国家自然科学基金(30271599)
- 作品数：8 被引量：107H指数：5
- 相关作者：杨宝峰单宏丽王玲孙宏丽张妍更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省重大科技攻关项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青蒿素诱导K562细胞凋亡研究被引量：62
- 2003年
- [目的]研究青蒿素对体外培养的K562细胞的凋亡诱导作用及机制。[方法]MTT法测定药物对K562细胞生长的抑制作用;透射电镜观察药物对K562细胞形态学的影响;流式细胞仪检测经药物作用后的细胞凋亡率;用Rhodamine(Rh123)染色法检测细胞线粒体跨膜电位(Δψm)的变化。[结果]青蒿素对K562细胞生长有明显的抑制作用,细胞经药物作用48小时后的IC50为26.5μmol/L;电镜观察细胞有典型的凋亡形态特征;细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度正相关。给药后跨膜电位明显下降。[结论]青蒿素可抑制K562细胞的生长,诱导K562细胞跨膜电位下降而导致细胞凋亡。
- 董海鹰王知非宋维华王玲杨宝峰
- 关键词：青蒿素K562细胞MTT法凋亡
- 大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响被引量：23
- 2004年
- 目的 研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果 在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素对 [Ca2 +]i 均无影响 ;对 6 0mmol·L- 1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响 ,1μmol·L- 1 表现为促进作用 ;10 μmol·L- 1 无作用 ;10 0 μmol·L- 1 则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明 ,1μmol·L- 1 大黄素可明显促进L 型钙电流 ,10 μmol·L- 1 对L 型钙电流无影响 ;10 0 μmol·L- 1 明显抑制L 型钙电流。结论 大黄素对心肌细胞内钙及L
- 刘影单宏丽孙宏丽何树庄杨宝峰
- 关键词：大黄素心室肌细胞胞浆游离钙浓度L-型钙电流心血管系统疾病
- 冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度及L-型钙电流的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i以及ICa L的变化。结果 应用 0 1mg/mL (生药浓度 )冬虫夏草水提液 ,在静息状态下对 [Ca2 + ]i 无影响 ;对 6 0mmol/LKCl诱导的胞浆 [Ca2 + ]i升高有促进作用 ,峰值荧光强度在 12 0s时由12 0 4 3± 2 38 4增加至 185 5 2± 32 1 0 (n =6 ,P <0 0 5 )。膜片钳研究结果表明 ,冬虫夏草水提液可明显促进ICa L,使ICa L从 (- 15 1± 2 3)pA/ pF增加到 (- 19 7± 3 2 ) pA/pF (刺激电压为 10mV ,n =8,P <0 0 1)。 结论 冬虫夏草水提液促进心肌细胞钙内流 ,是该药治疗缓慢型心律失常的机制之一。
- 王赫单宏丽孙宏丽陈庆文张妍杨宝峰
- 关键词：冬虫夏草L-型钙电流膜片钳技术
- 鹌鹑心室肌细胞电生理特性的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 建立鹌鹑单个心室肌细胞的分离方法 ,观察鹌鹑心室肌细胞的电生理特性 ,并探讨不同离子通道在鹌鹑心肌电活动中的作用。方法 采用酶解法分离单个心室肌细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞动作电位和L型钙电流。结果 鹌鹑单个心室肌细胞的静息电位 (RP)为 ( 6 2 .2 8± 2 .6 4 )mV ,超射值 (OS)为 (5 9.38±3.81 )mV ,5 0 %复极时间 (APD50 )和 90 %复极时间 (APD90 )分别为 (80 .4 0± 1 9.1 0 )ms和 (1 2 1 .95± 38.72 )ms。在实验电压 +1 0mV时 ,L型钙电流的峰值为 ( 1 3.2 7± 3.70 )pA pF(n =4 )。结论 鹌鹑心室肌细胞上存在着L型钙电流 。
- 荆玉红龚冬梅白云龙刘玉梅杨宝峰
- 关键词：鹌鹑心室肌细胞电生理钙电流高脂血症
- 积分法:一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流的方法(英文)
- 2005年
- 目的 评价一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流 (Ito)的积分方法。方法 Ito的失活相可被 2指数或 3指数方程拟合。原始电流曲线下面积 (AUC)可通过指数方程积分获得。以细胞膜电容标准化后的曲线下面积表示除极化时程中钾离子的净通量 ,作为比较指标。钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞表现Ito下调 ,此数据用于验证Ito的积分分析方法的可靠性。结果 AUC可通过 3指数或2指数方程的积分公式获得 :AUC =A1τ1+A2 τ2 +A3τ3+A0 t -A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 -A3τ3e-t/τ3或AUC =A1τ1+A2 τ2 +A0 t-A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 。小鼠心室肌 5 0 %和 90 %动作电位时程分别约为 10ms和 30ms。将Ito0～ 10ms (AUC50 )和 0～ 30ms(AUC90 )的曲线下面积以细胞膜电容进行标准化。野生型鼠心肌细胞的AUC50 和AUC90 明显高于钙调磷酸酶过表达转基因鼠 ,此结果与转基因鼠心室肌细胞动作电位时程延长相一致 ,与前期发表结果一致 (钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞Ito各成分下调 )。结论 积分法是药理学中一种简便准确的分析Ito的方法。
- 董德利孙志洁焦军东岳朋王庆徽方志伟杨宝峰
- 关键词：电生理学钾通道积分
- 红花黄素对氧自由基所致的心肌细胞电生理异常的保护作用(英文)被引量：6
- 2004年
- 背景:氧自由基诱导的功能异常可能使心脏、肝脏、肾脏及脑等组织缺血性疾病的主要致病因素,对损伤有保护作用的药物研究成为当前的热点。目的:研究红花黄素(Saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞损伤的保护作用。设计:非随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在哈尔滨医科大学药学院药理教研室完成。实验选用豚鼠30只,性别不限。以处置前单个心室肌细胞为正常对照,预先应用红花黄素(3.3μg/L)后,给予单个豚鼠心室肌细胞外源性氧自由基(1mmol/L的H2O2)。主要观察指标:采用全细胞膜片钳技术,观察单个豚鼠心室肌细胞动作电位时程(actionpotentialdurationAPD)和L-型钙电流、内向整流钾电流。结果:1mmol/L的H2O2导致豚鼠心室肌细胞损伤,表现为动作电位时程缩短,APD50和APD90分别由正常对照组的(331.2±31.9)ms和(380.8±28.2)ms缩短至(169.5±76.0)ms和(238.4±21.3)ms(n=8,t=3.834,P<0.01),红花黄素(3.3μg/L)能明显改善H2O2诱发的动作电位时程缩短;同时氧自由基H2O2抑制L-型钙电流,+10mV时,L-型钙电流峰值由对照的(-1023.45±74.34)pA减少到(-275.21±38.67)pA(n=6,P<0.001);H2O2(1mmol/L)也明显抑制内向整流钾电流(IK1),指令电位为-120mV时,IK1由对照组的(-2133.
