国家自然科学基金(30300363)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：贺民毛伯镛高乃康郑煜王东军更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院内蒙古医学院附属医院四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠胚胎脑皮层神经干细胞的分离和培养被引量：4
- 2005年
- 目的探讨分离、培养、纯化大鼠胚胎神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的最佳条件,以获得充足的神经干细胞来源,用于中枢神经系统疾病的治疗。方法分离孕13～15d胎鼠大脑皮层,在无血清含神经生长因子N2培养液中培养,利用有限稀释法单克隆培养和改良法连续传代纯化并扩增NSCs,免疫组织化学法对NSCs及分化细胞进行鉴定。结果可以通过体外培养获得大量神经源性干细胞,在体外经多次传代后仍具有很强的增殖能力和多向分化潜能。结论NSCs的存活和分裂依赖于神经生长因子和N2添加剂的浓度,胚胎脑组织和神经球分离方法影响NSCs的形成速度和数量。掌握NSCs的体外纯化培养和鉴定手段可为进一步研究NSCs生物学特性及神经系统损伤的治疗提供新方法。
- 高乃康贺民毛伯镛
- 关键词：神经干细胞纯化增殖
- 腺病毒介导绿色荧光蛋白转染神经干细胞的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的:研究复制缺陷型腺病毒(replication deficient adenoviral vectors,AdVec)介导外源基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)感染体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)表达的可行性及感染效率,探讨EGFP作为NSCs示踪剂的可行性。方法:体外原代培养、扩增大鼠NSCs,扩增、纯化AdVec-EGFP病毒液,以AdVec-EGFP病毒液感染NSCs,荧光显微镜观察AdVec-EGFP在NSCs中的表达和转染效率,免疫细胞化学鉴定重组子。结果:EGFP报告基因AdVec-EGFP高效感染NSCs,转染后6 h荧光蛋白开始表达,48 h后达高峰,感染率为(76±2)%,且NSCs的生物学性状没有发生变化。结论:AdVec-EGFP具有较高的介导外源基因表达于NSCs的效率,是NSCs体内、体外研究较理想的示踪剂。
- 王东军郑煜贺民毛伯镛
- 关键词：神经干细胞腺病毒科绿色荧光蛋白质类动物实验
