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国家自然科学基金(30772477)

作品数:6 被引量:7H指数:2
相关作者:徐增辉钱其军周秀梅雷求刚石文芳更多>>
相关机构:浙江理工大学第二军医大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 4篇腺相关病毒
  • 3篇RAAV
  • 2篇肿瘤
  • 2篇基因
  • 2篇杆状
  • 2篇杆状病毒
  • 2篇病毒
  • 1篇制备法
  • 1篇肿瘤靶向
  • 1篇肿瘤靶向治疗
  • 1篇重组腺相关病...
  • 1篇腺相关病毒载...
  • 1篇疗法
  • 1篇聚乙烯亚胺
  • 1篇昆虫细胞
  • 1篇基因疗法
  • 1篇基因治疗
  • 1篇杆状病毒系统
  • 1篇靶向
  • 1篇靶向治疗

机构

  • 4篇浙江理工大学
  • 3篇第二军医大学

作者

  • 4篇钱其军
  • 4篇徐增辉
  • 2篇周秀梅
  • 2篇雷求刚
  • 1篇石文芳
  • 1篇徐凤青
  • 1篇金华君
  • 1篇范丽
  • 1篇丁娜
  • 1篇严淋

传媒

  • 2篇浙江理工大学...
  • 1篇科学通报
  • 1篇第二军医大学...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 1篇2011
  • 2篇2010
  • 2篇2008
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
腺相关病毒载体的杆状病毒生产系统的构建被引量:2
2010年
由于腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的非致病性及能感染多种组织类型,重组AAV载体(rAAV)在基因治疗领域备受关注。然而,如何高效生产rAAV以适应临床上对其高产量的需求一直是限制其应用的瓶颈。借助杆状病毒携带rAAV包装所需组分,通过感染昆虫细胞来生产rAAV是一种能够解决其产量瓶颈的生产方式。将AAV2的Rep、Cap基因序列以及含AAV2 ITR及EGFP表达框的序列分别构建到三个杆状病毒中,通过共感染Sf9细胞来生产rAAV,结果显示成功包装出rAAV病毒,且病毒活力较好。这种生产方式很容易放大,将为AAV载体产业化及临床应用奠定基础。
雷求刚徐增辉钱其军
关键词:RAAV杆状病毒
应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒
2011年
目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。
范丽徐增辉金华君徐凤青丁娜严淋钱其军
关键词:杆状病毒系统腺相关病毒昆虫细胞
腺相关病毒外壳修饰与肿瘤靶向治疗被引量:5
2008年
靶向性是肿瘤基因治疗取得成功的关键因素.在众多基因治疗病毒载体中,腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)是目前广为关注的基因治疗载体系统.AAV具有广泛的宿主范围,这也导致其缺乏组织或细胞特异性,对靶细胞的基因转染效率不高.因此,提高AAV载体在体内运输的靶向性和感染目的细胞的效率,是实现AAV基因治疗的关键.迄今为止,科学家已开发出很多策略来改造腺相关病毒的外壳,期望增强其靶向性或重靶向目的细胞.这些策略不仅包括传统的化学修饰、噬菌体展示、外壳基因组改造和嵌合载体,也包括新颖的标记营救、衣壳蛋白定向进化、AAV外壳直接肽段展示和AAVP(AAV-Phage)等.本文评述了对AAV外壳改造达到靶向肿瘤细胞的研究进展.
徐增辉周秀梅石文芳钱其军
关键词:RAAV靶向治疗基因治疗
Capsid modification of adeno-associated virus and tumor targeting gene therapy
2008年
Targeting is critical for successful tumor gene therapy.The adeno-associated virus(AAV) has aroused wide concern due to its excellent advantages over other viral vectors in gene therapy.AAV has a broad infection spectrum,which also results in poor specificity towards tissues or cells and low transduction efficiency.Therefore,it is imperative to improve target and transduction efficiency in AAV-mediated gene therapy.Up to now,researchers have developed many strategies to modify AAV capsids for improving targeting or retargeting only desired cells.These strategies include not only traditional chemical modification,phage display technology,modification of AAV capsid genome,chimeric vectors and so on,but also many novel strategies involved in marker rescue strategy,direct evolution of capsid proteins,direct display random peptides on AAV capsid,AAVP(AAV-Phage),and etc.This review will summarize the advances of researches on the capsid modification of AAV to target malignant cells.
XU ZengHuZHOU XiuMeiSHI WenFangQIAN QiJun
关键词:RAAV基因疗法肿瘤
重组腺相关病毒2/8的聚乙烯亚胺制备法
2010年
重组腺相关病毒2/8(recombinant adeno-associated virus 2/8,rAAV2/8)是基因治疗中的一种非复制型病毒,包装困难、耗时、费力。本研究中,一种采用非病毒载体聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)来高效包装重组腺相关病毒的方法被成功建立。在成功构建并鉴定包装rAAV2/8所需的pAAV-neo-eGFP、p5E18-VD286和pSH3-D 3个质粒后,用优化过转染条件的PEI转染方法共转染这3个质粒到HEK293细胞,获得了高效稳定的转染效率,并成功包装出携带有绿色荧光蛋白eGFP的rAAV2/8。rAAV2/8的细胞感染实验表明包装出的病毒具感染活性,证明了用PEI共转染三质粒高效包装rAAV2/8具可行性。
徐增辉雷求刚周秀梅钱其军
关键词:PEI
共1页<1>
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