- 单宏丽杨宝峰李玉荣李永华徐长庆
- 关键词：自由基细胞学技术
- 苦参碱与E-4031,多非利特和RP58866对家兔心肌I_(k1)的作用比较(英文)被引量：6
- 2004年
- 目的 比较苦参碱与E 4 0 31,多非利特和RP5 886 6对家兔单个心室肌细胞的内向整流钾电流(Ik1)的效价和效能的不同 ,揭示苦参碱抗心律失常作用弱于西药的原因。方法 应用全细胞膜片钳技术记录苦参碱与E 4 0 31,多非利特和RP5 886 6对家兔Ik1的影响。结果 苦参碱 1和 10 μmol·L- 1对家兔Ik1无明显影响。在实验电压为 - 12 0mV和保持电压为 - 70mV ,苦参碱 5 0和 10 0 μmol·L- 1对Ik1分别抑制达 6 % (n =8,P <0 .0 5 )和 8% (n =8,P <0 .0 5 ) ;在实验电压为 - 5 0mV ,抑制Ik1达 4 % (n =8,P <0 .0 5 )和 8% (n =8,P <0 .0 5 )。在实验电压为 - 12 0mV ,E 4 0 311和 10 μmol·L- 1使Ik1分别降低10 % (n =6 ,P <0 .0 5 )和 4 5 % (n =6 ,P <0 .0 5 )。在 - 5 0mV ,Ik1分别降低 5 % (n =6 ,P <0 .0 5 )和35 % (n =6 ,P <0 .0 5 )。在实验电压为 - 12 0mV ,多非利特 1和 10 μmol·L- 1使Ik1降低 19% (n =8,P <0 .0 5 )及 2 5 % (n =8,P <0 .0 5 )。在 - 5 0mV ,Ik1分别降低 11%和 19% (n =8,P <0 .0 5 )。在实验电压为 - 12 0mV ,RP5 886 6 1和 10 μmol·L- 1使Ik1分别降低 2 1% (n =8,P <0 .0 5 )和 5 0 % (n =8,P <0 .0 5 )。在 - 5 0mV ,Ik1分别降低 6 % (n =8,P <0 .0 5 )和11% (n =8,P <0 .0
- 杨宝峰李宝馨周宇宏董德利单宏丽王玲
- 关键词：苦参碱E-4031多非利特心肌
- 高胆固醇血症对大鼠心室肌细胞离子电流的作用(英文)被引量：2
- 2007年
- 目的:观察高胆固醇血症对大鼠心室肌细胞离子电流的作用。方法:通过全细胞膜片钳技术记录用酶解法分离的正常和高胆固醇饮食的大鼠心室肌细胞离子电流。结果:高胆固醇组(组Ⅱ)血清总胆固醇水平明显高于正常组(组Ⅰ)[(3.10±0.62)mmol.L-1vs(1.18±0.37)mmol.L-1,P<0.01, n=20]。组Ⅱ血清甘油三酯也明显高于组Ⅰ[(1.51±0.30)mmol.L-1vs(0.43±0.15)mmol.L-1,P<0.01, n=20]。组Ⅱ大鼠心室肌细胞动作电位时程(APD)与组I相比明显延长,APD50从(70.86±8.12) ms延长至(116.16±6.90) ms (n=10, P<0.01); APD90从(95.10±7.27) ms延长至(144.04±7.39) ms (n=10, P<0.01);在实验电压-120 mV, Ik1从( -16.98±4.54) pA/pF(组I)增加到( -19.92±4.08) pA/pF(组Ⅱ)(n=12, P<0.05);在实验电压0 mV, ICa -L从( -8.56±1.29) pA/pF(组Ⅰ)减少到( -5.24±0.90) pA/pF(组Ⅱ)(n=10, P<0.01);在实验电压+60 mV,Ito从(13.20±1.97) pA/pF(组I)减少到(10.30±1.97) pA/pF(组Ⅱ)(n=8, P<0.05)。结论:高胆固醇血症可显著改变心肌细胞离子电流密度的大小,对心脏具有毒性作用。
- 周宇宏王玲单宏丽张妍孙宏丽杨宝峰
- 关键词：高胆固醇血症钾电流钙电流膜片钳术
