国家自然科学基金(81173287)
- 作品数：9 被引量：34H指数：4
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- 通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢P-Smad3表达水平影响研究被引量：3
- 2014年
- 目的在前期研究的基础上,探讨以"补肾调冲法"立法的通脉大生片对大鼠卵巢TGF-β/Smads信号转导通路的调控作用,探索中医补肾调冲法促卵泡发育的机制,从而为补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕提供科学依据。方法选取9日龄SD大鼠,通过给予颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型,根据大鼠阴道脱落细胞涂片的表现,筛选出造模成功的大鼠,随机分为6个组,分别为模型组、通脉大生片高剂量组(简称通高组)、通脉大生片中剂量组(简称通中组)、通脉大生片低剂量组(简称通低组)、来曲唑组(LE)、右归丸组,另设正常组,于大鼠第80日龄,分别给予相应药物进行干预,连续干预5周后股动脉取血并处死动物,迅速剥离大鼠卵巢,每组选取三只大鼠的卵巢组织,立即置于Eppendorf管中,储存于液氮中以备检测。采用免疫印迹法,检测各组大鼠卵巢P-Smad3的表达水平。结果与模型组相比,正常组、通高组、来曲唑组、右归丸组大鼠卵巢P-Smad3的表达水平较高,差异有显著意义(P<0.01),通低组、通中组的P-Smad3水平亦有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);通脉大生片各剂量组中,通高组升高P-Smad3水平的效果明显高于通中组、通低组。结论通脉大生片可以提高肾虚排卵障碍性不孕大鼠P-smad3的表达水平,进而改善卵巢局部的微环境,以促进卵泡的生长、发育和促进成熟卵泡破裂及卵子的排出,从而达到治疗肾虚排卵障碍性不孕的作用。
- 黄金珠黄昕傅春华
- 关键词：补肾调冲法肾虚
- 通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β1表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:探索通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β1的影响。方法:取原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞,随机分为自然生长对照组、通脉大生片高剂量组(通高组)、通脉大生片中剂量组(通中组)、通脉大生片低剂量组(通低组)、FSH组,分别于细胞生长对数期给药,取给药后1h、2h、6h、12h、24h、48h的细胞培养上清液,用酶联免疫法检测上清液中TGF-β1的表达量。结果:自然生长对照组各时间点的TGF-β1的表达量无明显变化,通高组、通中组、通低组于给药12h时TGF-β1的表达量达高峰,随后开始下降,48h降到最低,FSH组于给药2h后TGF-β1的表达量达高峰,随后开始下降,48h降到最低。结论:通脉大生片可能是通过增加TGF-β1的表达量来促进卵泡发育,以达到治疗排卵障碍性不孕的目的。
- 薛利琴黄金珠黄昕马彦傅春华
- 关键词：卵巢颗粒细胞TGF-Β1
- TGF-β_1R在通脉大生片作用下的大鼠卵巢颗粒细胞中的表达被引量：5
- 2013年
- 目的探索TGF-β1R在通脉大生片作用下的离体大鼠卵巢颗粒细胞中的表达。方法将培养的原代大鼠卵巢颗粒细胞,随机分为自然生长对照组、通脉大生片高剂量组、通脉大生片中剂量组、通脉大生片低剂量组、FSH组,分别在细胞生长对数期给药,取给药后的细胞培养上清液,用酶联免疫法检测上清液中TGF-β1R的表达量。结果自然生长组各时间点的TGF-β1R的表达量无明显变化,通高组、通中组、通低组于给药12 h时TGF-β1R的表达量达高峰,48 h降到最低,FSH组于给药2 h后TGF-β1R的表达量达高峰,48 h降到最低。结论通脉大生片可增加TGF-β1R的表达量,进而揭示通脉大生片通过可能通过TGF-β/smad信号通路来调节卵泡的发育和排卵。
- 黄昕傅春华黄金珠薛丽琴马彦向宗兴
