上海市自然科学基金(12ZR1413000)
- 作品数：7 被引量：57H指数：3
- 相关作者：成永旭吴旭干潘桂平刘智俊侯文杰更多>>
- 相关机构：上海海洋大学上海市水产研究所浙江省海洋水产研究所更多>>
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- 三疣梭子蟹卵巢发育过程中雌二醇的免疫定位和变化
- 2017年
- 雌二醇(estradiol,E_2)是甲壳动物体内重要的性类固醇激素,对其卵巢发育和卵黄发生起着十分重要的调控作用。本实验采用免疫组织化学方法系统研究了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢发育过程中E_2在卵巢、肝胰腺、胸神经节、脑神经节和大颚器中的分布及变化。结果表明:(1)蟹卵巢中E_2的免疫阳性主要分布于滤泡细胞和卵巢发育中后期的卵母细胞细胞质(II-V期),卵巢发育过程中卵母细胞细胞质和细胞核中的E_2免疫阳性均为先上升后下降的趋势,最大免疫阳性分别出现在IV期和II-III期,滤泡细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(2)肝胰腺中的E_2免疫阳性主要分布于F细胞及R细胞细胞核中,R细胞细胞核中的E_2免疫阳性从III期开始显著下降,F细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(3)卵巢发育(I-V期)的神经组织,E_2主要分布于胸神经团的神经细胞和神经髓质以及脑神经节神经细胞细胞核内,其中脑神经节神经细胞细胞核中始终保持着强免疫阳性,卵巢发育早期(I-II期)胸神经团中的神经髓质中为E_2中等免疫阳性,神经细胞中一直为弱免疫阳性;(4)就大颚器而言,E_2强免疫阳性始终存在于大颚器腺细胞的核仁以及细胞核周围的细胞质内。以上结果表明,E_2在三疣梭子蟹卵巢、肝胰腺、神经组织和大颚器中广泛分布,且免疫阳性与卵巢发育具有一定的相关性,E_2可能通过作用于多个靶器官来调控三疣梭子蟹的卵巢发育。
- 柳梅梅吴旭干潘杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵巢发育雌二醇免疫定位作用靶点
- 雌激素拮抗剂对三疣梭子蟹卵巢发育及相关基因表达的影响被引量：1
- 2018年
- 通过活体注射、养殖实验和荧光定量PCR等方法,研究了不同浓度他莫昔芬(TAM)对三疣梭子蟹雌体成活率、卵巢指数、肝胰腺指数及卵巢发育相关基因表达的影响。结果显示,不同浓度TAM对雌体存活率和肝胰腺指数均无显著影响,但在一定程度上抑制了卵巢指数。不同组织中的卵黄蛋白原(Vg)、雌激素相关受体(ERR)、维甲酸受体(RXR)和蜕皮激素受体(Ec R)基因表达均受到了TAM的影响,Vg基因在卵巢和肝胰腺中的表达水平明显受到TAM的抑制;低浓度TAM组(6.7和13.4μg/g)促进了卵巢和胸神经节中的ERR基因的表达,但高浓度TAM(20μg/g)抑制了大部分组织中ERR基因表达水平;外源注射TAM对三疣梭子蟹卵巢和肝胰腺中的Ec R基因表达的变化模式与ERR基因基本相似;此外,低浓度TAM促进了卵巢中RXR基因的表达,对肝胰腺中RXR基因表达无显著影响。研究表明,TAM通过抑制Vg基因表达影响卵巢发育,同时ERR和Ec R可能参与了雌激素或雌激素拮抗剂对三疣梭子蟹卵巢发育的调控过程。
- 陆洋吴旭干柳梅梅巩杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵巢发育雌激素拮抗剂基因表达
- 三疣梭子蟹卵巢发育期间孕激素受体的免疫识别与分布被引量：1
- 2013年
