重要信号通路成员Notch2、表皮生长因子受体 （EGFR）、组织磷酸化蛋白（p-AKT）、胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）、人第10号染色体缺失的磷酸酶 （PTEN）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase3）、细胞核因子kB（NF-kB）、增殖细胞核抗原（PCNA）、白细胞介素-2（Bcl-2）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及周期素依赖性激酶 抑制因子l（CyclinDl）]相关基因的表达。结果MTT实验结果显示，与对照组及pcDNA3组比 较，A172细胞被转染Notch2后细胞存活率明显下降，差异有统计学意义（P〈0.05）;S期及G2/M期 细胞减少，G0/G1细胞较对照组相比增加22.1%,细胞明显被阻滞于G0/G1期；凋亡细胞数从对照组 的1.2%增加到14.8%;细胞侵袭数由对照组的35.23个降低至17.43个。与PI3K-AKT通路相关的 重要成员 EGFR、p-AKT、PI3K 以及 NF-kB、PCNA、Bc1-2、MMP-2、MMP-9 及 CyclinDl 等表达水平 均有明显下调；而拮抗PI3K/AKT活性的抑癌蛋白PTEN以及Caspase-3的表达则明显上调。结论转染TVoteM基因可抑制细胞增殖和侵袭，诱导细胞凋亡以及重要信号通路成员的基因表达变化。
- 王广秀许鹏贾志凡张安玲浦佩玉
- 关键词：NOTCH2神经胶质瘤EGFRPI3KAKT通路
- Notch信号通路与脑肿瘤
- 2008年
- Notch信号通路作为一个对细胞的生长发育具有广泛多样化影响的信号途径，也与肿瘤的发生、发展相关。对于不同的肿瘤或同一肿瘤的不同级别、不同发展阶段Notch信号通路可能具有不同作用。Notch信号在一些脑肿瘤（脑胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、脑膜瘤）中异常表达，且参与这些脑肿瘤的发生、发展。
- 许鹏浦佩玉
- 关键词：NOTCH脑肿瘤基因疗法
- 人脑胶质瘤中β-catenin的表达与细胞增殖相关性研究被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨人脑胶质瘤中βcatenin的表达及与细胞增殖的相关性。方法:用免疫组化法观察了47例胶质瘤标本βcatenin、cyclinD1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并分析其相关性。结果:在胶质瘤中βcatenin、cyclinD1、PCNA均随肿瘤恶性程度增高而增高(P分别为0.017、0.017、0.027),相关分析发现βcatenin、cyclinD1、PCNA的表达两两相关(P<0.001,P<0.001和P=0.005)。结论:βcatenin表达水平的异常与胶质瘤细胞周期调节紊乱、增殖指数上升有关,因此可能是控制肿瘤细胞增殖活性的候选基因之一。
- 张志勇浦佩玉康春生裘明哲王广秀贾志凡江荣才
- 关键词：胶质瘤Β-CATENINCYCLIND1增殖细胞核抗原
- RNA干扰敲低Wnt2的表达抑制U251细胞生长的体内外研究被引量：5
- 2010年
- 目的 在体内外研究转染靶向Wnt2的siRNA对U251细胞的抑制效果.方法 向U251细胞转染靶向Wnt2的siRNA后,免疫印记检测转染后Wnt2及相关蛋白表达,MTT检测细胞增殖,annexin标记细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,鼠尾胶3D生长实验检测细胞侵袭能力的变化.建立裸鼠胶质瘤皮下动物模型,瘤内注射Wnt2 siRNA观察肿瘤生长情况.结果 转染Wnt2siRNA后,U251细胞的Wnt2、frizzled2、磷酸化GSK-3β、β-catenin等表达降低,细胞增殖受抑,凋亡率升高,细胞阻滞于G0/G1期.体内研究发现转染靶向Wnt2的siRNA后,裸鼠皮下肿瘤的生长速度缓慢,相应的蛋白表达降低.结论 转染靶向Wnt2的siRNA可有效敲低该基因在U251细胞内的表达,从而抑制了胶质瘤细胞生长,具有潜在的治疗前景.
