博士科研启动基金(2008C17)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：刘彦明郑君德肖洪广马红梅陈涛更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院汕头大学平度市人民医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金广东省自然科学基金广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
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- 流感病毒H1N1感染后宿主细胞MTH1基因表达的研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化。方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量。结果甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3hMTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48h表达量显著低于正常对照组。结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用。
- 马红梅郑君德肖洪广刘彦明蒋月婷李伟强罗嘉莉曹顺旺
- 关键词：甲型H1N1流感病毒RT-PCR基因表达
- 甲型H1N1流感病毒致宿主细胞脱氧核糖核酸氧化损伤的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:通过检测DNA损伤标志物8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)在甲型H1N1型流感病毒感染MDCK细胞中的表达,初步探讨甲型H1N1型流感病毒诱导细胞凋亡的脱氧核糖核酸(DNA)损伤机制。方法:MDCK细胞培养后,甲型H1N1流感病毒感染继续培养0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h,细胞爬片免疫组织化学方法检测各时间点DNA损伤标志物8-oxo-dG的表达。结果:甲型H1N1流感病毒感染后各时间点实验组MDCK细胞8-oxo-dG的表达均显著高于相应的正常对照组(P<0.05),病毒感染各组间两两比较发现各组间差异显著。结论:甲型H1N1流感病毒感染能造成宿主细胞DNA氧化损伤。
- 郑君德刘彦明刘汉欣高月亭陈涛张丽梅余琳肖洪广
- 关键词：甲型H1N1流感病毒8-羟基脱氧鸟嘌呤
- MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%。结论本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量。
- 马红梅谢显功刘海燕刘彦明肖洪广李宁范婷婷郑君德
- 关键词：RT-PCRMDCK