- 为探讨三疣梭子蟹卵巢发育过程中孕激素受体(progestin receptor,PR)的调控作用,采用免疫印迹和免疫组化方法,首次对三疣梭子蟹卵巢、肝胰腺、大颚器、Y器官、视神经节和胸神经团中的PR进行免疫识别和定位,并系统研究了卵巢发育期间PR在这些器官中的分布和变化。结果表明:(1)三疣梭子蟹视神经节中存在PR阳性条带,分子量为100 ku;(2)PR仅在早期(Ⅰ～Ⅲ期)生殖细胞胞质和后期(Ⅲ～Ⅴ期)细胞核呈强阳性,但在各期滤泡细胞中始终呈强阳性;(3)PR阳性主要存在于Ⅰ～Ⅴ期肝胰腺F细胞和Ⅲ期R细胞核中,其余肝胰腺细胞中均无PR阳性;(4)大颚器腺细胞中的PR阳性仅发现于Ⅳ期腺细胞胞质中,各期Y器官腺细胞中均呈PR阴性;(5)就视神经节而言,PR主要存在于Ⅲ～Ⅴ期的神经细胞。就胸神经团而言,Ⅰ～Ⅴ期神经细胞中的PR阳性呈增强趋势,而Ⅰ～Ⅴ期神经髓质中PR始终呈PR强阳性。结果表明,孕酮不仅可以通过与卵巢和肝胰腺中PR结合直接调控三疣梭子蟹的卵黄发生和卵巢发育,还可能通过影响其它内分泌激素的合成和分泌来间接调控其卵巢发育。
- 陈浩吴旭干刘智俊成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹孕激素受体免疫印迹卵巢发育
- 三疣梭子蟹几丁质酶基因的克隆及其在蜕皮过程中的表达分析被引量：4
- 2015年
- 为探究几丁质酶基因在三疣梭子蟹蜕皮过程中的生理作用,本研究通过转录组测序和RACE技术克隆了三疣梭子蟹几丁质酶基因（Pt Chi）c DNA全长（登录号：KF914663）,并通过荧光定量PCR（qRT-PCR）技术研究了该基因在三疣梭子蟹不同组织及不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明：（1）Pt Chi基因c DNA全长2 200 bp,包括5＇非编码区（5＇-UTR）16 bp、3＇非编码区（3＇-UTR）714 bp和开放阅读框1 470 bp,编码489个氨基酸,预测蛋白质分子量和等电点为53.97 ku和4.76。（2）Blast P结果显示,Pt Chi推导氨基酸序列与已知甲壳动物Chi-3的一致性为61%～96%,系统进化树分析表明Pt Chi与其他甲壳动物Chi-3聚为一支。（3）qRTPCR结果显示Pt Chi基因在C期三疣梭子蟹肝胰腺中表达水平最高,胃、大颚器、心脏和眼柄中Pt Chi-mRNA表达水平依次降低,在其他组织中Pt Chi-mRNA表达量最低,且表达水平无显著差异。（4）不同蜕皮阶段,Pt Chi在肝胰腺、肠、胃和大颚器4种组织中的表达变化模式有所不同,肝胰腺中Pt Chi-mRNA表达水平在AB期最高,C期最低,暗示Pt Chi可能参与三疣梭子蟹蜕皮后期对病原体的免疫防御;肠中的Pt Chi-mRNA表达水平在E期最高,C期最低,推测Pt Chi参与蜕皮过程中肠道围食膜的分解和免疫功能;胃中Pt Chi表达水平在C期最高,暗示其参与了食物消化。以上结果表明,本研究克隆的Pt Chi可能为甲壳动物Chi-3型,其准确生理学功能及其在蜕皮过程中的调控机制有待进一步深入研究。
- 王伟王伟潘桂平吴旭干潘桂平
- 关键词：三疣梭子蟹几丁质酶基因克隆
- 三疣梭子蟹雌激素相关受体基因在蜕皮过程中的表达分析被引量：3
- 2016年
- 雌激素相关受体(ERR)在甲壳动物蜕皮过程中可能起着重要的调节作用,但是尚不清楚该基因在三疣梭子蟹不同组织和不同蜕皮阶段的表达模式。本文采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究了三疣梭子蟹雌激素相关受体(Pt ERR)基因在不同组织和不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明,Pt ERR-mRNA在C期三疣梭子蟹的Y器官和鳃中表达水平最高,其次眼柄和胃中表达水平也相对较高,在3种肌肉组织和三角膜中表达水平较低。在不同蜕皮阶段,13种组织中的Pt ERR-mRNA表达水平均差异显著。Y器官中Pt ERR-mRNA从AB期到E期呈显著上升趋势;胸神经节和眼柄中的Pt ERR-mRNA变化模式均为先上升后下降趋势,大颚器中的Pt ERR-mRNA变化趋势为先下降后上升;大螯肌肉、附肢肌肉和三角膜中的Pt ERR-mRNA表达水平均呈显著升高趋势,而腹部肌肉中Pt ERR-mRNA为先下降后上升趋势;就消化代谢器官而言,胃、肝胰腺和鳃中Pt ERR-mRNA在整个蜕皮周期中均为先升高后降低的趋势,其中D期达最高值;肠道中Pt ERR-mRNA相对表达量在D期最高,C期和E期较低;从AB期至E期,心脏中Pt ERR-mRNA表达水平一直显著增加,每期增加1倍左右。综上,Pt ERR主要在Y器官、鳃、眼柄和胃中表达,可能参与调控蜕皮过程、细胞增殖和能量代谢等。
