重庆市自然科学基金(CSTC2012JJA80032)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 相关作者：陈斌何正波时红冉永红黄婷更多>>
- 相关机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 东亚飞蝗prolixicin基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2013年
- 猎蝽素(Prolixicin)是最先发现于长红猎蝽Rhodnius prolixus中的一种抗菌肽.本研究通过分析东亚飞蝗[Locusta migratoria manilensis(Meyen)]转录组数据库,获得东亚飞蝗prolixicin基因的cDNA序列,命名为LmProx.LmProx全长394 bp,包含一个282 bp的完整开放阅读框,编码93个氨基酸,理论分子量(Mr)为9.97×103.氨基酸序列的N端有一个信号肽,C端有一个富含甘氨酸的G结构域.同源性分析表明LmProx与长红猎蝽的prolixicin同源性最高,一致性为48%,相似性为60%.进化关系分析表明,LmProx与长红猎蝽prolixicin的亲缘关系最近.基因定量分析显示,大肠杆菌刺激后2 h,LmProx的表达明显上调,至8 h表达量达到最高,随后开始缓慢下降,但仍然维持较高的表达水平,直到72 h还显著高于对照.在未经大肠杆菌诱导的东亚飞蝗中,LmProx在脂肪体中的表达水平最高,其次是中肠,在头部和体壁中的表达水平较低;在诱导后的东亚飞蝗中,脂肪体和中肠中的LmProx表达显著增高,而头部和体壁中的表达水平没有变化.研究结果显示LmProx基因在大肠杆菌侵染后,迅速表达,且能持续较长时间的高水平表达,说明LmProx基因在东亚飞蝗的免疫防御过程中起着重要作用;脂肪体和中肠是LmProx基因主要诱导表达的器官.
- 时红陈斌何正波
- 关键词：东亚飞蝗抗菌肽实时定量PCR
- 中华按蚊气味结合蛋白基因AsinOBP1的克隆和表达分析被引量：10
- 2014年
- 【目的】蚊虫的行为在很大程度上依赖于嗅觉系统,例如寻找宿主和产卵场所等。中华按蚊Anopheles sinensis是我国最重要的传疟媒介之一,但有关中华按蚊嗅觉信号传递过程的研究甚少。本研究旨在克隆和表达分析中华按蚊的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)基因,为进一步研究中华按蚊嗅觉传递的分子机制奠定基础。【方法】通过分析中华按蚊的转录组数据克隆气味结合蛋白基因,采用RT-PCR和实时定量PCR技术分析该基因在成虫不同组织和在吸血前后的表达模式。【结果】克隆到一个气味结合蛋白基因,命名为Asin OBP1(Gen Bank登录号为KJ958382)。Asin OBP1基因开放阅读框长435 bp,编码144个氨基酸,具有典型的6个半胱氨酸位点。RT-PCR组织表达谱分析发现,Asin OBP1在检测的所有成虫触角、下颚须、喙和头部组织中都有表达,而在足和去掉头部以外的躯体组织中不表达。定量分析发现Asin OBP1在雌蚊触角中的表达水平最高,吸食血液后,Asin OBP1的表达水平显著下降;仅用小鼠气味处理后,Asin OBP1的表达水平也显著下降。【结论】研究结果说明Asin OBP1可能是嗅觉组织特异性表达的基因,与雌蚊寻找宿主等行为有关,其功能还需深入研究。
- 秦赠冉永红支中婧闫振天张玉娟黄婷何正波陈斌
- 关键词：中华按蚊气味结合蛋白组织表达谱定量PCR吸血
- 东亚飞蝗fem-1基因的克隆与表达分析被引量：3
- 2013年
- 秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans fem-1基因是性别决定的关键基因。本研究基于生物信息学方法从东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis的转录组数据库中克隆出了线虫fem-1的3个同源基因,将其分别命名为Lmfem-1a,Lmfem-1b和Lmfem-1c(GenBank登录号分别为AB698670,AB698671和AB698672)。其cDNA序列长度分别为2 233,2 625和2 142 bp,分别编码662,642和638个氨基酸。生物信息学分析显示,Lmfem-1a,Lmfem-1b和Lmfem-1c分别含有6,8和8个典型的锚蛋白重复序列模体。组织表达谱分析发现,Lmfem-1a,Lmfem-1b和Lmfem-1c基因在检测的所有组织中都有表达,但均在精巢中的表达水平最高,说明Lmfem-1a,Lmfem-1b和Lmfem-1c基因可能参与东亚飞蝗的多种生理过程,并受到严格的表达调控。而且,随着精巢的发育,Lmfem-1a,Lmfem-1b和Lmfem-1c的表达均逐渐增强,可能与东亚飞蝗的精子形成有关,但这3个基因是否参与东亚飞蝗的性别决定还有待进一步研究。
- 时红郝友进陈斌司凤玲王鹏何正波
- 关键词：东亚飞蝗生物信息学分析表达谱定量PCR
