国家自然科学基金(81130051)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：曹佳崔志鸿敖琳张国伟姜帆更多>>
- 相关机构：第三军医大学宁夏医科大学重庆医科大学更多>>
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- 重庆市大学生精液常规参数与精子DNA损伤的关联性分析被引量：9
- 2016年
- 目的探讨重庆市在校大学生精液常规参数与精子DNA损伤水平之间的关联性。方法 2014年6月招募的重庆大学生男性生殖健康调查(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS)队列639名健康大学生,手淫法采集精液样本,用计算机辅助精子分析系统(Computer-aided sperm analysis,CASA)进行精液常规分析,采用Diff-Quick试剂盒检测精子形态,采用单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测精子DNA损伤,采用Spearman相关分析探讨精子DNA损伤与精液常规参数间的关联性。结果大学生人群精液常规各指标(中位数):精液量为3.6 m L,精子密度为52.0×106/m L,精子总活力为89.4%,前向运动精子百分率为57.0%,精子正常形态率为21.3%。精子DNA损伤(彗星实验指标)水平:尾部DNA含量百分比(Tail DNA%)为19.4%,尾长(tail length,TL)为35.7 pixels,彗星长(comet length,CL)为81.6 pixels,尾距(tail moment,TM)为7.6,Olive尾距(olive tail moment,OTM)为6.3。经Spearman相关性分析,精子密度与Tail DNA%呈负向关联(P<0.05),精子总活力(%)与Tail DNA%、CL、TM、OTM呈负向关联(P值均<0.01),前向运动精子百分率与精子Tail DNA%、CL、TL、TM、OTM呈负向关联(P值均<0.05)。结论重庆市大学生精子密度、精子总活力、前向运动精子百分率均与精子DNA损伤呈负向关联。
- 刘太秀崔志鸿曹佳
- 关键词：精液分析精子DNA损伤大学生
- 双酚A(BPA)对人原代绒毛外滋养细胞(EVT)迁移和侵袭能力的影响
- 2017年
- 目的:研究双酚A(bisphenol A,BPA)对绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblasts,EVT)迁移和侵袭能力的影响。方法:本研究共收集98例胎盘绒毛标本,采用随机分组的方式将EVT细胞分为对照组和不同浓度的BPA处理组(每组≥3例)。用免疫荧光法(immunofluorescence,IFC)对分离的对照组EVT细胞进行鉴定;BPA暴露48 h后,用流式细胞术(FCM)检测BPA暴露对EVT细胞活力、凋亡和增殖的影响;用Transwell法检测EVT细胞的迁移和侵袭能力。结果:(1)IFC显示EVT细胞中人类白细胞抗原G(human leukocyte antigen G,HLA-G)阳性细胞的比例即EVT细胞的纯度>92.7%;(2)流式细胞术和免疫印迹法显示非毒性剂量的BPA不影响EVT细胞的凋亡(F=1.808,P=0.233)、活力(F=0.624,P=0.609)和增殖能力(F=0.174,P=0.913;F=0.260,P=0.852);(3)Transwell显示EVT的迁移和侵袭能力随BPA浓度的增高而呈剂量依赖性增强(F=24.080,P=0.000;F=144.900,P=0.000)。结论:BPA以剂量依赖的方式增强EVT细胞的迁移和侵袭能力。
- 兰曦马明福王应雄杨智曦杨玉有张天枫赵乐天李练兵丁裕斌
- BPDE诱导GC-1细胞凋亡及褪黑素的保护作用被引量：2
- 2017年