- 陆洋吴旭干潘桂平王伟候文杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹雌激素相关受体
- 育肥时间对三疣梭子蟹卵巢发育和营养品质的影响被引量：45
- 2014年
- 采用育肥养殖实验和生化分析技术，研究了育肥时间对三疣梭子蟹雌体卵巢发育和营养品质的影响。结果发现，（1）经90d育肥的雌体卵巢指数显著上升，出肉率和总可食率呈先上升后下降趋势，育肥30—60d的总可食率达42％以上。（2）育肥时间对肌肉中常规营养成分含量无显著影响，育肥60d卵巢和肝胰腺中的蛋白质、脂肪和碳水化合物含量最高，水分含量最低；育肥使肝胰腺和卵巢中胆固醇百分含量呈显著下降趋势，育肥后期卵巢和肝胰腺中的磷脂含量显著上升；就不同组织而言，肝胰腺中的甘油三酯含量最高。（3）育肥使卵巢和肝胰腺中的单不饱和脂肪酸呈上升趋势，而多不饱和脂肪酸呈先下降后上升趋势，肌肉中脂肪酸组成无显著变化；整体上，肌肉的脂肪酸营养价值优于肝胰腺和卵巢。（4）育肥早期卵巢中氨基酸含量显著上升，整个育肥过程中肌肉中的甜味氨基酸含量呈显著上升趋势，育肥60d后卵巢和肌肉中所有必需氨基酸分值均大于100，无限制性氨基酸。研究表明，生殖蜕壳后的三疣梭子蟹雌体适宜育肥时间为60d，育肥不仅提高了总可食率，且优化了其营养价值。
- 吴旭干汪倩楼宝刘智俊成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹育肥时间卵巢发育营养品质脂肪酸氨基酸
- 三种饵料对三疣梭子蟹亚成体成活、蜕壳、生长和生化组成的影响被引量：5
- 2016年
- 为研究投喂配合饲料、杂鱼和猪肺对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)亚成体的养殖性能和生化组成的影响,本研究采用单体框养和生化分析方法,以初始体重70 g左右的雌体为研究对象,分析3种饵料对亚成体成活、蜕壳、生长、肝胰腺指数、肌肉指数、常规生化成分、脂肪酸组成的影响。结果显示:(1)3组饵料对成活率影响显著,饲料组高达90%,杂鱼组仅为43%左右,猪肺组居于二者之间;杂鱼组死亡主要由蜕壳死亡综合症(MDS)引起,饲料组和猪肺组无明显蜕壳死亡综合症(MDS)引起的死亡现象;(2)配合饲料组的蜕壳间隔最短,两次蜕壳个体百分比、终体重和特定增长率最高,杂鱼组蜕壳间隔最长,生长情况最差,猪肺组养殖性能居中;(3)尽管配合饲料组的平均肝胰腺指数高于其他两组,但是3个饵料组的肝胰腺指数和肌肉指数均无显著差异;(4)不同饵料对组织中常规生化组成影响显著,杂鱼组肝胰腺和肌肉中水分含量最低,其他成分含量最高,其他两组常规生化组成较为接近;(5)肝胰腺和肌肉中的主要脂肪酸百分含量均受所投喂饵料脂肪酸组成影响显著,杂鱼组组织中高度不饱和脂肪酸(HUFA)含量最高,猪肺组饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸含量最高,但多不饱和脂肪酸含量最低;整体上,杂鱼组蟹对饵料中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)相对保留率最低,猪肺组蟹最高。综上,配合饲料能够提高三疣梭子蟹亚成体的养殖性能,可以在一定程度上替代广泛使用的杂鱼等冰鲜饵料。
- 侯文杰潘桂平龙晓文吴旭干周文玉成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹养殖性能生化成分
