国家自然科学基金(30872818)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王雨生叶子蔡岩马可侯慧媛更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Notch-Dll4在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管生成中的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨Notch信号通路中Delta样配体4(Delta-like ligand4,Dll4)在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生成中的作用机制。方法将雄性棕色挪威(brown-Norway,BN)大鼠分为正常组、光凝组、实验组和对照组。光凝组、实验组、对照组利用532nm激光诱导建立双眼CNV模型。实验组在建立CNV模型后立刻玻璃体内注射25g.L-1Avastin10μL,对照组注射0.01mmol.L-1PBS10μL。采用免疫荧光染色检测Dll4和血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)在正常组和光凝组光凝后7d中的表达;采用Western-blotting和RT-PCR检测正常组和光凝组(光凝后1d、3d、7d、14d)实验组、对照组(注射后7d)Dll4和VEGF的蛋白和mRNA表达;通过HE染色和视网膜色素上皮-脉络膜-巩膜铺片检测实验组和对照组(注射后14d)CNV生成的厚度和面积。结果Dll4和VEGF在CNV区域有共表达。Dll4和VEGF蛋白及其mRNA的表达趋势一致,均在光凝后1d表达开始上升,7d至高峰,14d开始下降。玻璃体内注射Avastin后,VEGF和Dll4蛋白及其mRNA表达均下降;实验组CNV面积(24202±2608)μm2较对照组(37226±3208)μm2明显减小,差异有统计学意义(P<0.05);实验组CNV厚度(53.68±5.89)μm较对照组(82.86±7.46)μm明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Dll4在CNV生成中具有一定作用,可能参与了VEGF调控CNV生成的过程。
- 马可李晓王雨生叶子蔡岩
- 关键词：脉络膜新生血管
- 重视抗血管内皮生长因子疗法在渗出型老年性黄斑变性治疗应用中的问题被引量：6
- 2010年
- 抗血管内皮生长因子疗法的应用是渗出型老年性黄斑变性治疗中的重大突破，但作为一种新兴疗法，其疗效持久性、药物副作用、药物选择等方面存在的问题也正逐步显现。充分认识该疗法的局限性以及应用过程中可能发生的副作用，加强临床监测，提倡个体化治疗，以提高其疗效和安全性是值得关注和重视的问题。
- 王雨生侯慧媛
- 关键词：血管内皮生长因子类
- 缺氧对人视网膜色素上皮细胞G蛋白信号转导调节子5表达的影响及其可能机制
- 2011年
- 目的探讨缺氧环境下人视网膜色素上皮（RPE）细胞中G蛋白信号转导调节子5（RGS5）表达的可能机制。方法实验研究。在正常培养的人RPE细胞培养基中加入终浓度为200／μmol／L的CoCl：建立细胞化学缺氧模型。按缺氧时间分为0、1、3、6、12和24h6组，观察RGS5和血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化；另选取12和24h作观察点，按处理因素分为缺氧对照组和VEGF抑制剂Bevacizumab处理组，Bevacizumab包括25、100和250肛咖l3种浓度，观察特异性抑制VEGF表达对RGS5表达产生的影响。应用免疫荧光染色法、Western blot和RT-PCR分别检测RGS5及其mRNA和VEGF蛋白及其mRNA的表达。采用Student’s t检验进行统计学分析。结果正常条件下，RGS5主要在人RPE细胞胞浆中表达。与VEGF存在相同表达区域。随着缺氧时间的延长，RPE细胞中RGS5蛋白及其mRNA表达逐渐上调，24h时达高峰（0．932±0．104，t=3．106，P=-0．01l；0．742±0．083，t=2．852，P=-0．017）；VEGF蛋白及其mRNA表达12h达高峰（1．022±0．141，t=4．144，P=0．002；0．491_＋0．063，t=5．707，P〈0．01），24h时有所下降，但仍高于无缺氧的RPE细胞（0．942±0．125，t=3．306，P=0．008；0．425±0．080，t=3．239，P=0．011）。浓度为100和250μg／ml的Bevacizumab有效抑制VEGF蛋白（￡=2．794，P=0．019；t=3．396，P=0．007）和其mRNA（t=2．823，P=0．018；t=9．584，P〈0．01）表达后，RGS5蛋白（t=2．953，P=0．014；t=2．913，P=0．015）和其mRNA（t=3．009，P=-O．013；t=4．243，P=-0．002）表达也随之受到抑制。结论缺氧条件下人RPE细胞RGS5表达上调，并与VEGF表达具有时相关系；抑制VEGF表达后，RGS5表达随之降低。提示RGS5位于VEGF信号通路下游，可能参与缺血缺氧性RPE相关眼病发生的调控。
- 叶子王雨生张雪
- 关键词：脉络膜新生血管化血管内皮生长因子A调节子色素上皮