- 目的探讨7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(benzo[a]pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide,BPDE)对小鼠精原细胞株GC-1的细胞毒性机制及褪黑素的保护作用。方法不同浓度BPDE处理GC-1细胞,采用Annexin V/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,JC-1探针染色检测线粒体膜电位,Western blot检测细胞质Cyt C及细胞总蛋白中caspase-9/3的活化水平,DCFH-DA探针及流式细胞仪检测细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。褪黑素预处理细胞后再进行BPDE染毒,采用上述方法检测褪黑素对BPDE细胞毒性的影响。结果 BPDE可提高GC-1细胞凋亡率,存在剂量-效应关系。同时,BPDE可降低细胞线粒体膜电位,促进线粒体Cyt C的释放,提高细胞中caspase-9和caspase-3蛋白的活化水平,并诱导细胞中ROS水平升高。褪黑素预处理则可降低BPDE诱导的细胞凋亡,抑制Cyt C的释放及caspase-9/3的活化,并激活Nrf-2/ARE抗氧化通路,降低细胞ROS水平。结论BPDE可诱导小鼠精原细胞GC-1线粒体途径细胞凋亡和氧化应激,而褪黑素在这一过程中起保护作用。
- 姜帆张国伟敖琳曹佳
- 关键词：褪黑素活性氧细胞凋亡
- 绿色荧光蛋白转基因小鼠用作hprt基因突变试验动物模型的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠用作hprt基因突变试验动物模型的可能性。方法:用乙基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导GFP转基因小鼠和普通小鼠基因突变,比较诱导后两种小鼠的嗜多染红细胞微核率变化情况。再观察GFP小鼠细胞克隆对GFP转基因小鼠hprt基因的DNA和mRNA序列进行验证,并对GFP转基因小鼠hprt突变克隆外显子1和外显子9进行了双向测序。结果:ENU诱导后GFP转基因小鼠和普通小鼠的微核率变化趋势相同。GFP转基因小鼠的微孔培养物比普通小鼠的微孔培养物易于确认,且降低了假阳性率和假阴性率。GFP转基因小鼠的hprt基因是完整的,与普通小鼠相比未见明显差异。GFP转基因小鼠hprt基因6个突变克隆外显子1的序列均与野生型小鼠细胞的序列一致,3个突变克隆外显子9的序列中有2个发生了A∶T→T∶A颠换。结论:ENU诱导的GFP转基因小鼠突变模型良好,GFP转基因小鼠可用作小鼠淋巴细胞hprt基因突变试验的动物模型,准确性高且试验难度低。
- 李永红杨录军刘文斌曹佳刘晋祎
- 关键词：动物模型遗传毒性
- 重庆市男性PAHs和PAEs暴露与男性精液质量的相关性分析
- 2016年
- 多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)和邻苯二甲酸酯(phthalate esters,PAEs)是三峡库区水中主要有机污染物。为探讨这2类化学物对三峡库区男性精液质量的影响,课题组于2007年在三峡库区6个区县进行了男性生殖健康的流行病学调查。调查中共收集到有效样本1 346例,对所有样本进行了精液常规检测,选取了冬季采样的232例标本进行了尿液中4种PAHs代谢产物和5种PAEs代谢产物含量的检测,并对这些样本的精子细胞凋亡(Annexin V/PI双标法)和精子脱氧核醣核酸(DNA)损伤(彗星电泳法)进行了检测。运用Spearman等级相关,多元线性回归和logisitic回归分析等方法分析了PAHs和PAEs代谢产物与精液常规指标、精子细胞凋亡、精子DNA损伤的相关关系。结果显示,1 346名三峡库区健康男性精液常规5项指标全部达到世界卫生组织(WHO)标准的比率仅为38.9%。PAHs代谢产物的含量与男性精液常规指标间未发现相关关系,但某些PAHs代谢产物水平与精子凋亡参数及精子DNA损伤指标有一定的关联性,随着尿中PAHs代谢产物浓度的增加,正常未发生凋亡的精子减少,精子DNA的损伤增加。未发现PAEs代谢产物与精液各项参数间的相关关系。本研究结果表明,在重庆市健康育龄男性中PAHs与PAEs的暴露与精液常规指标间没有明确的相关关系,但PAHs暴露与精子DNA损伤显著相关。为明确PAHs的暴露对精子DNA的损伤作用,有必要进行较大规模的队列研究以进行验证。
- 崔志鸿曹佳
- 关键词：PAHSPAES精液质量
