国家自然科学基金(30271502) 作品数:8 被引量:121 H指数:6 相关作者: 罗焕敏 肖飞 李晓光 高勤 翁文 更多>> 相关机构: 暨南大学 华东师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省中医药管理局基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
五味子乙素对M146L细胞分泌β淀粉样蛋白的影响 被引量:19 2005年 目的:探讨五味子乙素对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)的影响。方法:体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样前体蛋白(Amyloid beta-protein precursor,APP)基因及突变型早老素1(prsenilin-1,PS1)基因的CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(amyloid β-protein,Aβ_(42)),建立Aβ_(42)过度表达的细胞模型。加入待筛选的药物五味子乙素,用四甲基偶氮唑蓝比色法(microculture tetrazolium assay,MTT法)检测不同浓度的五味子乙素(1.67,5,15μg·mL^(-1))对M146L细胞毒作用,应用ELISA法(enzyme-linked immunosorbent assay)观察细胞分泌的Aβ_(42)的变化。结果:不同浓度的五味子乙素对M146L存活率没有影响,不具有细胞毒作用。5和15μg·mL^(-1)的五味子乙素对细胞分泌的Aβ_(42)有抑制作用,以高剂量组最为明显。结论:一定剂量的五味子乙素对M146L细胞分泌的Aβ_(42)有明显的抑制作用。 肖飞 罗焕敏 李晓光 章佩芬 高勤 翁文关键词:五味子乙素 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 D-半乳糖和三氯化铝诱导小鼠产生类阿尔茨海默病变 被引量:62 2004年 目的 探讨D 半乳糖和三氯化铝 (AlCl3 )联合使用制备阿尔茨海默病动物模型的可能性。方法昆明种小鼠 ,腹腔注射D 半乳糖 (60mg·kg-1 ·d-1 )和灌胃AlCl3 (5mg·kg-1 ·d-1 )每天 1次 ,连续 90d。给药结束后 ,通过Morris水迷宫、生化指标测定、RT PCR及常规HE染色和Aβ1 -4 0 免疫组化染色 ,观察D 半乳糖和AlCl3 对小鼠学习记忆、胆碱能系统及脑内β淀粉样前体蛋白 (APP)、早老素 1 (PS1 )、β位点APP内切酶 (BACE)基因表达的影响 ,并观察海马、皮质的形态学改变。结果 D 半乳糖和AlCl3共同作用导致小鼠学习记忆力减退 ;脑内ACh含量下降 ,AChE活性升高 ;APP ,PS1和BACE基因表达增强 ;海马和皮质老年斑形成。结论 D 半乳糖和AlCl3 联合使用可使小鼠产生类阿尔茨海默病变 ,该方法可用于制备阿尔茨海默病动物模型。 罗焕敏 肖飞关键词:D-半乳糖 三氯化铝 阿尔茨海默病 记忆 动物模型 广东海风藤多糖对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白生成的抑制作用 被引量:9 2009年 目的探讨广东海风藤多糖对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白的影响。方法体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病(AD)β淀粉样前体蛋白(APP)基因及突变型早老素1(PS1)基因的CHO细胞系M146L,使之高效产生β淀粉样蛋白42(Aβ42),建立Aβ42过度表达的细胞模型。加入待筛选的药物广东海风藤多糖,用四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的广东海风藤多糖(0.3125、0.625、1.25μg/ml)对M146L细胞的毒性作用,应用酶联免疫法(ELISA)观察细胞分泌的Aβ42的变化。结果不同浓度的广东海风藤多糖对M146L存活率没有影响,不具有细胞毒作用。0.625、1.25μg/ml的广东海风藤多糖对M146L细胞分泌Aβ42有抑制作用,呈剂量依赖性。结论一定剂量的广东海风藤多糖对M146L细胞分泌的Aβ42有明显的抑制作用,其机制有待进一步研究。 