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浙江省科技计划项目(2008C130292)
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冯玲芳
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Caveolin-1在超微细炭黑颗粒入胞途径中的作用
2013年
目的探讨超微细炭黑颗粒(Carbonblack nanoparticles,CBNPs)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)Caveolin-1蛋白的表达的影响及其在人胞过程中的作用。方法A549细胞接受0、25、50、100、200、400μg/mlCBNPs染毒24h,以台盼蓝染色法检测CBNPs对细胞活性的影响;0、25、50、100μg/mlCBNPs染毒A549细胞24h,应用流式细胞术细胞检测侧向角散射参数(sidescatter,SSC)变化,用透射电镜观察细胞形态学变化;采用免疫蛋白印迹法(Westernblot)检测CBNPs对细胞Caveolin-1蛋白表达水平的影响。A549细胞接受1μg/mlFilipin及100Ixg/mlCBNPs共同处理24h,观察细胞SSC的变化。结果与对照组比较,200和400μg/ml剂量组细胞存活率分别下降38.2%和46.6%,差异有统计学意义(P〈0.05),25、50和100μg/ml剂量组细胞活性无明显降低,差异无统计学意义(P〉0.05)。50、100μg/ml剂量组细胞Caveolin-1蛋白表达水平较对照组明显增加,差异有统计学意义(P〈0.05)。透射电镜结果显示,50和100μg/ml处理组细胞胞浆出现质膜囊泡,内含黑色颗粒状物质。流式细胞术检测结果显示,随着cBNPs染毒剂量(0.100μg/ml)的增加,细胞SSC比值由1.007升至1.331;1μg/mlFilipin+100μg/mlCBNPs剂量组细胞SSC比值由1.331降至1.25。结论A549能胞吞超微细炭黑颗粒,但Caveolin依赖性胞吞机制在介导超微细炭黑颗粒胞吞过程中不起主要作用。
余珉
陈日萍
贾振宇
陈钧强
蒋兆强
冯玲芳
张幸
关键词:
肺泡
上皮细胞
CAVEOLIN-1
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