天津市自然科学基金(033801611)
- 作品数：7 被引量：34H指数：3
- 相关作者：梁东春张镜宇郭刚左爱军孙蓓更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津医科大学代谢病医院天津市内分泌研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- IGF-1对去卵巢大鼠骨密度及骨力学强度的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究外源性胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对去卵巢（OVX）骨质疏松大鼠骨密度、骨转换率、骨力学强度等方面的影响。方法对大鼠施行双侧卵巢摘除术，术后3个月以骨密度测定证实骨质疏松的存在后，随机分为5组，分别以生理盐水、甲状旁腺激素1—34及3种不同剂量IGF-1进行干预。同时设立生理盐水干预的假手术大鼠作为对照。8周后检测血清钙、磷、骨钙素水平及碱性磷酸酶活性；测定腰椎骨密度、股骨力学强度；组织学染色测定股骨远端骨皮质厚度。结果IGF-1虽未提高OVX大鼠腰椎骨密度却可以显著提高其股骨力学强度。血清学检测结果表明，IGF-1可降低血清钙、磷、骨钙素水平及碱性磷酸酶活性；组织学染色显示IGF-1可显著提高OVX大鼠股骨骨皮质厚度。结论IGF-1可增加OVX大鼠股骨的力学强度，此作用可能是通过改善骨结构而非提高骨密度所实现的。
- 赵荣兰刘新宇孙蓓梁东春郭刚张镜宇
- 关键词：胰岛素样生长因子-1骨质疏松骨密度骨结构
- rhIGF-1对神经细胞缺血再灌注损伤的保护作用被引量：4
- 2007年
- 目的:研究重组人胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)对缺血再灌注所致神经细胞损伤的保护作用。方法:自新生大鼠脑组织中分离培养原代神经细胞,3H-TdR掺入法检测rhIGF-1对神经细胞增殖的影响。将所培养的细胞分为正常对照组、类缺血对照组及损伤后rhIGF-1干预组,对不同组别的细胞进行类缺血-复氧处理,流式细胞检测细胞凋亡情况。结果:rhIGF-1可明显促进原代培养的神经细胞增殖,并降低再灌注损伤所导致的细胞凋亡。结论:rhIGF-1对神经细胞缺血再灌注损伤具有保护及治疗作用。
- 刘国萍郭洁黄维惠汪志云梁东春
- 关键词：神经元细胞再灌注损伤细胞凋亡
- 多肽的电泳分离被引量：16
- 2004年
- 目的 :对4种PAGE方法进行比较 ,选择出适用于分离小分子质量多肽的电泳方法。方法 :用常规SDS_PAGE、低分子质量Tricine_SDS_PAGE、多肽SDS_PAGE以及含尿素的多肽SDS -PAGE4种方法对相同的样品进行电泳分离 ,并对分离效果进行比较。结果 :常规SDS_PAGE不适合分离小分子质量多肽 ,Tricine_SDS_PAGE对分子质量小于10ku的样品效果不佳。多肽SDS_PAGE能分离分子质量在5～20ku的多肽 ,含尿素的多肽SDS_PAGE对分子质量小于5.0ku的多肽也能很好的分离。结论 :含尿素的多肽SDS_PAGE对小分子质量多肽的分离效果最好 ,可根据实验的需要选择适合的电泳方式。
- 左爱军梁东春郭刚王宝利张镜宇
- 关键词：多肽SDS-PAGE电泳分离小分子低分子分子质量
- 大肠杆菌偏嗜性人胰岛素样生长因子1基因的克隆及表达被引量：3
- 2006年
- 目的:提高以大肠杆菌为工程菌制备重组人胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)的产率。方法:依据大肠杆菌遗传密码子使用频率表,人工合成3条DNA单链,PCR拼接扩增出适于在大肠杆菌中表达的人IGF-1基因。将此基因克隆入pGEM-T载体进行DNA序列分析后亚克隆入表达载体pBV220,诱导表达,表达产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,酶联免疫分析(ELISA)检测表达产物中rhIGF-1的含量。结果:经基因改造后,rhIGF-1主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中,其产率较改造前提高近4倍。结论:所构建的大肠杆菌偏嗜性人IGF-1基因可显著提高rhIGF-1的产率。