- 关键词：不孕症卵巢颗粒细胞
- 通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫组织形态学的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察以"通补法"立法的通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫组织形态学的变化,探讨通补法治疗肾虚排卵障碍不孕的机制。方法建立肾虚排卵障碍不孕大鼠模型,根据大鼠阴道涂片的结果,筛选造模成功大鼠,随机分为6组,分别为模型组,通脉大生片高剂量组(简称通高组),通脉大生片中剂量组(简称通中组),通脉大生片低剂量组(简称通低组),右归丸组,来曲唑组,另设正常组,于大鼠第80日龄,对各组大鼠分别进行相应药物干预,灌胃5周后处死动物,取子宫组织制成病理切片,在光镜和电镜下观察。结果光镜和电镜下,通脉大生片各组大鼠与模型组大鼠比较,子宫有不同程度的恢复(P<0.05),通高组效果最好,与正常组比较,结果无差异(P>0.05)。结论通脉大生片对促进肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫的发育作用是肯定的,其组织形态学变化为通脉大生片治疗肾虚排卵障碍不孕症提供了客观基础和理论支持。
- 宋帮丽傅春华赵毅黄丽华杨艳艳
- 关键词：肾虚排卵障碍不孕子宫组织形态学
- 通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢指数和FSHR mRNA表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨以"补肾调冲法"立法的通脉大生片对排卵障碍型不孕(ASR)大鼠卵巢FSHR mRNA表达的调节作用。方法:选取9日龄SD大鼠,给予颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚ASR大鼠模型,根据大鼠阴道涂片结果筛选造模成功大鼠,随机分组。灌胃5周后处死,取卵巢,计算卵巢指数。荧光定量RT-PCR检测计算各组大鼠卵巢FSHR mRNA表达量。结果:与正常组FSHR mRNA表达量比较,模型组降低且差异有统计学意义(P<0.05);与模型组FSHR mRNA表达量比较,通高组、右归丸组上调,差异有统计学意义(P<0.05),通中组、来曲唑组均上调,差异有显著统计学意义(P<0.01),通低组升高,差异无明显统计学意义(P>0.05);通高、中组FSHR mRNA表达量上调幅度明显高于通低组,尤以通中组最显著。结论:通脉大生片可治疗肾虚排卵障碍型不孕,其机制与调节FSHR mRNA的表达水平,提高卵巢反应性有关。
- 温莹莹傅春华弓丽华黄金珠周昕
- 关键词：排卵障碍FSHR
- 通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢Smad4表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察通脉大生片对大鼠卵巢形态学改变及信号蛋白Smad4在TGF-β/smads通路中的表达变化及意义。方法建立大鼠肾虚排卵障碍不孕(ASR)模型,通过阴道涂片筛选造模成功大鼠后分组用药5周后,处死大鼠,HE染色观察形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠卵巢中Smad4蛋白的表达量。结果 1各用药组从卵巢形态学上明显恢复的趋势,镜下可见成熟卵泡和黄体。2与模型组相比,通脉大生片高、中、低剂量组及阳性对照组大鼠卵巢Smad4的表达水平升高(P<0.05),以高剂量组及来曲唑组最明显。结论通脉大生片可用于治疗肾虚排卵障碍型不孕,而其促排卵作用可能部分是通过调节Smad4的表达,进而调控卵巢TGF-β/smads信号通路的激活来实现的。
- 周昕傅春华黄金珠黄昕温莹莹弓丽华
- 关键词：卵巢颗粒细胞SMAD4
- 通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响被引量：6
- 2015年
