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国防基础科研计划(2003044): 作品数：14 被引量：48H指数：4; 相关作者：吴士良沈国良陆兴安王修珍仇灏更多>>; 相关机构：苏州大学更多>>; 发文基金：国防基础科研计划江苏省高校自然科学研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

大鼠急性β射线皮肤损伤动物模型的建立与应用被引量：12: 2006年; 目的建立大鼠急性β射线皮肤损伤动物模型,并用此模型研究超氧化物歧化酶(SOD)对创面愈合作用。方法雄性SD大鼠40只,随机分为2组,每组20只。治疗组:45Gyβ射线照射SOD治疗;对照组:45Gyβ射线照射生理盐水对照。采用直线加速器产生的β射线照射大鼠臀部皮肤20mm×40mm。观察创面出现及愈合的时间。光镜及免疫组织化学检查β射线皮肤损伤创面愈合过程中组织学改变及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的变化。结果45Gyβ射线照射后出现典型深Ⅱ度烧伤创面。SOD治疗组创面愈合速度明显比生理盐水对照组快(P<0·05)。β射线照射后第6、7、8周时,治疗组与对照组免疫组织化学VEGF、bFGF表达分别为强阳性和阳性。β射线照射后第4、5、9周时,2组表达均为弱阳性。结论采用直线加速器产生β射线照射建立急性β射线皮肤损伤动物模型简便、快速,剂量准确、可靠,是研究外用药促进急性β射线皮肤损伤创面愈合的较理想动物模型,SOD具有促进急性β射线皮肤损伤创面愈合的作用。; 沈国良陆兴安唐俊王修珍吴士良田野; 关键词：Β射线放射性皮肤损伤创面愈合动物模型超氧化物歧化酶

不同肿瘤细胞株三种糖基转移酶家族的差异表达谱研究被引量：2: 2006年; 目的采用低密度cDNA表达阵列研究人不同肿瘤细胞中的糖基转移酶基因家族的表达谱差异。方法TOPO-TA克隆获得硫酸基(磺基)转移酶、半乳糖基转移酶和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶三种糖基转移酶基因家族的cDNA文库,PCR获得目的基因,逆转录标记不同肿瘤细胞株的cDNA探针,化学发光法表达阵列对人不同肿瘤细胞进行表达谱分析。结果建立了硫酸基(磺基)转移酶、半乳糖基转移酶和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶三种糖基转移酶家族的cDNA文库,并制成低密度cDNA表达阵列。通过阵列分析发现:在不同肿瘤细胞中,除SHG44和PC12等神经细胞未检出I-GlcNAc6ST表达外,其余几种肺癌、胃癌和白血病肿瘤细胞株中均有高水平的表达;其它糖基转移酶在不同的肿瘤细胞中也存在差异表达,与目前文献报道的肿瘤细胞的糖基化特征基本一致。结论在不同肿瘤细胞中,糖基转移酶基因家族表达谱有差异,特别是磺基转移酶I-GlcNAc6ST高水平表达更值得关注,其表达差异可能与肿瘤的发生、发展有着一定的相关性。; 邵雪君吴士良金美芳; 关键词：糖基转移酶 CDNA文库

大鼠皮肤β射线损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶9的表达被引量：4: 2007年; 皮肤β射线损伤创面难以愈合，晚期易恶变，其具体机制不明。笔者采用直线加速器建立大鼠深Ⅱ度急性β射线皮肤损伤模型，检测创面愈合过程中基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA和蛋白表达的变化，探讨成纤维细胞生长因子2（FGF2）对该创面愈合的影响。; 沈国良陆兴安唐俊王修珍吴士良; 关键词：基质金属蛋白酶9 愈合过程成纤维细胞生长因子

γ射线和紫外线照射对白血病K_(562)细胞株中ppGalNAcT2 mRNA表达的影响: 2004年; 观察了γ射线、紫外线对白血病细胞株K562中多肽:N?乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,初步探讨ppGalNAcT2与肿瘤发生、发展的相关性。以不同剂量的Coγ60射线、紫外线分别照射K562细胞,继续培养12h后将细胞收集,采用逆转录PCR(RT?PCR)法检测ppGalNAcT2mRNA的表达差异变化。结果显示,γ射线、紫外线照射均可抑制白血病细胞ppGalNAcT2在mRNA水平的表达,提示此两种辐照可能与肿瘤细胞受照射后的浸润和转移性能有关,ppGalNAcT2与此性状间有一定的相关性。; 范雁吴士良徐岚陈克平仇灏; 关键词：Γ射线紫外线多肽

