国家自然科学基金(30600673)
- 作品数：4 被引量：9H指数：3
- 相关作者：梁志清王丹谢尧徐燕薛文更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院山西医科大学第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人卵巢癌微血管内皮细胞的培养与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的建立人卵巢癌微血管内皮细胞(ovarian carcinoma-derived microvascular endothelial cells,ODMECs)体外培养体系。方法采用胶原酶、胰酶联合消化法分离微血管内皮,经percoll梯度密度离心纯化。光镜、电镜、流式细胞术、免疫细胞化学对所获得的ODMECs进行鉴定。结果所获ODMECs流式分析有内皮标志物CD34/VEGF-R2表达;免疫荧光FⅧ-RAg阳性;电镜下见细胞多核、有丰富的微丝、Weibel-Palade小体等;培养中的内皮细胞生长状态良好、呈现典型的铺路石征,可传代培养。结论本研究建立了人ODMECs体外培养体系,对了解卵巢癌血管内皮的异质性有重要价值,为抗卵巢癌血管生成的研究奠定了基础。
- 徐燕梁志清王丹谢尧
- 关键词：微血管内皮细胞卵巢癌细胞培养
- 携带人血管生成素-1腺病毒表达载体Padeasy-1/Ang-1的构建、鉴定和滴度测定
- 2009年
- 目的克隆Ang-1基因,构建Ang-1/Pshuttle/Padeasy-1腺病毒表达载体,为进一步研究Ang-1防治卵巢癌病变的血管异质性提供理论基础。方法提取流产胎儿肝脏组织总RNA,RT-PCR扩增出Ang-1基因片段,并将其克隆到Pshuttle载体中进行序列分析,经PacⅠ线性化、连接到腺病毒表达载体Padeasy-1中,将Padeasy-1包装进脂质体、转染入人胚肾293细胞,测定病毒生物活性滴度。结果从流产胎儿肝脏组织总RNA中,扩增出1.4kb的cDNA片段,成功构建了Padeasy-1/Pshuttle/Ang-1表达载体。结论从流产胎儿肝脏组织中成功克隆Ang-1基因,成功构建Padeasy-1/Pshuttle/Ang-1表达载体,Padeasy-1/Pshuttle/Ang-1表达载体的滴度为1×1011PFU/mL。
- 殷骏梁志清王丹
- 关键词：血管生成素-1腺病毒载体
- 人卵巢癌微血管内皮细胞的培养及体外管腔样结构形成的观察被引量：3
- 2010年
- 目的建立人卵巢癌微血管内皮细胞(ovarian carcinoma-derived microvascular endothelial cells,ODMECs)免疫磁珠分选体系并观察ODMECs体外二维管腔样结构(tubule-like structure,TLS)的形成。方法利用结合有CD31抗体的MACS MicroBeads免疫磁珠分选系统分离纯化ODMECs。通过形态学、生化和表型特征对所获得的ODMECs进行鉴定;并检测其摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated-low-density lipoprotein,DIL-acLDL)和结合凝集素Ⅰ(UEA-Ⅰ)的能力,观察其在体外培养体系中二维管腔样结构的形成。结果所获ODMECs流式分析细胞纯度可达99.6%,具有卵石征、接触抑制,表达CD31、CD105、FⅧ-Rag;具有结合UEA-Ⅰ和摄取DIL-acLDL的能力;培养过程中观测到ODMECs可形成二维管腔样结构。结论成功建立了人ODMECs的免疫磁珠分离培养方法,并观察到ODMECs具有体外二维管腔样结构。
- 徐燕王丹谢尧梁志清
- 关键词：卵巢肿瘤毛细血管内皮细胞免疫磁化分离
- 创伤性脑损伤后钙超载机制的研究进展被引量：4
- 2008年
- 薛文李守缄
- 关键词：创伤性继发性脑损伤继发性损伤神经细胞内