- 目的在前期实验的基础上探讨通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)卵巢颗粒细胞超微结构的影响。方法选取9日龄SD大鼠,通过颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型,根据大鼠阴道脱落细胞涂片表现,筛选出造模成功的大鼠并进行分组。于大鼠第80日龄,分别给予相应药物干预,连续5周后股动脉取血处死动物,迅速剥离大鼠两侧卵巢,制成电镜标本,应用透射电镜观察卵巢颗粒细胞的超微结构。结果 (1)正常组卵巢颗粒细胞超微结构表现为:多层卵巢颗粒细胞分布,核圆形,线粒体丰富,可见大量粗面内质网;(2)模型组与正常组、给药各组大鼠卵巢颗粒细胞超微结构有明显差异,表现为细胞核团块状,核糖体丢失,可见凋亡小体,线粒体肿胀,且嵴肿胀。(3)通脉大生片各剂量组中,通高组、通中组与正常组大鼠卵巢颗粒细胞结构较相近,主要表现为成熟卵泡颗粒细胞丰富,多层分布,细胞核呈圆形,核内染色质分布均匀,胞浆内可见丰富的线粒体、粗面内质网,且结构正常,可见丰富的脂滴,细胞膜表面有微绒毛突起;通低组可见卵巢颗粒细胞结构尚可,胞浆内线粒体轻度肿胀,可见少量粗面内质网及少量脂滴。(4)左归丸及来曲唑组卵巢颗粒细胞超微结构表现相似且与正常组结构相近,可见卵巢颗粒细胞,核染色质均匀,胞浆内可见大量线粒体、高尔基复合体,结构良好。结论 (1)通脉大生片能恢复肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞的超微结构。(2)通脉大生片可通过对卵巢颗粒细胞细胞器结构及数目的影响,从而影响卵泡的发育和成熟,发挥促排卵作用。(3)中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕有其现实意义。
- 弓丽华周昕温莹莹黄金珠傅春华
- 关键词：卵巢颗粒细胞超微结构
- 通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢TGF-β1及Smad7表达的影响被引量：13
- 2015年
- 目的:观察通脉大生片对大鼠卵巢TGF-β1、Smad7在TGF-β/smads通路中的表达变化及意义。方法:建立大鼠肾虚排卵障碍不孕(ASR)模型,通过阴道涂片筛选造模成功大鼠后分组用药,采用酶联免疫法(Elisa)法检测TGF-β1的表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠卵巢中Smad7蛋白的表达量。结果:①模型组大鼠卵巢TGF-β1的表达量最低,与正常组、通高组、来曲唑组、右归丸组相比,有统计学差异(P<0.05,P<0.01);通脉大生片组中以通高组最优;②通脉大生片高、中组来曲唑组及右归丸组Smad7表达均低于模型组(P<0.05,P<0.01),以通高组效果最好。结论:通脉大生片可用于治疗肾虚排卵功能障碍型不孕,而其促排卵作用可能部分是通过调节TGF-β/smads信号通路中TGF-β1及Smad7的表达,进而促进排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β/smads信号通路的激活来实现的。
- 黄金珠周昕黄昕温莹莹弓丽华傅春华
- 关键词：TGF-Β1SMAD7
- Smad3在通脉大生片作用后的大鼠卵巢颗粒细胞中的表达
- 2013年
- 目的研究Smad3在通脉大生片作用后的大鼠卵巢颗粒细胞中的表达。方法将培养的原代大鼠卵巢颗粒细胞爬片后,随机分为自然生长对照组、通脉大生片高剂量组、通脉大生片中剂量组、通脉大生片低剂量组、FSH组,分别在细胞生长对数期给药,取给药后的细胞爬片,用免疫组化法检测细胞爬片中Smad3的表达量。结果自然生长对照组各时间点的Smad3的表达量无明显变化,通高组、通中组、通低组给药12h时Smad3核阳性率明显高于给药6h和24h(P<0.05);通中组给药12h时Smad3核阳性率明显高于通高组和通低组12h时Smad3核阳性率,有统计学意义(P<0.05);FSH组给药后1h、2h时Smad3核阳性率明显高于正常组,有统计学意义(P<0.05),FSH组给药后2h时Smad3核阳性率明显高于给药后1h时Smad3核阳性率,有统计学意义(P<0.05)。结论通脉大生片可能是通过增加Smad3的表达量来促进卵泡发育,以达到治疗排卵障碍性不孕的目的 。
- 黄昕傅春华黄金珠薛利琴周昕向宗兴
- 关键词：不孕症SMAD3卵巢颗粒细胞
