湖南省自然科学杰出青年基金(03JJY1004)
- 作品数：20 被引量：260H指数：10
- 相关作者：肖国樱赵森陈永华严钦泉王育花更多>>
- 相关机构：中国科学院亚热带农业生态研究所湖南农业大学中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学杰出青年基金中国科学院知识创新工程重要方向项目湖南省“十一五”重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化影响因素研究被引量：9
- 2006年
- 从组织培养体系和根癌农杆菌侵染体系两个方面,对影响根癌农杆菌介导的水稻遗传转化频率的各种因素作了具体的分析和综述。
- 王育花田继微肖国樱
- 关键词：水稻根癌农杆菌介导影响因素
- 利用实时荧光定量PCR法检测转基因水稻外源基因拷贝数的研究被引量：59
- 2007年
- 转基因植物中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和遗传稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为转基因研究的关键.利用高通量、快速、灵敏的SYBR GreenⅠ荧光定量实时PCR法,检测了转大麦烟酰胺合成酶基因(NAS1)水稻中外源基因拷贝数.以蔗糖磷酸合成酶基因(SPS)作为水稻的内源参照基因,通过梯度稀释法,分别获得了NAS1和SPS基因的Ct值与起始模板数的相关性标准曲线,相关系数分别为0.99976和0.99571,相关性高.通过目的基因NAS1和水稻内源参照基因SPS起始模板数的比较,获得了目的基因在转基因水稻中的拷贝数,在8株转基因株系中,1株为假阳性,1株拷贝数为1,3株拷贝数为2,其余3株拷贝数分别为3、4和7,而阴性对照拷贝数为0.这种方法快速、简便、准确,可以满足转基因育种工作中对后代优良株系的选择.
- 王育花赵森陈芬肖国樱
- 关键词：SYBR转基因水稻拷贝数
- mRNA差异显示技术的研究进展被引量：10
- 2005年
- 针对mRNA差异显示技术中的假阳性高和放射性污染等缺陷,文章从改进引物设计、应用非放射性标记、优化PCR参数、假阳性鉴定等方面进行了综述。1采用4种兼并或单碱基引物作锚定引物;用特异和长序列(≥20bp)专一性引物作为随机引物,可增加特异性;在锚定引物之前加上了一段T7启动子序列,在随机引物前加上一段M13重复序列,可使DDRT—PCR的体系的扩增特异性更一致。2针对放射性同位素检测法的缺点,文章提出并比较了几种常用的非放射性同位素标记方法。3保证起始(模板)mRNA质量和浓度,降低dNTP浓度,选择最适的反转录和PCR退火温度,可优化PCR参数。4用两种不同的反转录酶进行反转录平行实验,很容易区分出RNA制备过程中造成的假阳性,目前假阳性鉴定大多还是以Northern印迹为基础,再作些适当的改进。
- 陈永华严钦泉余建蒲肖国樱
- 关键词：MRNA差异显示技术NORTHERN随机引物放射性污染启动子序列反转录酶
- 荧光定量PCR检测淹涝胁迫下水稻Adh2基因的表达量变化被引量：24
- 2008年
- 采用荧光定量PCR方法,应用特异性引物,对淹涝胁迫下水稻叶片中低丰度表达的乙醇脱氢酶基因Adh2(Alcohol dehydrogene2)进行转录水平上的定量分析。实验得到一组基线平整、斜率大、指数区明显的S形荧光曲线。结果显示,在淹涝胁迫前期,Adh2基因表达持续增加,在水淹后8h表达量最大,随后下降。淹涝胁迫能诱导叶片中Adh2基因大量表达,且呈低-高-低的变化趋势。
- 赵森陈永华陈昊肖国樱
- 关键词：淹涝胁迫乙醇脱氢酶实时荧光PCR基因表达
- 水稻分蘖期耐淹能力评价及不同淹涝强度对重要农艺性状的影响被引量：11
- 2006年