人多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)RNA干扰载体的构建及鉴定被引量：2: 2007年; 目的:构建稳定的转染人多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)基因的RNA i载体。方法:遵循RNA干扰目标序列的选取原则,对ppGalNAc-T2基因mRNA序列设计五条可能的小干扰RNA(siRNA),PCR方法扩增得到siRNA内源表达系统,转染至人胃癌细胞株SGC7901,运用RT-PCR方法检测筛选得到其中能高效引起ppGal-NAc-T2基因表达沉默的siRNA;化学合成带荧光标记的该段RNA O ligo,转染细胞并用荧光显微镜观察转染情况,进一步鉴定该siRNA对ppGalNAc-T2的抑制作用;构建ppGalNAc-T2的RNA干扰真核表达载体,酶切及测序鉴定后转染SGC7901细胞并经G418筛选得到稳定的ppGalNAc-T2基因敲减细胞株,RT-PCR方法检测该转染细胞株ppGalNAc-T2表达水平。结果:采用RNA i技术,将高表达ppGalNAc-T2的SGC7901细胞的T2表达水平明显降低。结论:成功构建稳定的ppGalNAc-T2基因敲减细胞株,为今后进一步深入研究ppGalNAc-T2的生物学功能奠定了基础。; 仇灏刘可人朱琍燕吴士良; 关键词：多肽 RNAI SGC7901细胞

大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中PDGF及其受体的表达被引量：3: 2010年; 目的研究血小板源性生长因子A(PDGF-A)及其受体(PDGFR-α)在大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中的变化。方法雌性SD大鼠54只,随机分为3组:照射组(n=24),直线加速器产生的β射线(45Gy)单次照射大鼠臀部皮肤20mm×40mm,建立急性深Ⅱ°β射线皮肤损伤动物模型;烫伤组(n=24),以直径为25mm的恒温电烙铁,温度80℃,时间8s,建立大鼠深Ⅱ°热力烫伤动物模型;对照组(n=6),正常大鼠。采用免疫组织化学观察创面出现后0、1、2、3、4、8周各组大鼠创面组织中PDGF-A/PDGFR-α表达。结果照射组大鼠创面出现后1、2、3周创面组织中PDGF-A和PDGFR-α表达均为阳性,0、4、8周表达为弱阳性。烫伤组烫伤后2周创面组织中PDGF-A和PDGFR-α表达均为强阳性,0、1、3周表达为阳性,4、8周表达为弱阳性。对照组大鼠正常皮肤中PDGF-A及PDGFR-α表达为弱阳性。结论急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中PDGF-A及其受体PDGFR-α表达减弱,并持续低表达,不能形成峰值,可能是急性β射线皮肤损伤创面难愈合的机制之一。; 沈国良孙峰陆兴安王修珍; 关键词：Β射线放射性皮肤损伤

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2真核表达载体的构建及在SHG-44细胞的表达被引量：2: 2004年; 目的 :为探讨O 糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能 ,构建pcDNA3/ppGalNAc T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4。方法 :采用PCR技术从pDONR2 0 1 T2得到ppGalNAc T2全长编码序列 ,亚克隆至真核表达载体pcDNA 3 1,脂质体介导基因转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4细胞 ,采用RT PCR法检测重组质粒的表达。结果 :酶切图谱分析和基因测序证实pcDNA3 1 T2真核表达质粒构建成功。RT PCR显示转染细胞有T2的表达。结论 :成功构建了真核表达载体pcDNA3 1 T2 ,并成功转染入SHG 4 4细胞 ,为进一步研究ppGalNAcT2的功能奠定了基础。; 金美芳潘浩郭向红仇灏吴士良; 关键词：神经胶质瘤细胞真核表达载体肿瘤发展肿瘤转移

大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2的表达被引量：6: 2006年; 目的研究急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA和蛋白表达的变化,探讨表皮细胞生长因子(EGF)在急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中的作用。方法雄性SD大鼠60只,随机均分为3组。A组15Gyβ射线照射组;B组45Gyβ射线照射EGF治疗组;C组45Gyβ射线照射生理盐水对照组。采用直线加速器产生的β射线照射大鼠臀部皮肤,面积20mm×40mm。观察创面出现及愈合的时间;光镜观查创面愈合过程中组织学改变;以RT-PCR法和Westernblot法检测创面愈合过程中MMP-2mRNA和蛋白表达的变化。结果A组未形成创面,B组和C组出现深Ⅱ度烧伤创面。B组创面愈合速度明显比C组快(P<0.05)。A组5、6、8周时MMP-2的表达逐步减弱,B组和C组5、6、8、10周时MMP-2的表达由强到弱,而后由弱到强;B组在6、8周时MMP-2的表达均高于C组。结论EGF在β射线皮肤损伤创面愈合过程中起重要作用,EGF可促进MMP-2的表达与合成,从而促进创面愈合。; 沈国良陆兴安唐俊王修珍吴士良田野; 关键词：Β射线放射性皮肤损伤基质金属蛋白酶2 表皮细胞生长因子

高能电子射线局部外照射致皮肤损伤的实验研究被引量：2: 2005年; 王修珍陆兴安邓海珍彭淼吴士良; 关键词：外照射皮肤损伤水合氯醛雄性大鼠实验动物中心近交系

茯苓多糖对受照射白血病K562细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9和自由基等的影响被引量：9: 2005年; 目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表达、自由基活力以及细胞周期的影响。结果茯苓多糖可使经γ射线照射后的K562细胞中的自由基增多、ppFalNAc-T9表达增高、G_1期受阻明显。结论茯苓多糖对肿瘤细胞中自由基具有一定的清除作用,同时还可以增加ppGalNAc-T9在mRNA水平的表达。; 刘可人杨雪枫吴士良范雁徐爱华; 关键词：茯苓多糖 RT-PCR 多肽自由基细胞周期

国防基础科研计划(2003044)

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