国家自然科学基金(30600684)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 小鼠CCR7基因重组腺病毒的构建及其在DC2.4的表达
- 2010年
- 目的构建含有小鼠趋化因子受体-7（CCR7）基因的重组腺病毒（AdCCR7）,观察其体外感染DC2.4细胞效率。方法将小鼠CCR7基因克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,在BJ5l83菌内和骨架质粒pAdeasy-1同源重组,筛选阳性克隆;经线性化后转染HEK293细胞,获得含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7;TCID50方法检测病毒滴度,PCR法鉴定病毒DNA。带绿色荧光蛋白腺病毒（AdGFP）和AdCCR7分别感染DC2.4（GFP-DC2.4和CCR7-DC2.4）,同时设未处理DC2.4为空白对照。流式细胞术（FCM）检测各组细胞表面分子CD11c,MHCⅡ,CD86及CCR7表达,趋化实验检测CCR7的功能。结果获得滴度约为l.4×1010pfu/ml重组腺病毒AdCCR7。AdCCR7感染DC2.4后,CCR7-DC2.4组与另外两组细胞比较CD11c、MHCⅡ及CD86的表达均无明显差异,但CCR7表达升高;其对趋化因子CCL19的趋化率可达44.7%~60.0%,明显高于其它两组。结论成功构建含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7,该病毒可感染细胞株DC2.4,增加细胞表面CCR7表达以及细胞对CCL19的趋化性,为进一步体内实验研究携带CCR7基因的未成熟DCs功能提供了工作基础。
- 应林燕符州罗健陈艳王莉佳李欣
- 关键词：CCR7DC2.4腺病毒
- 树突状细胞CCR7功能研究进展被引量：4
- 2010年
- 树突状细胞(dendritic cells,DCs)做为体内功能最强的专职抗原提呈细胞,自从被发现以来,其功能受到了研究者们广大的关注。调节外周骨髓来源DCs通过输入淋巴管迁移至淋巴结发动初始免疫应答的机制至今仍不是十分清楚,但是利用基因打靶等技术已经表明趋化因子受体CCR7(CC chemokine receptor7)是DCs从外周迁移至淋巴系统发挥作用的最重要的启动和调节者。除此之外,现有研究发现CCR7在DCs细胞上尚可发挥趋化功能以外的多种多样的功能,本文就DCs上CCR7的功能研究现状做一综述。
- 应林燕符州
- 关键词：树突状细胞CCR7趋化功能
- CTLA4-Ig基因修饰的树突状细胞体外对Th1/Th2平衡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4 Ig)基因修饰的树突状细胞(CTLA4 Ig-DCs)体外对Th1/Th2平衡的影响。方法:通过腺病毒载体将目的基因(CTLA4 Ig)转染至小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)。采用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子和胞内CTLA4 Ig的表达;采用混合淋巴细胞反应检测DC刺激同种异体T细胞的能力,ELISA法检测DC抗原提呈反应中Th1和Th2类细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平。结果:CTLA4 Ig基因成功转染至DC,转染率约为80%,制备的CTLA4 Ig-DCs稳定表达CTLA4Ig,表面分子CD86呈现低表达;CTLA4 Ig-DCs可有效抑制T细胞增殖,降低抗原提呈反应上清中IFN-γ和IL-4的分泌,并增加IFN-γ/IL-4比值。结论:通过腺病毒将CTLA4 Ig转染DC并且高效表达,可有效降低DC表面CD86分子,抑制同种异体T细胞反应,并能影响体外Th1/Th2水平。
- 应林燕符州罗健陈艳刘恩梅王莉佳
- 关键词：CTLA4IGTH1/TH2平衡
