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国家自然科学基金(30872823): 作品数：12 被引量：40H指数：4; 相关作者：李斌裴晗李涛胡维琨刘荣更多>>; 相关机构：华中科技大学潜江市中心医院枣阳市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

NTF2对视网膜新生血管的抑制作用: 2009年; 目的体外实验研究核转运因子2(NTF2)对视网膜新生血管的抑制作用。方法以血管内皮生长因子(VEGF)刺激体外培养人视网膜血管内皮细胞,并分为转染重组腺相关病毒2-NTF2(rAAV2-NTF2)的实验组和转染等量空白rAAV2的对照组,利用流式细胞仪和Boyden小室观察NTF2对激活状态的人视网膜血管内皮细胞增殖和迁徙的作用。结果流式细胞仪检测结果显示实验组在G1期的细胞比例为(49.57±0.43)%,对照组为(27.21±0.86)%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。Boyden小室实验检测迁徙细胞数,实验组和对照组分别为(13.8±1.5)和(34.6±2.5)(n=6,P<0.05),说明NTF2能抑制人视网膜血管内皮细胞的增殖和迁徙。结论NTF2对视网膜新生血管具有抑制作用。; 李斌赵敏红李贵刚徐玲娟向艳毛晓春; 关键词：视网膜新生血管

P58^IPK基因在糖尿病鼠视网膜中表达的动态变化被引量：1: 2011年; 背景糖尿病视网膜病变（DR）的分子生物学发病机制仍不清楚，以往的研究表明内质网应激相关因子在糖尿病患者外周血中呈高表达，而P58^IPK可以抑制这些因子的表达，因此P58^IPK和糖尿病之间的关系值得深人研究。目的检测P58^IPK。在糖尿病大鼠模型视网膜中的动态表达，为进一步研究P58^IPK抑制DR的机制奠定基础。方法18只sD大鼠腹腔注射60mg／kg链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病动物模型，分别于造模后1、3、6个月各处死6只大鼠；另6只匹配的正常SD大鼠作为正常对照组。取视网膜组织采用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）法检测P58^IPKmRNA在大鼠视网膜中的表达，观察P58^IPKmRNA随糖尿病的发展出现的动态变化。结果造模后糖尿病组大鼠表现出多饮、多食、多尿，血糖均≥16．5mmol／L，造模成功率为100％。造模后1个月、3个月鼠视网膜中P58^IPKmRNA／β-actinmRNA的A值分别为0．800±0．005和0．975±0．008，明显高于对照组的0．725±0．006，差异有统计学意义（t=22．589、t=62．784，P〈0．05），造模后6个月鼠视网膜P58^IPK／β—actin的A值为0．671±0．004，并明显低于对照组，差异有统计学意义（t=-17．984，P〈0．05）。结论P58^IPK。参与DR的发病机制，可能具有延缓DR发生和发展的作用。; 刘荣石慧胡维琨闫淑崔铮李涛裴晗李斌; 关键词：内质网应激糖尿病视网膜病变

P97抵抗高糖培养的人视网膜血管内皮细胞增殖: 2009年; 目的:研究含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,P97)对高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的作用。方法:体外高糖培养人视网膜血管内皮细胞(HRCECs),转染P97的RNA干扰质粒到HRCECs,抑制P97的表达,观察血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平变化,同时观察HRCECs增殖的变化。结果:RNA干扰P97组和对照组的VEGF/actin分别为:0.21±0.03和0.10±0.01,两组差异有显著性(P<0.05),RNA干扰P97组和对照组,HRCECs在G1期细胞分别为44.05%±3.62%、25.21%±3.20%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:当P97表达受抑制后,VEGF的表达增高,HRCECs的增殖增强,这些变化可能与DR的发生发展相关。; 李斌郑海红华开罗胡军; 关键词：血管内皮生长因子糖尿病视网膜病变