肖飞 李晓光 高勤 罗焕敏关键词:阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 分泌酶抑制剂 RNA干扰对老年性痴呆症的治疗机制研究 被引量:3 2005年 Alzheimer’s disease is a neurodengenerative disorder disease with the progressive cognition malfunction and memory impairmen t. This article analyze the biochemical cause of Alzheimer’s disease and eval uate the current status of drug therapy for the disease, and predict the possi bili ty of RNA interference in the therapy of Alzheimer’s disease. 罗焕敏 邓惠 黄丰关键词:阿尔茨海默病 RNA干扰 阿尔茨海默病治疗新途径——抑制β淀粉样蛋白聚集及纤维化 被引量:9 2004年 目的综述目前国内外在体外、体内实验中已发现的有效抑制β淀粉样蛋白聚集及减少其毒性的多种物质。方法查阅国内外近年来相关的资料文献分析评述。结果与结论在体外和/或体内实验中,四环素、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、β片层阻断肽、植物提取成分TA9001等物质能有效抑制Aβ聚集并减少神经毒性的药物,为阿尔茨海默病治疗药物的开发应用提供依据。 谷峰 罗焕敏关键词:Β淀粉样蛋白 阿尔茨海默病 药物 五味子醇甲对β-淀粉样蛋白损伤PC12细胞的预保护及治疗作用 被引量:12 2010年 目的:研究五味子醇甲对β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)损伤大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12细胞)的预保护及治疗作用。方法:体外培养PC12细胞,建立Aβ引起的细胞损伤模型;采用细胞形态学观察突起长度及神经网络的变化,细胞形态学定量测定有突起的细胞数目,MTT法测定细胞活性。结果:细胞形态学、细胞形态学定量和细胞活性测定结果表明,与Aβ模型组比较,五味子醇甲低、中、高剂量(1、3、9μg/mL)组PC12细胞神经突起较长,神经网络破坏的程度较轻,有突起细胞数目增多,细胞活性增高。结论:五味子醇甲具有拮抗Aβ神经毒性的作用,对Aβ损伤PC12细胞具有预保护及治疗作用。 肖飞 翁文 罗焕敏关键词:五味子醇甲 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 PC12细胞 牛膝醇提物对Aβ_(42)聚集的抑制作用 被引量:6 2003年 目的 :观察牛膝醇提物 (Nx E)对Aβ42 聚集的抑制作用。方法 :Aβ42 单独或和Nx E在 37℃ ,5 %CO2 培养箱中孵育后 ,采用硫磺素T(Th T)荧光分析以及透射电镜观察Aβ42 的聚集程度。结果 :1μg·μl 1Aβ42 孵育 7d后荧光强度明显升高 ,电镜观察发现Aβ42 以淀粉样纤维结构为主 ,呈针状聚集 ;低、中、高三个剂量 (7 5、15、30 μg·μl 1)的Nx E与Aβ42 共同孵育 7d后 ,中、高剂量Nx E与Aβ42 的共同孵育产物荧光强度比Aβ42 单独孵育明显减弱 ;形态学观察纤维样结构减少 ,无定形结构增加 ,存在大量散在的颗粒。结论 :1μg·μl 1Aβ42 孵育 7d已“老化” ;15和 30 μg·μl 1的Nx E能在一定程度上抑制Aβ42 聚集。 罗焕敏 谷峰 李晓光关键词:牛膝 醇提物 AΒ42 透射电镜 阿尔茨海默病 D-半乳糖和铝联合应用诱导大脑产生阿尔茨海默病样损伤(英文) 被引量:7 2011年 目的 D-半乳糖能制作亚急性衰老模型,铝具有神经毒性,但两者联合应用的作用未见报道。本研究旨在探讨D-半乳糖和铝联合应用对动物学习记忆、脑内生化和病理的影响,以及与单独应用D-半乳糖或铝所制作的动物模型相比较。方法昆明小鼠单独皮下注射D-半乳糖、单独灌胃铝以及既注射D-半乳糖又灌胃铝,制作动物模型,共给药8周或10周,10周后再停用药物6周。在第8、10、16周末,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,生化学方法检测脑内乙酰胆碱能系统,免疫组化法检测老年斑和神经原纤维缠结的形成。结果联合应用D-半乳糖和铝后,小鼠表现出明显的学习和记忆力障碍,并且其脑内乙酰胆碱水平降低,乙酰胆碱转移酶和胆碱脂酶活性下降,出现老年斑样和神经原纤维缠结样病理改变。停止给药后,其行为学、生化和病理改变至少能维持6周以上。结论小鼠中D-半乳糖和铝联合应用是一个有效的非转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)模型,可用于AD病理研究和相关治疗药物的评价。 肖飞 李晓光 张晓裕 候军代 林炼峰 高勤 罗焕敏关键词:阿尔茨海默病 脑改变 D-半乳糖 铝 神经退行性疾病