- G蛋白信号转导调节子5参与实验性脉络膜新生血管生成的可能机制被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨G蛋白信号转导调节子5（RGS5）参与实验性脉络膜新生血管（CNV）生成的可能机制.方法 对照实验研究.采用532 nm激光,对88只（176只眼）雄性棕色挪威（BN）大鼠诱导实验性CNV.其中40只大鼠按光凝后时间分组：光凝后1 d、3 d组各6只大鼠,光凝后7 d组7只大鼠,光凝后14 d组21只大鼠;48只大鼠在光凝后两个时间段按处理因素分组：光凝后7 d的生理盐水组和Avastin注射组各6只大鼠;光凝后14 d的生理盐水组和Avastin注射组各18只大鼠.另选择未进行任何干预的19只大鼠作为正常对照组.分别采用免疫荧光染色法、免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大鼠视网膜和脉络膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）和RGS5蛋白及其mRNA表达灰度值;组织病理学切片和脉络膜铺片观察CNV厚度和面积.组间RGS5蛋白和mRNA表达、VEGF蛋白和mRNA表达灰度值比较,均采用Student＇s t检验.结果 （1）RGS5和VEGF蛋白表达水平：光凝后14 d组大鼠RGS5蛋白表达水平达到高峰,灰度值为0.899±0.057,但与正常对照组（0.820±0.032）差异无统计学意义（t=2.079,P＞0.05）;光凝后7 d组大鼠VEGF蛋白表达水平最高,灰度值为0.600±0.031,较正常对照组（0.382±0.036）明显升高（t=7.959,P＜0.01）.（2）RGS5和VEGF的mRNA表达水平：光凝后1 d和3 d组大鼠RGS5 mRNA表达灰度值分别为0.763±0.035、0.725±0.054,较正常对照组（0.886±0.047）明显下降（t=3.646,3.888;均P＜0.05）,光凝后14 d组达到高峰,但与正常对照组差异无统计学意义（t=2.194,P＞0.05）;光凝后7 d组大鼠VEGF mRNA表达水平达到高峰,灰度值为0.855±0.029,较正常对照组（0.274±0.039）明显升高（t=20.709,P＜0.01）.提示在大鼠CNV形成过程中,RGS5蛋白和mRNA表达高峰期均晚于VEGF蛋白和mRNA表达高峰期.（3）CNV厚度和面积变化：光凝后14 d大鼠CNV形成,CNV厚度为（81.513±10.091）μm,CNV面积为（35 867.
- 叶子王雨生蔡岩马可
- 关键词：脉络膜新生血管化血管内皮生长因子A
- Delta样配体4-Notch信号在眼底血管发育和新生血管生成中的作用被引量：2
- 2009年
- 新生血管可见于多种眼部疾病，是引起视力损害的重要原因之一。近期研究表明，Delta样配体4（D114）-Notch信号在生理性和病理性的血管新生过程中起着关键性的作用。Notch信号通过相邻细胞间的信号传递来调控细胞分化，进而影响细胞命运。D114是Notchl和Notch4在细胞膜上的配体，选择性地表达在生长的内皮细胞和一些肿瘤内皮中，并可由血管内皮生长因子和低氧环境诱导。D114-Notch信号的发现和认识、以及它与新生血管关系的阐明，对于相关眼部疾病的基础和临床研究将具有重要意义。
- 窦国睿王雨生
- 关键词：NOTCH视网膜新生血管化脉络膜新生血管化
- 内皮祖细胞参与大鼠脉络膜新生血管生成的可能机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨内皮祖细胞（EPC）在脉络膜新生血管（CNV）生成中的作用及其可能机制。方法实验研究。用532nm倍频激光光凝视网膜制备BN大鼠CNV模型，每只大鼠1只眼为实验眼，另1只眼为正常对照眼。24只大鼠随机分为3组，分别在激光光凝后3、7、14d经组织病理学观察CNV的形态学变化，通过免疫荧光多标记法观察光凝局部EPC的募集及光凝局部EPC表达分泌的可能促血管生成因子。三组间均数比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD—t检验。结果组织病理学和免疫荧光染色结果显示，大鼠实验眼光凝后3d光凝局部增生、移行的细胞自破损的Bruch膜长入视网膜下腔，光凝后7d光凝局部有新生血管管腔样结构形成，至光凝后14d，CNV趋于稳定，其内管腔样结构进一步增多并连接成网。大鼠正常对照眼视网膜中未见EPC，实验眼激光光凝后3d即有大量EPC出现在光凝局部，占CNV中内皮细胞的（79．29±11．27）％；光凝后7dEPC见于光凝局部管腔样结构中，CNV内EPC占内皮细胞的（47．13±5．78）％；至光凝后14d，CNV内EPC数量显著下降，占内皮细胞的（10．83±2．79）％；3组问差异有统计学意义（F=104．623，P〈0．05）。进一步行两两比较，差异亦均有统计学意义（P值均〈0．05）。免疫荧光三标记染色结果显示，大鼠实验眼CNV局部的EPC表达血管内皮生长因子、白细胞介素-10、碱性成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶9。结论EPC不仅可通过募集、整合的方式直接参与CNV的生成，还可以通过分泌血管生成因子的间接方式参与CNV的生成。
- 杨秀梅王雨生屈小杰段春光徐建锋
- 关键词：脉络膜新生血管化内皮祖细胞
