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针对人CD133分子两个胞外段的单链抗体的克隆与表达: 2013年; 目的:克隆与表达针对人CD133分子两个不同胞外段的单链抗体。方法:提取杂交瘤细胞总mR-NA,利用简并引物PCR获得针对人CD133分子两个胞外段抗体可变区基因,再通过重叠延伸PCR的方法,用一段柔性linker(GGGGS)3将其相连,得到CD133 Ex-1 scFv和CD133 Ex-2 scFv基因。随后,将其克隆至携带6×His标签的原核表达载体pRSET-B中,然后对其进行了表达和鉴定研究。结果:获得分别针对CD133不同胞外段的单链抗体基因,并成功获得针对CD133两个胞外段的单链抗体,但该单链抗体主要以不溶性包涵体形式存在于胞内。包涵体蛋白经复性和镍柱亲和层析纯化后,得到纯度较高的单链抗体,通过蛋白质印迹实验证实,融合蛋白确实为单链抗体。结论:成功制备出针对CD133两个胞外段的单链抗体。该研究结果为其功能研究及其在肿瘤靶向治疗研究中奠定了物质基础。; 王菲赵静王顺娟夏海滨; 关键词：CD133 单链抗体原核表达包涵体

锌离子转运蛋白LIV-1的研究进展被引量：3: 2014年; LIV-1(solute carrier family 39 member 6,SLC39A6/ZIP6)是锌转运蛋白ZIP家族中LZT(LIV-1 subfamily of ZIP zinc Transporters)亚家族成员之一,定位于细胞膜,富含组氨酸,并包含有多个跨膜结构域,主要分布于受激素调控的组织中。LIV-1的主要功能是将Zn2+转运至细胞质基质中从而提高基质内Zn2+的含量,此外研究表明,LIV-1还参与胚胎发育以及肿瘤迁移中所涉及的上皮-间充质细胞转化过程(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT),提示除与锌离子运输外,它可能与肿瘤等多种疾病的发生发展也有着密切地联系。本文将对锌转运蛋白LIV-1的相关研究进展进行综述。; 乔珏夏海滨

MDFIC分子研究进展: 2014年; MDFIC(MyoD family inhibitor domain containing protein,MDFIC)是研究人T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-1)和人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的表达调控时,通过酵母双杂交发现的具有I-mfa蛋白抑制蛋白结构域的蛋白分子。MDFIC在某些病毒基因组转录调控方面发挥着重要的作用。本文就MDFIC的结构、基因定位、组织分布及其在病毒基因组表达调控及相关信号通路中的作用作一综述。; 色林格夏海滨; 关键词：基因表达调控信号通路

利用CRISPR/Cas9技术构建GLRX3基因敲除的HEK293细胞系被引量：1: 2017年; 为了构建GLRX3(Glutaredoxin 3)敲除的HEK293细胞系,根据该蛋白结构特性设计了靶向于GLRX3基因Exon5的4个sgRNA,并通过T7E1检测确认了所设计sgRNA的有效性。将携带Cas9及靶向hGLRX3-Exon5的sgRNA1的打靶载体转染HEK293,通过药物Puromycin和细胞克隆化筛选出稳定GLRX3基因敲除的HEK293细胞株,并通过测序确定GLRX3两个等位基因均发生移码突变。通过免疫印迹在蛋白表达水平确认了该基因的敲除。利用CRISPR/Cas9技术成功构建了GLRX3敲除的HEK293细胞株,其为探索GLRX3的功能和作用机制提供了有效的细胞模型。; 代鑫赵俊丽杨沛艳夏海滨; 关键词：基因敲除

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国家自然科学基金(81272543)