VEGF映射ROP新生血管的初步研究被引量：3: 2008年; 目的:利用VEGF的变化映射早产儿视网膜病变新生血管的发生发展过程。方法:建立缺氧小鼠新生血管动物模型,实时定量PCR检测小鼠视网膜VEGF在不同时间点的mRNA值,通过函数绘制VEGF与新生血管的拟合曲线,并求得VEGF映射视网膜新生血管的函数方程。结果:通过实验和数学推算,我们获得VEGF映射视网膜新生血管的线性方程。结论:利用VEGF的mRNA表达,可以建立方程映射视网膜新生血管的发生发展,为下一步研究奠定基础。; 李斌李艳会徐玲娟华开罗; 关键词：VEGF 映射视网膜新生血管

Hrd1转基因小鼠的构建与验证被引量：1: 2015年; 背景内质网应激在糖尿病视网膜病变（DR）中发挥着重要作用.羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（Hrd1,又名Syvn1）作为一种内质网相关蛋白降解（ERAD）途径中的核心蛋白,能够减少内质网应激. 目的构建Hrd1高表达小鼠,为今后研究Hrd1在DR中的作用提供动物模型. 方法构建Hrd1系统表达重组质粒,酶切、测序后显微注射3 p1到685枚C57BL/6小鼠受精卵中,移植到代孕母鼠,得到Hrd1转基因小鼠.利用鼠尾PCR检测法鉴定F0代小鼠的基因型.得到Hrd1基因检测阳性鼠后,使其分别与野生型鼠杂交,得到F1代Hrd1转基因小鼠,取鼠尾组织,用PCR检测法再次鉴定F1代小鼠基因型. 结果成功构建了Hrd1重组载体,重组质粒pRP.ExBi-EF1 a-Syvn1-IRES-eGFP的全序列测定结果显示,cDNA序列均正确.接受了Hrd1-pcDNA显微注射的685枚受精卵中成活598枚.将存活的受精卵移植到代孕母鼠后共产子鼠41只,获F0代子鼠8只,生理活动均良好.PCR电泳显示339 bp处阳性条带,该基因型可以传递到子代F1.结论成功构建了Hrd1转基因小鼠.; 杨硕刘磊万幸王文丰王娟贺恒雷蕾李斌; 关键词：HYDROXYMETHYL ACYL COENZYME REDUCTASE DEGRADATION

腺相关病毒2-ND4基因转染细胞线粒体的研究被引量：6: 2014年; 背景Leber遗传性视神经病变（LHON）是导致视神经退行性变的线粒体遗传性疾病，主要与线粒体11778位点突变导致ND4蛋白合成异常有关，构建含正常ND4蛋白的载体是基因治疗的关键。由于ND4DNA存在于线粒体，而转染的外源基因只能进入细胞核，不能作用于突变的线粒体DNA。探讨将ND4基因成功转染到线粒体是LHON的基因治疗的关键。目的验证人工合成的ND4基因所构建的重组腺相关病毒（AAV）转染细胞后产生的ND4蛋白能否进入线粒体。方法常规体外培养转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系（293细胞），将细胞分为AAV—ND4转染组和单纯AAV转染组，分别将两种转染液加至各组的培养基中，分别于转染后12、24、36和48h用Y03量子点免疫荧光法检测细胞质中ND4的表达，细胞质中绿色荧光为ND4表达阳性。结果培养的293细胞生长良好，达到80％融合。荧光显微镜下显示，AAV-ND4基因转染组293细胞质中可见大量绿色荧光，而单纯AAV转染组仅可见线粒体蛋白红色荧光。结论AAV-ND4基因转染细胞后产生的ND4蛋白能够进入线粒体，为LHON的基因治疗提供了实验依据。; 杨硕刘磊裴晗万幸陆朵朵胡维琨李斌; 关键词：LEBER遗传性视神经病变基因疗法线粒体DNA 转染腺相关病毒