- 梁东春左爱军郭刚张镜宇
- 关键词：大肠杆菌基因表达
- 重组人胰岛素样生长因子-1对db/db小鼠应激性血糖升高的保护作用被引量：1
- 2011年
- 目的:研究重组人胰岛素样生长因子(rhIGF)-1对2型糖尿病(T2DM)伴胰岛素抵抗(IR)小鼠应激性血糖升高的治疗作用。方法:以瘦素受体基因缺陷型db/db小鼠为动物模型,电脉冲刺激诱发应激性高血糖。给予高剂量胰岛素或rhIGF-1进行干预,观察血糖的变化情况。Real time-PCR及Western blot分别检测骨骼肌组织内GLUT4基因的表达水平及GLUT4蛋白含量。结果:在8周龄时瘦素受体基因缺陷的db/db小鼠表现出了明显的肥胖、高血糖及高胰岛素血症。应激后组间血糖水平的差异有统计学意义(F组间=48.915,P<0.05),组内不同时间点血糖水平差异无统计学意义(F时间=1.295,P>0.05),组间和时间无交互效应(F交互=1.046,P>0.05)。采取干预措施后,组间血糖水平差异有统计学意义(F组间=36.947,P<0.05),不同时间点血糖水平差异有统计学意义(F时间=13.880,P<0.05),且组间和时间存在交互效应(F交互=11.769,P<0.05)。IGF-1可显著增加db/db小鼠骨骼肌组织中GLUT4基因的表达及GLUT4蛋白在细胞膜中的含量。结论:rhIGF-1对T2DM小鼠被诱发的应激性高血糖具有较胰岛素更好的控制作用,此作用可能是因骨骼肌细胞中GLUT4的表达及转位增加所致。
- 孔繁强周树民赵荣兰孙蓓梁东春
- 关键词：基因缺失胰岛素抗药性葡萄糖转运体4型小鼠血糖
- 重组人胰岛素样生长因子1对db／db小鼠血糖的影响
- 2009年
- 目的:研究重组人胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)对近似于人类2型糖尿病的db/db小鼠的降血糖作用。方法:正常饲养db/db及同品系的正常小鼠,定期监测血糖和血胰岛素水平。待db/db小鼠表现出明显的高血糖及高胰岛素血症后随机分为4组,每日皮下注射溶媒、胰岛素或不同剂量的rhIGF-1,共2周。首次给药后每30min测定血糖1次,观测不同干预方式的即时降糖效果。再于每次给药前测定血糖,观察2周内的变化趋势。结果:db/db小鼠饲养至8周龄时表现出明显的血糖升高及高胰岛素血症。所用剂量的胰岛素对db/db小鼠未表现出明显的降血糖作用;rhIGF-1特别是高剂量rhIGF-1的即时及短期降糖效果均较明显,可有效保护db/db小鼠。结论:rhIGF-1对db/db小鼠有较好的降血糖作用,对伴有明显胰岛素抵抗的糖尿病患者具有临床应用前景。
- 周亮崔岚梁东春
- 关键词：血糖胰岛素抗药性小鼠
- 重组人胰岛素样生长因子1的制备被引量：11
- 2005年
- 目的:建立人胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF-1的初步纯化方法。方法:将人IGF-1基因克隆入原核表达质粒载体pBV220,重组质粒转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达,WesternBlot对表达产物进行鉴定。超滤离心纯化rhIGF-1,纯化产物行高效液相色谱分析。H3-TdR掺入法测定所制备rhIGF-1的促细胞增殖活性。结果:成功构建了重组质粒pBV-IGF-1,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期7.5ku大小相符的蛋白条带,WesternBlot证实该条带即为rhIGF-1。超滤离心一步纯化后rhIGF-1纯度即可达95%以上。H3-TdR结果显示,所制备的rhIGF-1可促进体外培养成肌细胞增殖。结论:成功建立了rhIGF-1的制备及纯化方法,表达产物经体外试验证实具有促细胞增殖的生物活性。
- 梁东春左爱军吴亚锋郭刚张镜宇
- 关键词：人胰岛素样生长因子1PBV220细胞增殖活性BLOTDH5Α质粒转化
