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浙江省科技厅资助项目(2009C33147)
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周美英
潘映秋
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抑癌基因ING2真核表达质粒的建立及其对肺癌细胞生长的影响
2012年
目的构建抑癌基因生长抑制因子2(ING2)真核表达载体,研究p331NG2对人肺腺癌细胞A549及人小细胞肺癌细胞NCI—H446体外生长的影响。方法构建ING2基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)—ING2,采用脂质体法分另U转染A549和NCI-H446细胞,以未转染组和转染pcDNA3.1(+)空质粒组作为对照,应用RT-PCR、细胞免疫组化和Westernblot法分析目的基因及其蛋白表达,CCK8试剂盒分析其对细胞生长的影响,AnnexinV-FITC和PI双染流式细胞术观察细胞凋亡的情况。结果成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-ING2,转染后细胞株高水平表达ING2mRNA及p331NG2蛋白。CCK8法检测结果显示:转染pcDNA3.1(+)-ING2的A549细胞和NCl-H446细胞增殖受到抑制,抑制率与pcDNA3.1(+)空质粒转染组比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。流式细胞术凋亡检测结果显示:转染pcDNA3.1(+)-ING2的A549细胞和NCI—H446细胞组凋亡率均高于未转染组和pcDNA3.1(+)空质粒转染组,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论ING2蛋白表达能抑制人肺腺癌细胞A549和人小细胞肺癌细胞NCI—H446增殖及增加细胞凋亡率。
潘映秋
章霞
周美英
颜卫华
关键词:
肺癌
基因转染
凋亡
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