- 张志勇裘明哲浦佩玉康春生王广秀贾志凡于士柱江荣才
- 关键词：神经胶质瘤RNA干扰
- Notch家族成员在星形细胞瘤及髓母细胞瘤中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的检测Notch家族成员Notchl-4蛋白在人脑星形细胞瘤及髓母细胞瘤中的表达，探讨其在肿瘤生成中的作用。方法应用组织芯片免疫组化染色及WesternBlot检测正常脑组织、不同级别大脑星形细胞瘤、小脑髓母细胞瘤中Notch1、2、3、4蛋白的表达。结果正常脑组织中Notch1、2、3、4蛋白均无表达；星形细胞瘤中Notch1、3、4蛋白的阳性表达率及表达强度随肿瘤病理级别的增高而增高，Notch2无表达；髓母细胞瘤中Notch1、3、4低或无表达，Notch2呈高表达。结论Notch1、2、3、4在星形细胞瘤及髓母细胞瘤中表达有所差异，可能与Notch家族成员在脑发育过程中的作用不同有关。
- 许鹏浦佩玉康春生贾志凡张安玲韩磊王广秀
- 关键词：星形细胞瘤髓母细胞瘤
- 胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达下调PI3K/AKT信号通路的体内外研究
- 2013年
- 目的:研究人脑胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达对PI3K/AKT信号通路的影响。方法:向U251细胞转染靶向Wnt2的siRNA后,免疫印记及免疫荧光检测转染后,Wnt2、Frizzled2、β-catenin、PI3K、磷酸化AKT的表达变化。建立裸鼠胶质瘤皮下动物模型,瘤内注射Wnt2siRNA观察以上指标的表达变化。结果:体外应用RNA干扰敲低Wnt2的表达后,frizzled2、β-catenin、PI3K、p-AKT的表达均下调。结论:胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低Wnt2的表达后,PI3K/AKT信号通路活性受到抑制。
- 张志勇张晋霞李绍彩秦丽娟浦佩玉裘明哲江荣才
- 关键词：胶质瘤FRIZZLED磷酸化AKT
- 靶向表皮生长因子受体的小分子RNA干扰抑制人脑胶质瘤Notch1表达的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨RNA干扰表皮生长因子受体后Notch1在人脑胶质瘤中的表达变化。方法应用免疫组织化学方法检测不同级别脑胶质瘤组织标本中Notch1的表达水平,并进行相关分析。选择人表皮生长因子受体的两个RNA干扰靶序列构建靶向表皮生长因子受体的RNA干扰表达质粒,进行脂质体介导的TJ905人脑恶性胶质瘤细胞系表达;应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应仪观察RNA干扰表皮生长因子受体后TJ905人脑恶性胶质瘤细胞系Notch1的表达变化。结果免疫组织化学检测显示,在不同级别胶质瘤组织标本中Notch1的阳性表达率分别为Ⅳ级93.33%(14/15);Ⅲ级92.31%(12/13);Ⅱ级68.42%(13/19)。Ⅱ级阳性表达程度较Ⅲ、Ⅳ级弱,组间差异有高度统计学意义(H=6.944,P<0.01),提示高级别胶质瘤Notch1阳性表达率高于低级别。RNA干扰表皮生长因子受体后,Notch1在TJ905胶质母细胞瘤细胞系中的表达下降(F=578.728,P<0.01):TJ905组与TJ905+空载组相比,差异无统计学意义(P>0.05);TJ905+空载组与TJ905+516组相比,差异有统计学意义(q=6.359,P<0.05);TJ905+516组与TJ905+2400组比较,差异有统计学意义(q=4.501,P<0.05);TJ905组与TJ905+2400组相比差异亦有统计学意义(q=10.015,P<0.05)。责任基因相对表达量,TJ905组和TJ905+空载组均为2.48×10-5,TJ905+516组为6.64×10-6,TJ905+2400组为2.08×10-7。结论表皮生长因子受体与Notch1关系密切,对二者关系的进一步研究可为胶质瘤的基因治疗提供新的思路。
- 裘明哲浦佩玉康春生张志勇王广秀贾志凡江荣才
- 关键词：脑肿瘤神经胶质瘤
