黑龙江省青年科学基金(QC2009C90)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：崔丽春曹际娟张昕哲李丹丹更多>>
- 相关机构：东北林业大学辽宁出入境检验检疫局东北农业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省博士后基金黑龙江省青年科学基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 志贺氏菌属环介导恒温扩增快速检测方法的建立及初步应用被引量：1
- 2010年
- 为建立快速检测志贺氏菌属的方法,本研究针对其ipaH基因,建立了志贺氏菌属环介导恒温护增(LAMP)快速检测方法。利用该方法对50株细菌进行检测,结果显示7株志贺氏菌均为阳性,其它菌均为阴性,表明该方法具有高度特异性。灵敏度试验显示,对志贺氏菌纯培养菌的检测灵敏度为28cfu/mL,对污染食品中志贺氏菌的检测灵敏度为35cfu/mL。利用该方法对195份涉及肉类、奶类、豆制品及人工污染样品进行检测,共检出29份阳性样品,与细菌分离鉴定检测结果一致。该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高且成本低廉,具有良好的应用前景。
- 徐义刚崔丽春张昕哲李苏龙于恒纯张子群李丹丹
- 关键词：志贺氏菌属IPAH基因
- 多重PCR-DHPLC检测4种主要致腹泻性大肠埃希氏菌方法的建立与应用被引量：6
- 2010年
- 肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起腹泻、危害食品安全和人类健康的4种主要大肠杆菌。本实验基于ETEC LT基因、EPEC bfpA基因、EHEC O抗原基因和EIEC侵袭性质粒基因序列,设计了4对特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,通过体系优化,建立了致腹泻性大肠杆菌多重PCR-DHPLC检测方法,达到同时检测4种致病菌的目的。该方法灵敏度高,最低检测限为EHEC6×101拷贝/μL、ETEC1.3×102拷贝/μL、EPEC9×101拷贝/μL、EIEC7×101拷贝/μL。特异性试验表明,对22种共41株细菌进行检测,所试6株致腹泻性大肠杆菌均为阳性。实践证明,该方法具有良好的实用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的单一或混合感染的检测。
- 徐义刚崔丽春李苏龙曹际娟姜艳春张子群刘新亮
- 关键词：聚合酶链式反应变性高效液相色谱
- 多重PCR方法快速检测4种主要致腹泻性大肠埃希菌被引量：6
- 2010年
- 肠毒素性大肠埃希菌（ETEC）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）和侵袭性大肠埃希菌（EIEC）是引起腹泻的主要大肠埃希菌,威胁着食品安全和人类健康,建立同时检测4种致腹泻性大肠埃希菌的方法具有重要意义。基于ETEC LT肠毒素基因、EPEC bfpA基因、EHECO抗原基因和EIEC侵袭性质粒特异性基因,设计了4对特异性引物,通过对单一PCR反应条件的优化建立了快速检测4种主要致腹泻性大肠埃希菌的多重PCR方法,彼此之间无交叉反应。该多重PCR方法具有良好的特异性和灵敏性,对24株致病菌进行检测,所试4株致腹泻性大肠埃希菌均为PCR阳性,其他菌株则为阴性。实践证明,利用所建立的多重PCR方法对124份肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出15份阳性,与国标（GB4789.6-1994）检测结果相同。结果表明本文建立的多重PCR方法可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的单一或混合感染的鉴别诊断及食品安全风险评估,具有良好的实用性。
- 徐义刚崔丽春李苏龙姜艳春谢晓峰刘新亮
- 关键词：多重PCR
