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RNAi抑制Wnt1信号通路对人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞增殖抑制的实验研究: 2009年; 目的检测人神经母细胞瘤细胞株SH—SY5Y中Wnt1的表达情况，并通过抑制wnt1基因的表达来干预wnt1信号通路，观察其对神经母细胞瘤增殖的影响，阐明wnt1信号通路与神经母细胞瘤之间的相关性。方法检测人神经母细胞瘤株SH—SY5Y中Wnt1在基因和蛋白水平的表达及细胞内定位情况；将SH—SY5Y细胞分为四组，分别是阴性对照组、空白载体组、非特异性siRNA组和wnt1-siRNA组。用针对Wnt1的特异性siRNA阻断该细胞中Wnt1信号通路的传递，分别检测上述四组细胞中Wnt信号通路中Wht1及β-catenin浓度的变化；显微镜下观察细胞形态、数量的改变；用MTT方法检测肿瘤细胞增殖情况。结果SH—SY5Y中的Wnt1在mRNA转录水平以及蛋白水平均有表达，且位于细胞浆内。采用Wnt1的特异性siRNA技术干预细胞后，Wntl特异性siRNA干预组中Wnt1蛋白的表达较阴性对照组、空白载体组及非特异性siRNA组明显下降（P〈0．01），其下游通路中的关键蛋白β-catenin的表达同样明显下降（P〈0．01）；光学显微镜下发现特异性干预组中细胞明显较其他三组少，死亡漂浮的细胞较多，细胞突触减少；MTT结果提示，Wnt1基因表达被抑制后，SH—SY5Y细胞的增殖率明显下降（P〈0．01）。结论Wnt1在人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y中呈阳性表达；阻断Wnt1信号通路可以抑制人神经母细胞瘤细胞株SH—SY5Y的增殖。Wnt1信号通路可能是影响神经母细胞瘤增殖的重要通路。; 张立洪李凯吕志葆肖现民郑继翠; 关键词：神经母细胞瘤 SIRNA Β-CATENIN

Wnt1信号通路蛋白分子在肾上腺及神经母细胞瘤组织中表达的研究: 2010年; 目的观察新生儿肾上腺、〉2岁小儿肾上腺和神经母细胞瘤组织中经典Wnt信号通路中Wnt1、β-catenin和CyclinD1的表达，探讨Wnt1信号通路调控异常与神经母细胞瘤的相关性。方法应用免疫组化方法检测新生儿肾上腺、〉2岁小儿肾上腺及各期、各病理类型、化疗前后神经母细胞瘤组织中Wnt1信号通路中Wnt1、6-catenin和CycinD1的表达。结果术前未化疗的肿瘤Wnt1和β-catenin蛋白表达明显强于新生儿。肾上腺组织，后者又明显强于〉2岁小儿肾上腺（P=0．014），差别均具有高度的统计学意义；Ⅲ～Ⅳ期肿瘤的Wnt1和β-catenin蛋白表达较Ⅰ～Ⅱ期肿瘤高；Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中术前未化疗的wnt1和β-catenin蛋白表达明显高于术前化疗的肿瘤；组织预后不良型（UH）肿瘤Wnt1和β-catenin蛋白表达较组织预后良好型（FH）肿瘤高，差别具有高度的统计学意义。新生儿肾上腺及〉2岁小儿肾上腺组织中CyclinDl染色均为阴性，而肿瘤组织中表达阳性，Ⅰ～Ⅱ期肿瘤与Ⅲ～Ⅳ期术前未化疗的肿瘤CyclinD1蛋白表达无差别；Ⅲ～Ⅳ期术前未化疗的肿瘤CyclinD1蛋白表达明显高于术前化疗的肿瘤，UH肿瘤的CyclinD1蛋白表达高于FH肿瘤。结论wnt1信号通路对肾上腺细胞分化成熟有一定的调控作用。wnt1通路异常可能是参与神经母细胞瘤发生和侵袭的重要机制。; 孙艳纯郑珊李凯陈莲高解春肖现民; 关键词：神经母细胞瘤 CYCLIND1

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国家自然科学基金(30600655)

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