小骨窗开颅与立体定向置管抽吸治疗基底节区高血压脑出血的临床研究被引量：19: 2016年; 目的分析小骨窗开颅与立体定向置管抽吸治疗基底节区高血压脑出血的临床疗效。方法选取我院神经外科2014年1月—2014年12月收治的80例基底节区高血压脑出血的病人作为研究对象,随机数字表法分为立体定向置管抽吸治疗（试验组）和小骨窗脑血肿清除术治疗（对照组）,每组40例。回顾性分析两种治疗方法的疗效、预后及并发症。结果试验组术后恢复良好率是77.50%,对照组术后恢复良好率是72.50%,组间相比无统计学意义（χ~2=2.53,P〉0.05）。试验组和对照组手术时间、血肿清除率、住院时间组间相比差异有统计学意义（P〈0.05）。试验组和对照组两组并发症发生率组间对比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论立体定向置管抽吸治疗与小骨窗开颅相比,二者的术后恢复良好率并无明显差异,但在手术操作及并发症方面立体定向置管抽吸治疗明显优于小骨窗开颅治疗,预后较好。; 杨学陈劲草张雪梅; 关键词：高血压脑出血血肿清除率

Von Hippel—Lindau综合征一例: 2012年; Von Hippel—Lindau病是临床上一种少见的常染色体显性遗传性疾病，基因缺损部位在第3号染色体上，子代发病可能性为50％。可在不同器官出现肿瘤，其中以中枢神经系统和肾脏肿瘤危害最大。1904年德国眼科专家Von Hippel首先描述了视网膜血管瘤病，1926年瑞典病理学家Lindau又描述了小脑血管瘤伴发视网膜血管瘤的病例。该病发病年龄多在20—50岁之间，男多于女，脑部症状多在视网膜病10年之后发生。现将我科于2011年4月遇到的一例报告如下：; 何小阳李斌罗爱珍; 关键词：眼挫伤睫状体脱离手术

鼠视网膜血管内皮细胞体外培养的改良及鉴定被引量：6: 2011年; 背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）的体外培养是进行视网膜血管性疾病研究的基础，人眼球供体的缺乏是限制人血管内皮细胞培养的主要原因，与人高度同源的大鼠血管内皮细胞的培养方法已经建立，但其分离方法对细胞损伤较大，影响细胞的培养效率。目的建立和改良大鼠RVECs的培养方法。方法选取5只SD大鼠眼球，获得视网膜，用组织块培养法，将大鼠视网膜用质量分数0．1％胶原酶消化，并加入质量分数20％胎牛血清、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长添加物（ECGS），用血管内皮细胞培养基中和后充分吹打，制备细胞及组织悬液，接种于人纤维粘连蛋白（FN）包被的培养瓶中。用Ⅷ因子相关抗体鉴定培养的内皮细胞。结果组织块法消化培养2d可见细胞从组织块游出，培养4d可伸出触角呈梭形，5～6d可融合生长，培养14d后的细胞呈单层生长，培养的细胞Ⅷ因子相关抗体染色阳性。传代培养的细胞接种2h可重新贴壁，恢复融合生长状态。结论视网膜组织块培养并用胶原酶消化可获得活性较强的细胞和碎片，再用高选择性的血管内皮细胞培养基和FN促贴壁进行选择性培养，可获得纯度较高的RVECs。; 崔铮闫淑刘荣李贵刚陈志祺杨红裴晗李涛李斌; 关键词：视网膜血管内皮细胞体外培养动物模型

内质网应激热休克蛋白4在高糖大鼠视网膜的表达: 2012年; 随着生活水平的提高和人口老龄化的加剧，糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）的发病率在世界范围内呈上升趋势，对人群总体健康的危害程度越来越大。在病理状态下，内质网的蛋白质不折叠或错误折叠都会引起内质网应激，触发未折叠的蛋白反应，引起细胞凋亡。; 张新法朱运玲裴晗李贵刚胡维琨李涛李斌; 关键词：糖尿病视网膜病变内质网应激热休克蛋白人口老龄化

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