- 对不同品种水稻分蘖期耐淹能力及不同淹涝强度对一些农艺性状的影响进行了研究,结果表明:(1)淹后叶片相对成活率和茎蘖耐淹能力评分可作为评价水稻分蘖期耐淹能力的指标,供试品种可划分为耐淹、中性、敏感3种类型;(2)随着淹涝强度的增加,淹后株高一般表现出“矮-高-矮”的变化,始穗期推迟时间为:敏感品种>中性品种>耐淹品种,产量性状受影响程度为:敏感品种>中性品种>耐淹品种。
- 陈永华柳俊赵森严钦泉肖国樱
- 关键词：水稻株高始穗期
- mRNA差异显示技术在分离水稻抗性基因中的应用被引量：1
- 2007年
- mRNA差异显示技术从问世至今,在分离水稻抗性基因中得到了广泛的应用,通过对差异表达基因进行分析,能够进一步阐明水稻的抗性机理。对近年来mRNA差异显示法分离水稻抗性基因的研究做了总结,并从引物改进、PCR退火温度、dNTP浓度的改进、胶浓度的选择、标记方法的改进和差异片段验证方法的改进7个方面对mRNA差异显示技术的优化做了简单阐述。
- 陈昊赵森肖国樱
- 关键词：MRNA差异显示水稻抗性基因
- 基因枪法转化水稻的研究进展被引量：5
- 2004年
- 简要综述了基因枪法的基本原理及其优缺点、影响基因枪法转化水稻的几个关键因素及基因枪法转化的外源基因的遗传特性,并提出了基因枪法转化水稻的前景及存在的问题。
- 田继微刘建丰王育花
- 关键词：水稻基因枪
- 利用基因枪转化法获得受四环素调控的水稻雄性不育植株被引量：4
- 2006年
- 利用基因枪法通过pTET-BI-Bar和pTATx-BN-Bin质粒分别将TetR和Barnase基因共转化粳稻品种台北309、4008S和籼稻品种D68。通过对R0代植株不同的基因进行PCR及Southern分析,结果表明,Barnase、TetR基因和控制Barnase基因的TA29-TX启动子均已整合到水稻基因组。其中,台北309和4008S分别获得了15株和6株阳性转基因植株,其外源基因转化率分别为4.5%和1.9%,其外源基因TetR和Barnase的共转化率分别为0.6%和0.3%。D68没有获得阳性转基因植株。
- 田继微廖江林刘建丰李文彬肖国樱
- 关键词：水稻基因枪转化
- SSR标记在水稻遗传育种中的应用被引量：14
- 2007年
- SSR(simple sequence repeat)是一种基于PCR(polymerase chain reaction)的DNA分子遗传标记,广泛分布于整个植物基因组。笔者对SSR标记在构建水稻分子遗传图谱、基因定位和克隆、QTL(quantitative trait loci)分析、品种鉴定、分子标记辅助选择育种等方面的研究进展进行了综述。
- 黄国庆郭加沅肖国樱
- 关键词：SSR分子标记育种水稻
- 籼爪交和粳爪交杂种F_1代性状间关系的研究被引量：8
- 2005年
- 对229个籼爪交组合、98个粳爪交组合的农艺性状进行了相关分析,对籼爪交和粳爪交组合的单株粒重、结实率进行了通径分析,对籼爪交组合农艺性状和品质性状进行了典型相关分析。籼爪交和粳爪交组合间性状相关性表现不同,独立性强的性状籼爪交组合中为谷长、粳爪交组合中为谷宽,其余性状间表现出复杂的相关关系。籼爪交和粳爪交组合均表现每穗实粒数和单株穗数对单株粒重的直接正效应大;每穗实粒数多、单株穗数多且生育期短或适中是提高籼爪交组合单株粒重的选育方向;粳爪交杂种提高单株产量的育种方向是选育每穗实粒数多并且单株穗数也多的组合,同时要兼顾增加每穗总粒数。每穗实粒数对籼爪交杂种结实率的直接正效应大,籼爪交杂种结实率的提高主要依赖每穗实粒数的增加,而其它性状的选择和改良作用不大。提高粳爪交杂种结实率可从3个方面入手,即选育每穗实粒数较多、每穗总粒数较多、且千粒重较大的组合,但主要是提高每穗实粒数。农艺性状和品质性状间存在典型相关。
- 肖国樱袁隆平唐俐邓晓湘
- 关键词：杂交水稻农艺性状米质性状
